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–
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https://mcjournal.editorialdoso.com
ISSN:
3073
-
1356
217
Articulo
Efecto de
l
orégano (
Origanum Vulgare
L.) sobre bacterias
Gram negativas en huevos de gallinas
Hy Line
Brown
Effect of oregano (Origanum Vulgare L.) on Gram
-
negative bacteria in Hy Line
Brown hen eggs
Melany Ariana
Intriago
-
Villavicencio
1
*
,
Piedad Francisca
Yépez
-
Macías
2
,
María Mercedes
Mendoza
-
Peñarrieta
3
,
Adriana Fernanda
Vélez
-
Chévez
4
y
Jose Humberto
Vera
-
Rodriguez
5
1
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Facultad de Posgrado, Maestría en
Biotecnología Agropecuaria
,
Quevedo 120550
,
https://orcid.org/0009
-
0007
-
8417
-
1198
2
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Facultad de Posgrado, Maestría en
Biotecnología Agropecuaria
,
Quevedo 120550
,
https://orcid.org/0000
-
0002
-
8391
-
9527
,
pyepez@uteq.edu.ec
3
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Facultad de Posgrado, Maestría en
Biotecnología Agropecuaria
,
Quevedo 120550
,
https://orcid.org/0009
-
0005
-
5507
-
9785
,
maria.mendoza2015@uteq.edu.ec
4
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Facultad de
Posgrado, Maestría en
Biotecnología Agropecuaria
,
Quevedo 120550
,
https://orcid.org/0000
-
0002
-
5095
-
3403
,
adriana.velez2015@uteq.edu.ec
5
Universidad Agraria del Ecuador
,
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia,
Guayaquil, Ecuador
091307
,
https://orc
id.org/0000
-
0003
-
3027
-
059X
,
jhvera@uagraria.edu.ec
*
Correspondencia
:
melany.intriago2015@uteq.edu.ec
https://doi.org/10.70881/mcj/v4/n1/121
Resumen:
El objetivo del estudio consistió en e
valuar la eficiencia de un
nutracéutico a base de orégano en la inhibición de bacterias Gram negativas
como
Escherichia coli
,
Pseudomonas
spp. y
Salmonella
spp., en huevos de
gallinas Hy Line Brown
.
El estudio se desarrolló durante el año 2024 en la
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador. Se aplicó un diseño
experimental completamente aleatorizado con cuatro tratamientos (T1, T2,
T3, T4), que variaron en la concentración del nutracéutico de orégano. L
a
s
variables evaluadas fueron la presencia
y concentración de
E. coli
,
Pseudomonas
spp. y
Salmonella
spp., en la cáscara y contenido del huevo.
Los análisis microbiológicos se realizaron a intervalos de 0, 15, 30 y 45 días.
Utilizando medios selectivos de cultivo y técnicas de recuento estándar.
E
n
el muestreo inicial (día 0), los tratamientos con orégano (T2, T3 y T4)
redujeron
significativa
mente
las bacterias en comparación con el control (T1).
A los 15 días, T2 y T3 fueron más efectivos contra
Salmonella
spp., mientras
que T1 se observó una alta
concentración de
Pseudomonas
spp. A los 30
días, T1 y T2 lograron una mayor reducción de
Salmonella
spp.; sin embargo,
T3 y T4 fueron menos efectivos frente a
E
.
coli
y
Pseudomonas
spp.
En base
a los resultados se puede concluir que el
nutracéutico a base
de orégano es
una alternativa natural prometedora para mejorar la inocuidad alimentaria en
huevos mediante el control de bacterias patógenas.
Palabras clave:
calidad, contaminación bacteriana, control sanitario,
inocuidad, patógenos
.
Cita:
Intriago
-
Villavicencio, M. A.,
Yépez
-
Macías, P. F.,
Mendoza
-
Peñarrieta, M. M., Vélez
-
Chévez,
A. F., & Vera
-
Rodriguez, J. H.
(2026). Efecto del orégano
(
Origanum Vulgare
L.) sobre
bacterias Gram negativas en
huevos de gallinas
Hy Line
Brown.
Multidisciplinary
Collaborative Journal
,
4
(1), 217
-
232.
https://doi.org/10.70881/mcj/
v4/n1/121
Recibido:
10
/
11
/20
25
Revisado:
25
/
01
/20
26
Aceptado:
02
/
02
/20
26
Publicado:
11
/
02
/20
26
Copyright:
© 202
6
por los
autores
.
Este artículo es un
artículo de acceso abierto
distribuido bajo los términos y
condiciones de la
Licencia
Creative Commons, Atribución
-
NoComercial 4.0 Internacional.
(
CC
BY
-
NC
)
.
