Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com ISSN: 3073 - 1356 395 Articulo Influencia de biocatalizadores naturales con levadura en la calidad sensorial del chocolate 70% In fluence of natural biocatalysts with yeast on the sensory quality of chocolate 70% Juliana Criollo - Feijoo 1 * 1 Carrera de Ingeniería Química, Facultad de Ciencias Químicas y de la Salud, Universidad T é cnica de Machala (UTMACH), Machala 070151, Ecuador ; https://orcid.org/0000 - 0002 - 8121 - 0880 * Correspondencia : jlcriollo@utmachala.edu.ec https://doi.org/10.70881/mcj/v4/n1/137 Resumen: El cacao ( Theobroma cacao L. ) es un cultivo estratégico para la economía ecuatoriana, pero las restricciones organolépticas de la variedad CCN - 51 han motivado la búsqueda de estrategias biotecnológicas para mejorar su fermentación. En esta investigación se probó el efecto de biocatal izadores naturales (pulpa de guayaba y mucílago de nopal) combinados con Saccharomyces cerevisiae (0.5% y 1%) sobre parámetros fisicoquímicos y sensoriales durante la fermentación y posterior elaboración de chocolate al 70%. Se utilizó un diseño factorial 2² con cuatro tratamientos y un control, en el cual se midió temperatura, pH y °Brix durante 7 días, así como también se realizó una evaluación sensorial utilizando escala hedónica de 5 puntos. Los tratamientos con biocatalizadores presentaron mayores aume ntos de temperatura (hasta 40,03 °C), disminución inicial del pH (3,63 3,83) que aumentó al día 7 (6,13 6,87) y sólidos solubles totales consumidos. No se encontraron diferencias significativas en color, olor, textura y apariencia, pero se encontraron tend encias positivas en sabor y amargor. Los resultados indican que la adición de biocatalizadores naturales beneficia la cinética fermentativa sin alterar la aceptabilidad sensorial. Palabras clave: F ermentación de cacao; biocatalizadores naturales; Saccharomyces cerevisiae ; calidad sensorial . Abstract: Cocoa ( Theobroma cacao L .) is a strategic crop for the Ecuadorian economy; however, the organoleptic limitations of the CCN - 51 variety have driven the search for biotechnological strategies to improve its fermentation process. In this study, the effect of natural biocatalysts (guava pulp and nopal mucilage) combined with Saccharomyces cerevisiae (0.5% and 1%) was evaluated on physicochemical and sensory parameters during fermentation and subsequent production of 70% chocolate. A 2² factorial design with four treatments and one control was applied, in which temperature, pH, and °Brix were measured over seven days. Additionally, sensory evaluation was perf ormed using a five - point hedonic scale. Treatments incorporating biocatalysts exhibited greater temperature increases (up to 40.03 °C), an initial decrease in pH (3.63 3.83) followed by an increase by day 7 (6.13 6.87), and complete consumption of total so luble solids. Cita: Criollo - Feijoo, J. (2026). Influencia de biocatalizadores naturales con levadura en la calidad sensorial del chocolate 70%. Multidisciplina ry Collaborative Journal , 4 (1), 395 - 409. https://doi.org/10.70881/mcj/ v4/n1/137 Recibido: 11 / 02 /20 26 Revisado: 14 / 03 /20 26 Aceptado: 16 / 03/ 20 26 Publicado: 18 / 03 /20 26 Copyright: © 202 6 por los autores. Este artículo es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos y condiciones de la Licencia Creative Commons, Atribución - NoComercial 4.0 Internacional. ( CC BY - NC ) . ( https://creativecommons.org/lice nses/by - nc/4.0/ )