(
https://creativecommons.org/lice
nses/by
-
nc/4.0/
)
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Abstract:
The objective of this study was to evaluate the effectiveness of an oregano
-
based nutraceutical in inhibiting Gram
-
negative bacteria such as
Escherichia coli
,
Pseudomonas
spp., and
Salmonella
spp. in Hy
-
Line Brown chicken eggs. The study
was cond
ucted during 2024 at the State Technical University of Quevedo, Ecuador. A
completely randomized experimental design was used with four treatments (T1, T2,
T3, T4), which varied in the concentration of the oregano nutraceutical. The variables
evaluated wer
e the presence and concentration of
E. coli
,
Pseudomonas
spp., and
Salmonella
spp. on the eggshell and in the egg contents. Microbiological analyses
were performed at 0, 15, 30, and 45
-
day intervals using selective culture media and
standard counting techn
iques. In the initial sampling (day 0), the oregano treatments
(T2, T3, and T4) showed a significant reduction in bacteria compared to the control
(T1). At 15 days, T2 and T3 were more effective against
Salmonella
spp., while T1
showed a high concentration
of
Pseudomonas
spp. At 30 days, T1 and T2 achieved
a greater reduction in
Salmonella
spp.; however, T3 and T4 were less effective against
E. coli
and
Pseudomonas
spp. Based on these results, it can be concluded that the
oregano
-
based nutraceutical is a promising natural alternative for improving food
safety in eggs by controlling pathogenic bacteria
.
Keywords:
quality, bacterial contamination, sanitary control, s
afety, pathogens
.
1. Introducción
La producción de huevos en la industria avícola ha experimentado un notable aumento
debido a la alta demanda, ya que los huevos son una fuente de proteína de calidad y
bajo costo
(Chavarria et al., 2021)
. En Ecuador, se alcanzó una producción total de 3812
millones de huevos en 2022, lo que equivale a un
consumo de 212 huevos por habitante
al año (
Yasir et al.,
2024)
. Además, las provincias que se destacan por su destacada
producción son Tungurahua, Cotopaxi, Manabí y Pichincha
(Miranda, 2024)
.
Las
gallinas ponedoras, como las de la raza Hy
-
Line Br
own, son la principal fuente de
huevos para el consumo humano
(Vera
-
Rodríguez et al., 2019)
. La calidad y la
seguridad de estos huevos son factores críticos tanto para la industria como para la
salud pública
(Vera
-
Rodríguez et al., 202
3
)
.
Los huevos son reconocidos como una proteína de alta calidad y accesible, siendo una
fuente completa de nutrientes esenciales
(
Ojeda
-
Ojeda
et al., 202
4
)
. Contiene vit
aminas
como A, D, B12 y riboflavina, minerales como el yodo, el selenio y la colina, esenciales
para la salud del cerebro y el desarrollo fetal
(Díaz et al., 2020)
. La combinación de
proteínas y grasas saludables en los huevos promueve la saciedad y puede contribuir
a
l control del apetito
(
Gómez
et al., 2025)
. Además, los huevos contienen antioxidantes
como la luteína y la zeaxantina, que son beneficiosos para la salud ocular y son útiles
para el crecimiento y la reparación muscular
(
López
-
Sobaler
et al., 2025)
. Su ver
satilidad
en la preparación los convierte en una opción cómoda y económica para incluir en una
dieta equilibrada
(Sevilla et al., 2023)
.
La contaminación bacteriana, especialmente por cepas gramnegativas de bacterias
como
Escherichia
coli
,
Pseudomonas spp. y Salmonella spp.
,
representan un desafío
persistente en la producción de huevos
(Ortega et al., 2024)
. Estos patógenos notorios
pueden s
er dañinos para la salud de los consumidores y tener un impacto negativo en
la industria avícola
(Araujo et al., 2024)
. La presencia de estas
bacterias en los huevos
supone un riesgo significativo, lo que subraya la importancia de mantener estrictos
estándares de higiene y control de calidad a lo largo de la cadena de producción para
garantizar la seguridad alimentaria
(Valenzuela et al., 2021)
.
El
Servicio Ecuatoriano de Normalización, a través de
la Norma Técnica Ecuatoriana
(Norma Técnica Ecuatoriana, 2013)
, estableció los requisitos necesarios que deben
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cumplir los huevos comerciales y los ovoproductos para consumo humano
(Vera
-
Rodríguez et al., 2019)
, esto se llevó a cabo en 1973 y no ha sido modificado hasta la
fecha, y no se han reportado investigaciones sobre la calidad de los huevos de codorniz
que se distribuyen y comercializan en el país.
Se ha evidenciado que el aceite de
Origanum Vulgare
L. p
osee propiedades inhibitorias contra bacterias patógenas
(Rabelo
et al., 2024)
, lo que lo convierte en una opci
ón prometedora para combatir los
microorganismos dañinos en alimentos como los huevos Hy Line Brown. Un estudio
reciente demostró que el óleo esencial
O. vulgare
L. y su componente carvacrol, en
forma de nanoemulsiones, reducen significativamente la adhesi
ón y crecimiento de
Salmonella typhimurium
en carne de pollo, incluso en concentraciones subinhibitorias,
prolongando la fase lag bacteriana
(Díaz et al., 2020)
.
El presente artículo de investigación tuvo como objetivo evaluar la eficiencia de un
nutracéutico a base d
e orégano en la inhibición de bacterias Gram
-
negativas como
Escherichia coli
,
Pseudomonas
spp
. y Salmonella
spp
.
, en huevos de gallinas Hy Line
Brown.
2. Materiales y Métodos
La investigación se realizó durante el año 2024 en el Programa Didáctico de
Avicultura
y el Laboratorio de Bromatología, del Campus La María, perteneciente a la Facultad de
Ciencias Pecuarias y Biológicas de la Universidad Técnica del Estado de Quevedo. El
área de estudio se encuentra ubicado en el km 7 1/2 de la carretera Quevedo
-
El
Empalme, provincia de Los Ríos, Ecuador. Su ubicación geográfica es 01°06'00'' latitud
sur y 79°29'00'' latitud oeste, a una altitud de 73 m s. n. m.
Para el estudio se utilizaron
gallinas de la
línea
genética Hy
-
Line Brown de las cuales se
recolec
taro
n sus
huevos
a
partir
de
las
25 semanas de edad.
2.1.
Producción nutracéutica
La planta seleccionada fue
Origanum vulgare
L. (orégano), se llevó a cabo la selección
de las hojas, considerando la diversidad de tamaño y estructura
,
s
olo se eligieron
hojas
sanas, sin lesiones inducidas mecánicamente ni signos de patógenos. Posteriormente,
se trasladaron las muestras al Laboratorio de Bromatología de la Facultad de Ciencias
Ganaderas y Biológicas de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo, garantizand
o
condiciones higiénicas y adecuadas de almacenamiento.
En el
laboratorio, las hojas se lavaron con agua destilada, con el objetivo de eliminar la
mayor cantidad de impurezas posibles
, se las
deshidrató
durante
siete días a la sombra
y temperatura ambiente
utilizando láminas de papel de aluminio, revolviéndolas
manualmente dos veces
por
día. Posteriormente, se secaron en un horno con
recirculación de aire a una temperatura de 60 °C durante una hora.
Una vez secas, las
hojas se trituraron con un molino de ma
rtillos de cuchillas paralelo hasta obtener un
tamaño de partícula
s
de 1 mm. El polvo obtenido se tamizó con un colador fino de acero
inoxidable, con el fin de garantizar una textura uniforme. La harina nutracéutica se
conservó en frascos de color ámbar a
temperatura ambiente, protegiendo el producto
de la luz y evitando la descomposición de los compuestos activos.
Para obtener la esencia de orégano y evaluar su efecto sobre el crecimiento bacteriano,
se pesaron 20 g de hojas frescas de orégano y se mezclar
on con 250 ml de etanol. Las
hojas se maceraron cuidadosamente en un mortero con un poco de etanol hasta obtener
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una pasta homogénea. Esta mezcla se combinó con el etanol restante y se dejó reposar
durante 24 horas en un agitador mecánico para asegurar una
extracción uniforme de los
compuestos activos.
Tras el tiempo de reposo, la mezcla se destiló durante tres
horas, obteniendo aproximadamente un 50 % de esencia de orégano. La esencia
se colocó en tubos de ensayo y se centrifugó durante 15 minutos para eli
minar
las impurezas. Posteriormente, se filtró a través de papel de filtro colocado en un
vaso de precipitados, asegurándose de que la esencia estuviera limpia y lista
para su uso.
2.2.
Análisis bromatológico del nutraceútico
La determinación de la composi
ción bromatológica del nutracéutico se realizó mediante
procedimientos estandarizados en el laboratorio de Bromatología de la Universidad
Técnica Estatal de Quevedo. Para este análisis se tomó una muestra representativa de
200 g de harina de orégano, cuida
dosamente homogeneizada para asegurar su
representatividad. A partir de esta muestra se evaluaron las variables de humedad,
materia seca, cenizas y proteína cruda, parámetros considerados esenciales para
establecer la composición química de la dieta experi
mental y relacionar estos resultados
con los efectos microbiológicos observados en los huevos.