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 396 No significant differences were observed in color, odor, texture, or appearance; however, positive trends were identified in flavor and bitterness. The results indicate that the addition of natural biocatalysts enhances fermentation kinetics without compromising sensory acceptability. Keywords: Cocoa fermentation ; natural biocatalysts ; Saccharomyces cerevisiae ; sensory quality. 1. Introducción El cacao ( Theobroma cacao L.) es nativo de Mesoamérica (México, Guatemala y Honduras), con evidencias arqueológicas de consumo de hace más de 5000 años a.C., lo que demuestra su importancia histórica, cultural y económica (Saltos & Intriago, 2024). Su nombre científico deriva del grie go y significa "alimento de los dioses", por el valor simbólico que tenía en las culturas prehispánicas (Navas et al., 2021). Actualmente el cacao es uno de los principales cultivos tropicales con mayor importancia económica a nivel mundial, siendo demanda do por mercados nicho por la calidad sensorial y el origen del grano ( Herrera - Feijoo et al., 2025 ; Rodríguez et al., 2022; Rios, 2020). En Ecuador, el cacao es un producto estratégico de exportación, pero prácticas inadecuadas en la postcosecha , específica mente en la fermentación, deterioran sus características organolépticas y disminuyen su valor comercial (Alvarado et al., 2020; Rosales et al., 2024). Antes del boom petrolero, el cacao fue uno de los principales motores de la economía nacional, por eso se lo llamó "Pepa de oro" (Mendoza et al., 2022). Actualmente también se estudian sus compuestos fitoquímicos, como flavonoides, polifenoles y metilxanti nas, relacionados con beneficios nutricionales y funcionales (Álvarez et al., 2022; Rocha et al., 2025 ). En Ecuador predominan las variedades Nacional y CCN - 51, siendo la primera apreciada por su aroma delicado y la segunda por su alta productividad, pero con restricciones organolépticas que han motivado estudios para mejorar la fermentación usando enzimas y microorganismos seleccionados ( Herrera - Feijoo et al., 2025 ; Morales et al., 2016; Lagos et al., 2024). La fermentación del cacao es una etapa determinante para generar precursores de aroma y sabor. En este proceso se llevan a cabo reacciones bioquímicas complejas, tales como desnaturalización proteica, liberación de aminoácidos libres, oxidación de polifenoles y generación de compuestos volátile s como aldehídos y ésteres (Saltos & Intriago, 2024 ; Chaudhary, Mongia, & Drake, 2025 ). Las levaduras ( Saccharomyces cerevisiae ) producen etanol, CO y enzimas hidrolíticas que degradan azúcares y liberan metabolitos secundarios; luego, las bacterias ácido - acéticas oxidan el etanol a ácido acético, generando aumentos de temperatura (hasta 50 °C) que matan al embrión y crean compuestos esenciales para el sabor (S. Á. Chávez et al., 2022; S. A. Chávez et al., 2023; Guzmán - Alvarez & Márquez - Ramos, 2021 ). En es te sentido, el uso de biocatalizadores naturales como el mucílago de nopal y la pulpa de guayaba se ha propuesto como una alternativa biotecnológica para mejorar la fermentación. Estos biocatalizadores albergan enzimas como el polifenol oxidasa (PPO), que catalizan la transformación de compuestos fenólicos y mejoran la
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com ı liberación de compuestos aromáticos precursores. Su asociación con cultivos iniciadores de levaduras seleccionadas resulta en una fermentación más controlada, predecible y eficiente, disminuy endo la variabilidad fisicoquímica del grano y estandarizando el perfil sensorial del chocolate (Alvarado et al., 2020; Rosales et al., 2024). En los últimos tiempos se ha vuelto de interés el uso de cultivos iniciadores seleccionados en la industria cacao tera, lo que permite la reproducibilidad del proceso fermentativo y la disminución de defectos sensoriales relacionados con fermentaciones espontáneas (Aguayo Zambrano et al., 2026) . Otros estudios han demostrado que la manipulación dirigida de comunidades microbianas puede mejorar la producción de metabolitos esenciales como ésteres y ácidos orgánicos, responsables del perfil aromático final del chocolate (Vásquez Cortez et al., 2025). Estas innovaciones no solo mejoran la competitividad del cacao ecuatoriano en los mercados internacionales, sino que también fomentan prácticas más sostenibles y tecnificadas en la cadena de valor del chocolate. El objetivo de la investigación fue evaluar el uso de biocatalizadores naturales enzimas PPO de mucílago de nopal y pulpa de guayaba en presencia de Saccharomyces cerevisiae en la fermentación de cacao CCN - 51 y su efecto en las propiedades fisicoquímicas y sensoriales del chocolate al 70 %, generan do estrategias sustentables para mejorar la calidad del cacao ecuatoriano. 2. Materiales y Métodos 2.1 Materiales El cacao CCN - 51 fue adquirida en una finca ubicada en el cantón Pasaje, la pulpa de guayaba se compró en Machala y el mucílago de nopal en la parroquia La Iberia. 2.2 Métodos La presente investigación fue de tipo experimental, descriptiva, cuantitativa, siguiendo la metodología de (Alvarado et al., 2020) con algunas adapta ciones . Se utilizó un diseño factorial 2 2 , donde el primer factor fue el porcentaje de levadura (0.5% y 1%) y el segundo los biocatalizadores naturales (pulpa de guayaba y mucílago de nopal) como se muestra en la Tabla 1. Se obtuvieron 4 tratamientos experimentales con 3 repeticiones cada uno y u n tratamiento control (T0). Tabla 1. Codificación de los tratamientos Tratamientos Código Levadura (%) Pulpa de guayaba (%) Mucílago de nopal (%) 1 T0 - - - 2 G1 0,5 2 -
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com ı 3 G2 1 2 - 4 N1 0,5 - 2 ,5 5 N2 1 - 2 ,5 Nota: T0: tratamiento control; G: Pulpa de guayaba; N: Mucílago de nopal 2.2.1 Proceso de fermentación Para el proceso de fermentación, s e recolectaron 80 mazorcas de cacao de la variedad CCN - 51, seleccionadas por su estado óptimo de madurez y libre de enfermedades o daños visibles, de las cuales se obtuvieron 50 libras de pulpa para el procesamiento. La fermentación se realizó en una caja microfermentadora de laurel (80 × 50 × 10 cm), dividida en 15 celdas con capacidad de 1,5 kg c ada una. Durante los 7 días de fermentación, los granos se removieron manualmente cada 24 horas, pasando las almendras del fondo hacia la parte superior para favorecer la oxigenación y homogenizar la temperatura. Se registró diariamente la temperatura; mie ntras que, variables como pH, y °Brix se evaluaron al inicio y al final del proceso. Se aplicaron tratamientos con combinaciones de levadura Saccharomyces cerevisiae (0,5% y 1%) y biocatalizadores naturales compuestos por pulpa de guayaba y mucílago de nopal, según lo indicado en la T abla 1. La levadura se activó con 100 ml de agua destilada a 40(°C , posteriormente se aplic ó a los cuatro tratamientos (G1, G2, N1 y N2) con sus repeticiones , ver F ig ura . 1 . Estos componentes pretenden mejorar la s características organoléptica s del chocolate, i mpactando positivamente el perfil de fermentación mediante la acción de enzimas como la polifenoloxidasa (Alvarado et al., 2020) . Después de la fermentación, las almendras fueron expuestas a un proceso de secado convencional, con remociones constantes cada 24 horas durante un periodo de 6 días bajo exposición solar , con la finalidad de disminuir la humedad del grano hasta un 7% . F igura 1 Etapa de fermentación del cacao CCN - 51: (a) Adición de levadura y biocatalizador natural , (b) fermentación anaeróbica y (c) fermentación aeróbica . a) b) c)