El contenido de humedad (%) de las muestras se determinó sometiendo los huevos a
una temperatura constante de 65 °C durante 48 horas, procedimiento que
permitió
eliminar de forma completa el agua presente. Luego, el peso seco se comparó con el
peso inicial para calcular el porcentaje de humedad. Este procedimiento permitió
cuantificar con precisión la pérdida de agua en las muestras y obtener un valor con
fiable
para este parámetro
. La fórmula utilizada fue:
La materia seca (%) se determinó de manera indirecta, a partir del cálculo obtenido en
la
medición de humedad. Este parámetro es importante porque representa la fracción
sólida del alimento, es decir, los nutrientes disponibles después de eliminar el conte
nido
de agua.
.
Para la determinación de cenizas (%), las muestras fueron sometidas a un proceso de
calcinación en mufla a 600 °C durante tres horas, lo que permitió eliminar la materia
orgánica y
conservar únicamente el residuo inorgánico.
Este análisis resultó indispensable para conocer la fr
acción mineral presente en la harina
de orégano, un componente clave en la nutrición animal.
El contenido de proteína cruda se determinó mediante el método Kjeldahl. Para este
análisis, se utilizó ácido clorhídrico 0,1 N como titulante, aplicando la
e
cuac
ión
para
determinar proteína
:
,
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I
ncluye factores como el volumen de ácido consumido en la titulación (VCH), el volumen
del blanco (Vb), el factor 1,401 correspondiente al peso atómi
co del nitrógeno y la
normalidad ácida. Este cálculo permitió determinar la cantidad de proteína disponible en
la harina de orégano, información clave para evaluar su aporte nutricional en la dieta
experimental.
Donde:
1,401
= Peso atómico del
nitrógeno.
NHCL
= Normalidad del ácido clorhídrico 0,1 N.
V
C
HI
= Volumen de ácido clorhídrico consumido en la valoración.
Vb
= Volumen objetivo 0,05.
2.3.
Inclusión
del
nutraceútico
en la dieta de ponedoras
S
e incluyó harina de hoja de orégano en diferen
tes proporciones según el diseño del
estudio.
Las
concentraciones en los tratamientos
fueron
: T1 con 0,5 % (295 g), T2 con
1,0 % (590 g), T3 con 1,5 % (885 g) y un tratamiento control T4 sin aplicación del
nutracéutico (0,0 %)
.
La composición de estas dietas se muestra en
la Tabla
1
.
Tabla
1
.
Composición de la dieta experimental con inclusión de orégano en polvo en gallinas Hy
-
Line Brown (1 a 6 semanas).
2.
4
.
Aislamiento
de las bacterias
patógenas
Las muestras fueron procesadas siguiendo protocolos estandarizados en microbiología.
En primera instancia, se realizó un raspado superficial de la cáscara y del contenido de
los huevos para luego inocularlos en medios selectivos como SS Agar, MacConkey Aga
r
y Agar Agar enriquecido con fosfato monopotásico, sulfato de magnesio y peptona
especial.
En total se analizaron 320 huevos de gallina, evaluados en cuatro momentos
distintos: 0, 15, 30 y 45 días, lo que permitió observar la evolución de los
microorganis
mos en el tiempo.
Una vez gelificados, los medios fueron sembrados con
las muestras
previamente diluida (1:10.000) proveniente de la cáscara del huevo
y se
incubaron durante 24 a 48 horas en condiciones adecuadas de temperatura. Finalmente,
se analizaron l
as colonias bacterianas presentes, identificando de manera específica la
incidencia de
E
.
coli
,
Salmonella
spp. y
Pseudomonas
spp
. en las muestras de huevo.
Alimentos
1
-
6 semanas
T
4
0 %
T1
0,5 %
T
2
1,0 %
T
3
1,5 %
Maíz
doméstico
56,932
70,700
60,751
54,668
Arroz en polvo
5,050
5,050
5,050
5,050
Pastel de soja 44
31,178
12,148
23,230
31,172
Harina de orégano
0,000
0,505
1,010
1,515
Ac. Palma
1,010
0,302
1,010
1,010
Carbonato de calcio
4,456
9,782
4,091
5,212
Fosfato monocálcico
1,566
1,705
5,050
1,564
Cloruro de sodio marino 98
0,505
0,505
0,505
0,505
Núcleo
0,303
0,303
0,303
0,303
TOTAL
100
100
100
100
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El procedimiento inició con la preparación de los medios: 31
,5 g de Agar SS, 26 g de
Agar MacConkey y una mezcla de 3,75 g de agar en polvo con 0,375 g de fosfato
monopotásico, 0,375 g de sulfato de magnesio y 1,5 g de peptona especial. Estos
componentes se disolvieron en 500 ml de agua destilada y se esterilizaron
en autoclave
durante 45 minutos para eliminar contaminantes. Una vez estériles, se manipularon en
cámara de flujo laminar y se vertieron en placas de Petri, que se desinfectaron con luz
ultravioleta durante 30 minutos antes de su uso.