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com ı ı 2.2.2 Elaboración de l chocolate Para este proceso se adaptó la metodología de Alvarado et al (2020) con algunas modificaciones (Alvarado et al., 2020) . Para este proceso se realizó una selección y limpieza de granos de cacao secos , retirando manualmente las impurezas para evitar variaciones en las propiedades organolépticas del producto final . Posteriormente, se tostaron los granos de cacao a 150(°C durante 15 minutos, favoreciendo la separación de la testa y mejorando aroma, color y sabor. Los granos tostad os se m olieron en molino eléctrico, se repiti ó el proceso cuatro veces hasta alcanzar un tamaño de partícula de 30 40(µm, donde se obtuvo la pasta de cacao. A continuación, se incorpor ó azúcar (30 % p/p) en una mezcladora a 65 °C para homogenizar, reducir h umedad y facilitar el conchado. La mezcla se refin ó hasta alcanzar una textura cremosa con partículas de 25(µm. El conchado se realiz ó durante 6, lo que permiti ó la caramelización de azúcares, evaporación de humedad y eliminación de compuestos volátiles. C onsecutivamente , se realizó el proceso de templa do, donde se disminuyó la temperatura inicial de la pasta para estabilizar la cristalización de la manteca de cacao, mejorando el brillo, textura y estabilidad. Finalmente, se cal entó ligeramente (sin exceder 35(°C) para recuperar fluidez y se colocó en moldes adecuados, asegurando una solidificación uniforme sin burbujas de aire, obteniéndose las tabletas sólidas de chocolate. 2.2.3 Análisis organolépticos El análisis organoléptico se llevó a cabo con la participación de un panel de catadores no entrenados conformado por 30 personas. Los participantes no estaban entrenados en el análisis sensorial, pero se les proporcionó una capacitación corta sobre la esca la hedónica de 5 puntos (Tabla 2) , con el fin de garantizar una comprensión uniforme en la cual se valoraron atributos sobre el color, olor, sabor, textura, apariencia, y amargor. Cada muestra fue codificada con letras aleatorias para prevenir sesgos. Tabl a 2 Parámetros de calificación mediante escala Hedónica. Puntaje Calificación 5 Me gusta mucho 4 Me gusta poco 3 Ni me gusta ni me disgusta 2 Me disgusta poco 1 Me disgusta mucho
$QiOLVLVHVWDGtVWLFR 5HVXOWDGRV (IHFWRGHORVELRFDWDOL]DGRUHV\OHYDGXUDVREUHODV SURSLHGDGHV ILVLFRTXtPLFDV GXUDQWHODIHUPHQWDFLyQGHO FDFDR 7HPSHUDWXUD 7D EOD 3 ,QIOXHQFLD GH ORVELRFDWDOL]DGRUHVVREUH ODWHPSHUDWXUD GXUDQWHODHWDSD GH IHUPHQWDFLyQ HQORV WUDWDPLHQWRV Temperatura / Días Tratamiento s 0 1 2 3 4 5 6 7 1RWD
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 401 Figura 2 Efecto de los biocatalizadores sobre la temperatura durante la etapa de fermentación. Nota: T0: tratamiento control; G1: Pulpa de guayaba y 0,5 % levadura; G2: Pulpa de guayaba y 1 % levadura; N1: Mucílago de nopal y 0,5 % levadura; N2: Mucílago de nopal y 1 % levadura. Fuente: Elaboración propia. 