Para la siembra, se
seleccionó un huevo por tratamiento, desinfectando la cáscara con
algodón impregnado en agua destilada. La muestra obtenida se colocó en tubos cónicos
y se inoculó en los tres tipos de medios de cultivo mediante una micropipeta de 20 µL.
Posteriormente, co
n la ayuda de un mango de vidrio Driglaski, se distribuyó
uniformemente el inóculo sobre la superficie de las placas. Cada placa se identificó con
el nombre del tratamiento, la fecha y el tipo de medio, y se incubó en estufa
bacteriológica durante cuatro d
ías.
2.
5
.
Caracterización morfológica de los agentes patógenos
La identificación morfológica de las bacterias se realizó bajo
e
l
método de tinción
de
Gram,
permit
iendo
diferenciar entre dos tipos principales de bacterias según la
composición de su pared celular. Este hallazgo sugiere la presencia de ciertos tipos de
bacterias en los huevos de las gallinas Hy
-
Line Brown que pueden ser relevantes para
evaluar la calidad s
anitaria de los huevos y tomar las medidas adecuadas de control y
prevención de enfermedades
(Vinet & Zhedanov, 2021)
.
La técnica de tinción de Gram
a
l teñir las bacterias, se dividen en dos grupos: Gram Positivo (colores violetas) y Gram
Negativo (color rosa). Este método es útil para determinar la
naturaleza de la infecció
n
.
El procedimiento comenzó con la recolección de las muestras, que fueron colocadas
cuidadosamente en portaobjetos estériles. Con ayuda de un palillo de madera se
extendieron en una fina capa y se dejaron secar al aire libre para
garantizar su
conservación.
Una vez secas, las muestras se fijaron aplicando metanol o un leve
calentamiento, con el fin de mantener su estructura. A continuación, se añadió el
colorante cristal violeta y, tras un enjuague con agua destilada, se aplicó lug
ol como
agente mordiente, dejándolo actuar unos minutos. Después se realizó la decoloración
con alcohol
-
acetona y un nuevo enjuague, para finalmente aplicar un colorante de
contraste, como safranina. Con este procedimiento las preparaciones quedaron listas
para observarse al microscopio óptico, lo que permitió clasificar las bacterias según su
forma y su reacción al colorante, en Gram positivas o Gram negativas
(Guerrero & Mejía,
2021)
.
2.
6
.
Recuento de bacterias gramnegativas
El recuento de bacterias gramnegativas se efectuó mediante la observación directa de
las placas de Petri incubadas, utilizando una lupa estereoscópica para visualizar el
crecimiento de
Salmonella spp., Escherichia coli y Pseudomonas
spp
..
Este
procedimient
o permitió cuantificar el número de colonias formadas y comparar los
resultados entre los diferentes tratamientos experimentales. Gracias a esta metodología
fue posible establecer si la inclusión de harina de orégano en la dieta de las gallinas
tuvo un efe
cto sobre la reducción de la carga bacteriana en los huevos
.
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2.
7
.
Técnica de inhibición
bacteriana
con
pr
esencia de orégano
Para
evaluar la acción antimicrobiana del orégano frente a bacterias patógenas
, las
colonias aisladas de
Salmonella
spp.
, E
.
coli
y
Pseudomonas
spp
.
fueron enfrentadas a
la esencia de orégano, registrándose la formación de halos de inhibición como indicador
de sensibilidad. Este método permitió confirmar las propiedades antimicrobianas
reportadas por otros autores
(Calderón et al., 2024)
quienes señalan que los
compuestos
fenólicos del orégano, como el carvacrol y el timol, poseen una elevada
capacidad para limitar el crecimiento bacteriano.
Cada muestra bacteriana se dividió en cuatro porciones, y en cada una se colocó un
papel de filtro impregnado con esencia de orégano.
Las placas se incubaron durante 24
horas, tras lo cual se observó inhibición del crecimiento bacteriano, lo que demostró la
acción antimicrobiana de la esencia sobre las bacterias presentes.
2.
8
.
Diseño de investigación
Se utilizó un diseño
completamente al azar (DCA) con cuatro tratamientos, ocho
repeticiones, conformando 32 unidades experimentales (UE), cada una integrada por
cinco gallinas alojadas en el mismo espacio y evaluadas en conjunto. Se recolectaron
cuatro huevos por repeticiones
a los 0, 15, 30 y 45 días, para un total 320 muestras. El
ensayo tuvo una duración de 45 días.