3.1.2 pH En la Tabla 4 y Figura 3, se muestra que el potencial de hidrógeno (pH) se ve influenciado por el proceso de fermentación. Inicialmente, los granos de cacao sin fermentar presentaron valores entre pH 4 . Posteriormente, transcurridas las 24 horas, se regist ró una leve disminución en los tratamiento s cuyo pH osciló entre los 3,63 a 3,83 no se present aron diferencias significativas entre las muestras; por otro lado, el valor más alto pH 3,83 fue para el tratamiento T0; mientras que , el tratamiento G 2 obtuvo un pH de 3,63, esto puede atribuirse a la producción de ácidos orgánicos ( láctico y acético ) , generados por la actividad microbiana. Sin embargo, entre los días 0 y 7, se observó un aumento progresivo del pH, siendo más pronunciado en el tratamiento G 2 (de 4,55 a 6,87) en comparación con el T 0 (de 4 , 53 a 6,13). Tabla 4 Efecto de los biocatalizadores sobre el pH durante la fermentación de los granos de cacao. T0 4, 53 +/ - 0, 04 A 3,83 +/ - 0,25 A 6,13 +/ - 0,4 B G1 4 , 53 +/ - 0, 05 A 3,64 +/ - 0,35 A 6, 56 +/ - 0,15 AB
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 402 G2 4 , 55 +/ - 0, 0 1 A 3,63 +/ - 0,18 A 6, 87 +/ - 0,11 A N1 4 , 5 3 +/ - 0,0 1 A 3,65 +/ - 0,24 A 6, 45 +/ - 0,21 AB N2 4 , 5 4 +/ - 0,0 3 A 3 ,7 +/ - 0,05 A 6, 64 +/ - 0,25 AB Nota: Los datos se presentan como media ± desviación estándar (n = 3). Diferentes letras mayúsculas dentro de la misma columna indican diferencias significativas p ≤ 0,05 (Tukey). Figura 3 Efecto de los biocatalizadores sobre el pH durante la fermentación de los granos de cacao. Nota: T0: tratamiento control; G1: Pulpa de guayaba y 0,5 % levadura; G2: Pulpa de guayaba y 1 % levadura; N1: Mucílago de nopal y 0,5 % levadura; N2: Mucílago de nopal y 1 % levadura. Ela boración propia. 3.1.3 °Brix La T abla 5 y Figura 4 , se observa que el contenido de sólidos solubles (°Brix) disminuye progresivamente durante la fermentación, sin encontrarse diferencias significativas entre tratamientos. Esta disminución se debe a la degradación de azúcares por la acción microbiana, especialm ente de la levadura ( S accharomyces cerevisiae ). Al inicio, la masa fresca de cacao presentó un alto contenido de °Brix (18 19,33); sin embargo, en el día 1 los valores disminuyeron de 19,33 a 6 para el T0; mientras que, para el N1 pasó de 19,33 a 5. A l día 7 de fermentación se reportaron valores de 0 °Brix en todos los tratamientos .
0XOWLGLVFLSOLQDU\&ROODERUDWLYH-RXUQDO _9RO _1~P _ (QH 0DU _ _KWWSVPFMRXUQDOHGLWRULDOGRVRFRP 403 Tabla 5 Determinación del contenido de S ólidos solubles (°Brix) durante los días 0, 1 y 7 días de fermentación. °Brix /Días 0 1 7 T0 1 9,33 $ 6 $ 0 G1 1 8 $ 5 ,33 $ 0 G2 19,33 $ 5, 67 $ 0 N1 1 9,33 $ 5 $ 0 N2 19,33 $ 5, 33 $ 0 Nota: /RVGDWRVVHSUHVHQWDQFRPRPHGLDGHVYLDFLyQHVWiQGDUQ ’LIHUHQWHV OHWUDV PD\~VFXODVGHQWURGHODPLVPDFROXPQDLQGLFDQGLIHUHQFLDVVLJQLILFDWLYDVS 7XNH\ Figura 4 Variación del contenido d e sólidos solubles (°Brix) en los días 0, 1 y 7 días de fermentación. . Nota: 7WUDWDPLHQWRFRQWURO*3XOSDGHJXD\DED\OHYDGXUD*3XOSDGH JXD\DED\OHYDGXUD10XFtODJRGHQRSDO\OHYDGXUD10XFtODJRGH QRSDO\OHYDGXUD Fuente: (ODERUDFLyQ SURSLD 3.2 Determinación de humedad de l os granos de cacao seco. Humedad (QOD7DEOD VHSUHVHQWDQORVSRUFHQWDMHVGHKXPHGDGREWHQLGRV GHVSXpV G HOVHFDGR GHODVDOPHQGUDVGHFDFDRREVHUYiQGRVHTXHWRGRVORVWUDWDPLHQWRVVHPDQWXYLHURQ GHQWURGHOUDQJRySWLPR FRQXQSURPHGLRFHUFDQRDOYDORULGHDOGHO(O
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 405 Los análisis de varianza (ANOVA) realizados para los atributos sensoriales de color, olor, textura y apariencia del chocolate al 70% elaborado a partir de Theobroma cacao L. no mostraron diferencias estadísticamente significativas entre los cinco tratamien tos evaluados (T 0 , G1, G2, N1, N2 ) . Esto condujo a la aceptación de la hipótesis nula y e l rechazo de la hipótesis alternativa, lo que indica que las variaciones en la concentración de levadura y en el tipo de biocatalizador utilizado durante la fermentaci ón no influyeron de manera significativa en las características organolépticas evaluadas. Como resultado , se puede inferir que estos factores no generaron un impacto perceptible en el color, olor, textura y apariencia del producto final. 