Para el análisis estadístico, se aplicó un ANDEVA, y para la comparación de medias, la
prueba de Tukey (P≤0,05)
bajo el software estadístico SPSS.
3.
Resultados
La observación microscópica evidencio la presencia de bacterias Gram
-
negativas en
forma de cocobacilos rosados, con predominio de coliformes. En el tratamiento T3,
correspondiente al día 0, se identificaron estructuras compatibles con bacilos, tal como
se
muestran en la Figura 1. Estos resultados sugieren una flora inicial compuesta
principalmente por bacterias Gram
-
negativas de interés microbiológico
.
Figura 1
. Presencia de bacteria Gram
-
negativas observadas mediante la tinción de
Gram en huevos de gallina Hy
-
Line Brown.
En el día 0, los tratamientos T1, T2, T3 y T4 no presentaron variaciones
estadísticamente significativas en el crecimiento de colonias bacteri
anas, lo que significa
que sus efectos fueron comparativamente invariables. Estos resultados se respaldan en
17 mm
17 mm
17 mm
T1
T2
T3
17 mm
T4
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el grafico de barras mostrado en la Figura 2, donde las barras de error representan ±
Error Estándar y las letras distintas indican diferencias sig
nificativas entre los promedios
.
Figura 2
. Efecto del tratamiento con harina de orégano sobre el crecimiento de
E
.
coli
en huevos de gallina ponedora (día 0) Hy
-
Line Brown
.
El tratamiento T1 presentó la mayor concentración unidades formadoras de colonias
(UFC) de
Pseudomonas
spp., evidenciando un nivel más alto de contaminación
bacteriana en comparación con los tratamientos T2, T3 y T4, que mostraron una
proliferación menor.
Estos resultados indican diferencia en la eficiencia de los
tratamientos con orégano para inhibir el crecimiento bacteriano. La Figura 3 respalda
estos hallazgos mediante un gráfico de barras con barras de error ± error estándar; y
letras que señalan difer
encias significativas entre los promedios
.
Figura 3
. Efecto del tratamiento con harina de orégano sobre el crecimiento de
Pseudomonas
spp. En huevos de gallina ponedoras (día 0).
Los tratamientos T3 y T2 presentaron la mayor concentración de UFC de
Salmo
nella
spp., evidenciando altos niveles de contaminación bacteriana. En contraste, los
tratamientos T1 y T4 mostraron una menor proliferación, lo que sugiere mayor eficacia
en la inhibición del crecimiento de este patógeno. La Figura 4 respalda estos result
ados
mediante un gráfico de barras con ± Error estándar y letras que señalan diferencias
significativas entre los promedios.
A
A
A
B
0
5
10
15
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T3
T1
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Figura 4
. Efecto de tratamiento con harina de orégano sobre el crecimiento de
Salmonella
spp. en huevos de gallinas ponedoras (dí
a 0).
Al día 15, el tratamiento T1 presentó la mayor concentración de UFC de
Salmonella
spp., lo que evidencia un nivel elevado de contaminación bacteriana. En contraste, los
tratamientos T4, T3 y T2 mostraron una menor proliferación, destacándose por su m
ayor
capacidad para limitar la expansión del patógeno. Estos resultados se ilustran en la
Figura 5, donde se muestran las medias con sus respectivas barras de error (± Error
Estándar) y las diferencias significativas entre tratamientos.
Figura 5
. Efecto
de tratamientos con harina de orégano sobre el crecimiento del
Salmonel
l
a
spp., en huevos de gallinas ponedoras (día 15).
El tratamiento T2 muestra una mayor concentración de unidades formadoras de colonias
(UFC) de
E. coli
(Figura 6), lo que indica altos niveles de contaminación bacteriana, en
comparación con el tratamiento T4, T1 y T3, demostrando una menor proliferación
ba
cteriana. Esta cifra demuestra una eficacia diferencial en la supresión o inhibición del
crecimiento de salmonela entre tratamientos, destacando T4, T2 y T3 por su notable
capacidad para limitar la expansión bacteriana.
A
A
A
A
0
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2
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Figura 6.
Efecto de tratamiento co
n harina de orégano sobre el crecimiento de
E. coli
en huevos de gallina ponedoras (día 15).
En la cuantificación de
Pseudomonas
spp., en huevos de gallina color marrón, el
tratamiento T2 mostró una diferencia estadísticamente significativa con respecto a
los
demás tratamientos, reflejada en una media más alta, lo que demuestra un efecto
marcadamente diferente. El tratamiento T4 también mostró una variabilidad significativa
en su rendimiento promedio. Por el contrario, los tratamientos T3 y T1 no mostraron
diferencias estadísticas, lo que indica que sus efectos fueron comparativamente
estables. Estos resultados se sustentan en la Figura 7
.
Figura 7
. Efecto de tratamiento con harina de orégano sobre el crecimiento
Pseudomonas spp
. en huevos de gallinas, ponedoras (día 15).
Al día 30, los tratamientos T3 y T4 presentaron la mayor concentración de UFC de
Salmonella
spp., mientras que los tratamientos T1 y T2 mostraron un menor crecimiento
bacteriano. Estos resultados se ilustran en
la Figura 8, que incluye las medias con sus
respectivas barras de error (± error estándar) y las diferencias significativas entre los
tratamientos
.
Figura 8
. Efecto de tratamientos con harina de orégano sobre el crecimiento de
Salmonella
spp. en huevos
de gallina ponedoras (día 30).
En la cuantificación de
E. coli
en huevos de gallina marrón de la línea Hy
-
Line Brown
,
los tratamientos T4 y T3 presentaron la mayor concentración de UFC, mientras que los
tratamientos T1 y T2 mostraron una menor proliferaci
ón bacteriana. Estos resultados se
ilustran en la Figura 9, que muestra las medias con sus respectivas barras de error (±
error estándar) y las diferencias significativas entre los tratamientos
.
A
A
AB
B
0
10
20
30
40
50
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t1
t4
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Figura 9
. Efecto de tratamientos con harina de orégano sobr
e el crecimiento de
E
.
coli
,
en huevos de gallinas, ponedoras (día 30).
En la cuantificación de
Pseudomonas
spp. en huevos de gallina color marrón, los
tratamientos T2 y T3 presentaron la mayor concentración UFC, mientras que los
tratamientos T4 y T1 most
raron una menor proliferación bacteriana. Estos resultados se
ilustran en la Figura 10, que muestra las medias con sus respectivas barras de error (±
error estándar) y las diferencias significativas entre los tratamientos.
Figura 10
. Efecto de los tratam
ientos sobre el crecimiento de la bacteria
Pseudomonas
spp. En huevos de gallinas ponedoras (día 30).
El día 45, el tratamiento T4 presentó la mayor concentración de UFC de
Salmonella
spp.
En comparación, los tratamientos T1, T2 y T3 mostraron niveles más
bajos de
crecimiento bacteriano. Estos resultados se ilustran en la Figura 11, que muestra las
medias con sus barras de error (± error estándar) y las diferencias significativas entre
los tratamientos.
Figura 11.
Efecto de tratamiento con harina de orégano sobre el crecimiento
Salmonella
spp. En huevos de gallina ponedora (día 45).
A
A
A
A
0
50
100
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T2
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A
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100
150
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A
A
A
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0
10
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En la cuantificación de
E
.
coli
en huevos de gallina marrón de línea alta, el tratamiento
T4 presentó la mayor concentración de UFC.
En comparación, los tratamientos T3, T2
y T1 mostraron niveles más bajos de proliferación bacteriana. Estos resultados se
ilustran en la Figura 1
2
, que muestra las medias con sus barras de error (± error
estándar) y las diferencias significativas entre los
tratamientos.
Figura 12
. Efecto de los tratamientos sobre el crecimiento de la bacteria
E. coli
. En
huevos de gallina ponedora (día 45).
En la cuantificación de
Pseudomonas spp.,
en huevos de gallina color marrón, los
tratamientos T4, T2 y T1 mostraron
la mayor concentración de UFC. En comparación,
el tratamiento T3 mostró una menor proliferación bacteriana. Estos resultados se ilustran
en la Figura 1
3
, que muestra las medias con sus barras de error (± error estándar) y las
diferencias significativas ent
re los tratamientos
.
Figura 13
. Efectos de tratamiento con harina de orégano sobre crecimiento de
Pseudomonas
spp. En huevos de gallinas ponedora (día 45).
La Figura 1
4
muestra el recuento de bacterias gramnegativas en huevos de gallinas
ponedoras tras la aplicación de diferentes tratamientos con orégano. Los tratamientos
T1, T2, T3 y T4 mostraron variaciones en la concentración de UFC, lo que demuestra
diferencias en la
proliferación bacteriana entre tratamientos. Las medias se presentan
con barras de error (± error estándar) y las letras indican diferencias significativas entre
tratamientos
.
A
A
B
B
0
20
40
60
80
T1
T4
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A
B
B
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Figura 14
. Morfotipos bacterianos en placas Petri inhibidos con extracto de o
régano en
huevos de gallina ponedora (día 45).
5
.