4. Discusión Los resultados de este estudio demuestran el impacto de biocatalizadores naturales y cultivos iniciadores de levaduras sobre la cinética térmica y bioquímica de la fermentación de cacao CCN - 51. El aumento de temperatura a casi 40 °C corrobora la intensificación de la actividad metabólica microbiana, catalizando reacciones cruciales como la oxidación de etanol a ácido acético y la generación de compuestos aromáticos precursores. Lagos et al. (2024) informan que la adición controlada de levaduras pu ede aumentar gradualmente la temperatura hasta 40 °C en la fermentación del CCN - 51, maximizando la actividad enzimática. Además, investigaciones recientes señalan que controlar la temperatura entre 40 y 50 °C es crucial para prevenir sobre fermentaciones q ue afecten las características sensoriales del grano (Vásquez et al., 2023; Rosales et al., 2024). Temperaturas por debajo de 40 °C pueden inhibir las reacciones bioquímicas para la formación de compuestos aromáticos y la inactivación del embrión, como ind ica Ibrahim et al. (2024) , quienes destacan el control térmico. En relación al pH, la masa fresca de cacao tiene valores iniciales de 3 - 4, que aumentan a medida que avanza la fermentación. En este estudio se elevó hasta 6,87 al día 7, similar a lo reportad o por Homem et al. (2017), quienes indican que pH finales <5 pueden favorecer la permanencia de ácidos no volátiles indeseables que perjudican la formación de precursores de aroma. De igual manera, Vera et al. (2023) informaron que el pH aumentó de 3,9 a 4 ,51 al día 5 de fermentación, demostrando que el control de la acidificación es crucial para mejorar la calidad sensorial. Estudios recientes también señalan que los cambios en el pH se asocian con la sucesión microbiana y la liberación de ácidos al exteri or del grano ( Rocha et al., 2025 ; Saltos & Intriago, 2024; Rojas - Rojas, Hernández - Aguirre, & Mencía - Guevara, 2021 ). En cuanto al contenido de sólidos solubles (°Brix), la disminución gradual que se aprecia es evidencia de que los microorganismos fermentati vos están aprovechando los azúcares. García et al. (2021) informaron valores finales entre 0,3 y 0,4 °Brix en almendras fermentadas con probióticos, similar a lo encontrado en esta investigación. Vásquez et al. (2023) indican que la reducción de °Brix en l a postcosecha se relaciona con el consumo de azúcares por levaduras y bacterias, asegurando una buena fermentación. Como señalan Thompson et al. (2020), los azúcares simples son cruciales para la producción de alcoholes y ácidos orgánicos. Además, sugieren
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 406 humedades entre 6 y 7 % para garantizar estabilidad microbiológica y viabilidad comercial, pero nunca por debajo del 5 %. A nivel sensorial, los tratamientos con Saccharomyces cerevisiae mejoraron la aceptabilidad sensorial en la evaluación hedónica. Este resultado concuerda con Lagos et al. (2024), que señalan que la mezcla de levaduras y bacterias lácticas puede estandarizar la fermentación y disminuir la variabilidad fisicoquímica. Finalmente, la adición de polifenol oxidasa (PPO) obtenida de los biocat alizadores permitió la oxidación controlada de compuestos fenólicos, reduciendo la astringencia y generando mejores notas aromáticas. Morales et al. (2016) encontraron que la aplicación controlada de PPO y levaduras en la fermentación del CCN - 51 influye en la calidad sensorial del chocolate. Otros estudios también informan que el uso de cultivos iniciadores seleccionados mejora la reproducibilidad sensorial y disminuye los fallos fermentativos ( Aguayo Zambrano et al., 2026 ), lo que apoya los hallazgos del presente trabajo. 