D
iscusión
La inclusión de harina de orégano (
Origanum vulgare
) en la dieta de gallinas
p
onedoras
Hy
-
Line Brown demostró un efecto favorable sobre la reducción de bacterias Gram
negativas en la superficie del huevo, lo cual representa un aporte relevante al
fortalecimiento de la bioseguridad alimentaria en sistemas de producción avícola (Sevilla
et al.,
2023). La menor presencia de
Salmonella
spp.,
E. coli
y
Pseudomonas
spp.
observada en los tratamientos con orégano sugiere una acción antimicrobiana efectiva
atribuida a los compuestos bioactivos presentes en esta planta, especialmente los
fenoles carvacro
l y timol. Estos compuestos actúan sobre la membrana celular de las
bacterias, alterando su permeabilidad y, por tanto, interfiriendo con funciones vitales,
como lo han demostrado Calderón et al. (2024).
Si bien la mayoría de los tratamientos con orégano
redujeron significativamente la
proliferación bacteriana, se detectó la presencia ocasional de
E
.
coli
y
Pseudomonas
spp. incluso en los tratamientos con las concentraciones más altas. Según Mendoza et
al. (2025) indica que esta variabilidad podría explica
rse por diferencias individuales en
la fisiología de las aves, la manipulación y el almacenamiento de los huevos, o la
resistencia inherente de ciertas cepas bacterianas (Aguilar et al., 2024).
Los resultados de este estudio también muestran que la contami
nación microbiana de
los huevos es un fenómeno multifactorial. A diferencia de lo reportado por De Farias et
al. (2024), quienes informaron ausencia total de
Salmonella
spp., en este caso se
detectó una presencia, incluso en el tratamiento testigo. Este ha
llazgo se relaciona con
lo reportado en sistema alternativos de producción, donde se ha identificado prevalencia
de
Salmonella
spp y
Pseudomonas
spp., superiores al 8 % en huevos de gallinas criollas
y de traspatio (Miranda, 2024), lo que subraya la
necesidad de estrategias
complementarias para su control.
Entre las principales limitaciones de la investigación se destaca la ausencia de un
análisis fitoquímico de la harina de orégano utilizada, lo que impidió determinar la
concentración exacta de compu
estos activos y establecer una relación directa entre
dosis y efecto antimicrobiano. Además, el estudio se centró únicamente en el análisis
microbiológico de la cáscara, sin evaluar el contenido interno del huevo, aspecto
fundamental al considerar posibles
mecanismos de contaminación transovárica.
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A partir de estos resultados, se recomienda que futuras investigaciones incluyan el
análisis del microbioma intestinal de las aves y la evaluación de la posible transferencia
microbiana desde el tracto reproductiv
o hacia el huevo. También resulta pertinente
comparar la eficacia de distintas presentaciones del orégano (harina, extracto seco y
aceite esencial) para establecer cuál ofrece mayor estabilidad, biodisponibilidad y un
efecto antimicrobiano más sostenido. L
a búsqueda de alternativas fitogénicas como el
orégano constituye así una estrategia prometedora para fortalecer la bioseguridad en la
avicultura frente a la creciente resistencia bacteriana.
6
.
Conclusiones
Los resultados obtenidos a lo largo del estudio
demuestran que la incorporación de
nutracéuticos a base de orégano en la dieta de gallinas ponedoras ejerció un efecto
inhibitorio sobre
E
.
coli, Pseudomonas
spp
.
y
Salmonella
spp. en huevos de gallina
marrón. Se observó que la magnitud de la reducción en
las unidades formadoras de
colonias variaba según el tratamiento, lo que demuestra que ciertos niveles de inclusión
del extracto lograron un control más efectivo de la proliferación bacteriana.
Estos hallazgos respaldan el potencial del orégano como una a
lternativa natural para
mejorar la calidad microbiológica de los huevos, proporcionando evidencia para
estrategias de manejo que buscan reducir el uso de antibióticos sintéticos sin
comprometer la inocuidad alimentaria. El uso de nutracéuticos de origen ve
getal puede
constituir una herramienta viable y sostenible para la producción avícola, con beneficios
tanto para la salud de las aves como para la inocuidad alimentaria
.
Contribución de los autores
:
Conceptualización,
JHV
-
R
.; metodología,
MAI
-
V
.,
PFY
-
M
y
MMM
-
P
.; software,
AFV
-
Ch
.; validación,
JHV
-
R
.; análisis formal,
JHV
-
R
.;
investigación,
MAI
-
V
.; recursos,
PFY
-
M
.
,
MMM
-
P
y
AFV
-
Ch
.
; redacción del borrador
original,
MAI
-
V
.; redacción, revisión y edición,
MAI
-
V
.
y
JHV
-
R
; visualización,
PFY
-
M
;
supervisión,
MMM
-
P
. Todos los autores han leído y aceptado la versión publicada del
manuscrito.
Financiamiento
:
Esta investigación
no incurrió financiación externa
.
C
onflicto de intereses
:
Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.
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