5. Conclusiones En este trabajo se demostró que el uso de biocatalizadores naturales en combinación con Saccharomyces cerevisiae es una alternativa para mejorar la fermentación de cacao CCN - 51. Los tratamientos analizados mo straron mayor movimiento térmico que el control, creando condiciones favorables para la transformación bioquímica del grano. La caída inicial del pH y su posterior aumento indican una fermentación controlada, con producción y volatilización de ácidos orgán icos. Además, la disminución total de sólidos solubles al día 7 indica que se están consumiendo eficientemente los azúcares, esenciales para la formación de precursores de aroma. Sensorialmente, si bien no se encontraron diferencias estadísticas en la mayo ría de los atributos analizados, las tendencias encontradas en sabor y amargor sugieren que los biocatalizadores podrían tener un efecto en la percepción global del chocolate. Esto indica que la adición de ingredientes naturales como pulpa de guayaba y muc ílago de nopal puede mejorar el perfil organoléptico sin afectar la aceptabilidad del producto. La mayor contribución de esta investigación es la verificación experimental de una solución biotecnológica sostenible utilizando subproductos agrícolas, innovan do así la cadena de valor del cacao. Los resultados apoyan el uso de cultivos iniciadores y biocatalizadores para estandarizar procesos fermentativos, disminuir la variabilidad y mejorar la competitividad del cacao ecuatoriano en nichos de mercado. Estudio s futuros deberán ahondar en análisis cromatográficos de compuestos volátiles y análisis sensoriales con paneles entrenados para corroborar el efecto aromático a nivel descriptivo y cuantitativo. Financiamiento: Esta investigación no ha recibido financiaci ón externa Declaración de disponibilidad de datos: Los datos están disponibles previa solicitud a los autores de correspondencia: jlcriollo@utmachala.edu.ec
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 407 Conflicto de interés: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses Referencias Bibliográficas Aguayo Zambrano, K. J., Zambrano Ureta, M. P., García Paredes, R. I., & Fajardo Navarrete, P. C. (2026). Cultivos iniciadores y su efecto en la calidad de almendras y l icor de cacao. Revista Ciencia UNEMI, 19(50), 152 165. https://doi.org/10.29076/issn.2528 - 7737vol19iss50.2026pp152 - 165p Alvarado, V. K., Vera, C. J., Tuarez, G. D., & Intriago, F. F. (2020). Fermentación de cacao (Theobroma cacao L.) con adición de levadura (Saccharomyces cerevisiae) y enzima (PPO´s) en la disminución de metales pesados. Centrosur , 1 24. https://www.centrosuragraria.com/index.php/revista/article/view/191 Álvarez, F. C. O., Liconte, S. N. D., Pérez, S. E. E., Lares, Amaíz. C. D. M., & Perozo, G. J. G. (2022). Revisión sobre los atributos físicos, químicos y sensoriales com o indicadores de la calidad comercial del cacao. Petroglifos Revista Crítica Transdisciplinar , 1 14. https://doi.org/10.5281/zenodo.6548316 Chaudhary, V., Mongia, G., & Drake, M. A. (2025). Approaches to determine the flavor and flavor chemistry of cocoa beans and cocoa liquor. Journal of Food Science. Advance online publication. https://doi.org/10.1111/1750 - 3841.70481 Chávez, S. Á., Cueva, B. A., Muñoz, D. V., Documet, P. K., & Vidaurre, R. P. (2022). Beneficio del cacao clones CCN - 51, ICS - 39 y cacao Nativo (Theobroma cacao L.). Revista Agrotecnológica Amazónica , 2 (1). https://doi.org/10.51252/raa.v2i1.255 Chávez, S. A., Guevara, P. A., Encina, Z. C., Vidaurre, R. P., & Muñoz, D. V. (2023). Condiciones de fermentación y secado en las características físico químicas del cacao (Theobroma cacao L.) Cultivar CCN 51. Revista Agrotecnológica Amazónica , 3 (2), e555. https://doi.org/10.51252/raa.v3i2.555 García, R. P. A., Nuñez, J. M., & Bahamón, M. A. F. (2021). Característic as fisicoquímicas y sensoriales de almendras fermentadas de cacao nacional (Theobroma Cacao L.) con adición de probióticos en el centro de investigaciones amazónicas, Cimaz Macagual (Caquetá, Colombia). INGENIERÍA Y COMPETITIVIDAD , 23 (2). https://doi.org/10.25100/iyc.23i2.10885 Guzmán - Alvarez, R. E., & Márquez - Ramos, J. G. (2021). Fermentation of cocoa beans. In Fermentation Processes, benefits and risks (pp. 127 147) . http://dx.doi.org/10.5772/intechopen.98756
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Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 1 | Ene Mar | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 409 activity of fermented and dried floodplain cocoa beans in the Brazilian Amazon? Foods, 14, 1391. https://doi.org/10.3390 /foods14081391 Rodríguez, V. N. D., Chávez, R. B., Gómez, de la C. I., Vásquez, M. M. S., & Estrada, de los S. P. (2022). El cultivo del cacao, sus características y su asociación con microorganismos durante la fermentación. Revista Alianzas y Tendencias BUAP (AyTBUAP) , 1 16. https://doi.org/10.5281/zenodo.6326782 Rojas - Rojas, K., Hernández - Aguirre, C., & Mencía - Guevara, A. (2021). Transformaciones bioquímicas del cacao (Theobroma cacao L.) durante un proceso de ferme ntación controlada. Agronomía Costarricense, 45(1), 53 65. ISSN:0377 - 9424 / 2021 . https://www.scielo.sa.cr/pdf/ac/v45n1/0377 - 9424 - ac - 45 - 01 - 53.pdf Rosales, V. B. S., García, C. L., Pérez, F. J. G., Contreras, L. E., Pérez, E. E., & García, M. C. (2024). Influencia de la fermentación del cacao y del uso de cultivos iniciadores sobre las características organolépticas del chocolate: un análisis integra l. Pädi Boletín Científico de Ciencias Básicas e Ingenierías Del ICBI , 12 (23), 31 43. https://doi.org/10.29057/icbi.v12i23.12047 Saltos, D. W. A., & Intriago, F. F. G. (2024). Mejoramiento de los p rocesos de fermentación para la elaboración de chocolate del Centro Agrícola del Cantón Quevedo Improvement of Fermentation Processes for Chocolate Production at the Agricultural Center of Canton Quevedo. JOURNAL OF SCIENCE AND RESEARCH , 9 (1), 2528 8083. https://doi.org/10.5281/zenodo.10472300 Vásquez, C. L. H., Rivadeneira, B. C. S., Intriago, F. F. G., Durazno, D. L. A., Vera, C. J. F., & Arboleda, Á. L. F. (2023). UTILIZACIÓN DE EXTRACTO DE JACKFRUIT (ARTOCARPUS HETEROPHYLLUS) COMO ESTRATEGIA PARA MEJORAR LA CALIDAD DEL GRANO DE CACAO. Revista Científica Multidisciplinaria InvestiGo , 4 (8), 95 117. htt ps://doi.org/https://doi.org/10.56519/g3zy6452 Vásquez Cortez, L.H; Rodríguez Cevallos, S.L; Cadena Morales, L.I; Plua Montiel, J.A; Camacho López, C.O; Cobos Mora, F. J; Pinargote Mendoza, E.R y Pazmiño Pérez, A.M. (2025). Aroma, Ciencia y Tradición: Nuev as fronteras en la fermentación del cacao. Ediciones GESICAP. 115 pp. Vera, C. J. F., Benavides, V. J. I., Vásquez, C. L. H., Alvarado, V. K. E., Reyes, P. J. J., Intriago, F. F. G., Naga, R. M., & Castro, T. V. L. (2023). Efectos de dos métodos fermentati vos en cacao (Theobroma cacao L.) trinitario, inducido con Rhizobium japonicum para disminuir cadmio. Revista Colombiana de Investigaciones Agroindustriales , 10 (1), 95 106. https://doi.org/10.23850/242 20582.5460