Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol . 0 4 | Núm . 0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com ISSN: 3073 - 1356 111 Artic ulo Producción de diferentes cepas comerciales de Trichoderma harzianum en sustrato de arroz y su efecto a la exposición de luz Production of different commercial strains of Trichoderma harzianum in rice substrate and their response to light exposure Angie Pamela L opez Orellana 1 * , Haidee Azucena Macias Rojas 2 , Axel Samuel Palacios Mayorga 3 , Gladys Alexandra Jeres Caguana 4 y Doris Jannela Moncayo Vera 5 1 Universidad Estatal de Milagro , Ecuador, 091703 , https://orcid.org/0000 - 0003 - 2698 - 4979 2 Instituto Superior Tecnológico La Troncal, La Troncal, Ecuador, 030302 , https://orcid.org/0000 - 0003 - 1163 - 9881 , haidee35maciasr@hotmail.com 3 Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Quevedo 120550 , https://orcid.org/0000 - 0001 - 5123 - 3953 , axel.palacios2015@uteq.edu.ec 4 Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Quevedo 120550, https://orcid.org/000 0 - 0001 - 5332 - 3725 , gladys.jeres2015@uteq.edu.ec 5 Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Quevedo 120550, https://orcid.org/0000 - 0002 - 5341 - 3947 , doris.moncayo2015@uteq.edu.ec * Correspondencia : alopezo3@unemi.edu.ec https://doi.org/10.70881/mcj/v4/n3/171 Resumen: Optimizar la producción masiva de Trichoderma en arroz es crucial para la agricultura sostenible . El objetivo del estudio consistió en evaluar la producción de diferentes cepas comerciales de Trichoderma harzianum cultivadas en sustrato de arroz, analizando de forma particular su comportamiento y rendimiento bajo condiciones de exposición a la luz . Para esto s e activaron tres cepas comerc iales de T . harzianum en PDA, confirmando su morfología. El inóculo se aplicó en arroz precocido para fermentación sólida bajo condiciones controladas de luz y oscuridad. Se evaluó la concentración de conidios , porcentaje de germinación y pureza mediante c uatro réplicas, validando los resultados con análisis estadísticos ANOVA y la prueba de Tukey. La producción de T. harzianum en arroz varió según el laboratorio. Las muestras del laboratorio A y B lograron una alta concentración, germinación y pureza estim uladas por la exposición de la luz. En cambio, la muestra del laboratorio C decayó significativamente debido a una posible falla de contaminación e inhibición a la luz . Se concluye que e l éxito en la producción masiva de T. harzianum en sustrato de arroz depende de la calidad y el tipo de cepa inicial , potenciado por el estímulo lumínico como inductor de la esporulación . Palabras clave: Cultivo microbiano, conidiogenesis, intensidad lumínica, m i croorganismo. Abstract: Optimizing large - scale production of Trichoderma in rice is essential for sustainable agriculture. The objective of this study was to Cita: Lopez Orellana, A. P., Macias Rojas, H . A., Palacios Mayorga, A. S., Jeres Caguana, G. A., & Moncayo Vera, D. J. (2026). Producción de diferentes cepas comerciales de Trichoderma harzianum en sustrato de arroz y su efecto a la exposición de luz. Multidisciplinary Collaborative Journal , 4 (3), 1 11 - 118. https://doi.org/10.70881/ mcj/v4/n3/171 Recibido: 12 / 06 /20 26 Revisado: 15 / 0 7 /20 26 Aceptado: 22 / 07 /20 26 Publicado: 27 / 07 /20 26 Copyright: © 202 6 por los autores . Este artículo es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos y condiciones de la Licencia Creative Commons, Atribución - NoComercial 4.0 Internacional. ( CC BY - NC ) . ( https://creativecommons.org/li censes/by - nc/4.0/ )
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 112 evaluate the production of different commercial strains of Trichoderma harzianum grown on rice substrate, focusing in part icular on their behavior and yield under light - exposed conditions. To this end, three commercial strains of T. harzianum were inoculated into PDA, and their morphology was confirmed. The inoculum was applied to precooked rice for solid - state fermentation u nder controlled light and dark conditions. Conidia concentration, germination percentage, and purity were evaluated using four replicates, and the results were validated using ANOVA statistical analysis and Tukey’s test. The production of T. harzianum in r ice varied by laboratory. Samples from Laboratories A and B achieved high concentrations, germination rates, and purity, stimulated by light exposure. In contrast, the sample from Laboratory C showed a significant decrease due to possible contamination and light inhibition. It is concluded that the success of mass production of T. harzianum in rice substrate depends on the quality and type of the initial strain, enhanced by light stimulation as an inducer of sporulation . Keywords: Microbial culture, conidi ogenesis, light intensity, microorganism . 1. Introducción El uso excesivo de plaguicidas en e l campo agrícola ha generado graves problemas sobre el ambiente como la degradación del suelo y la resistencia de fitopatógenos, poniendo en riesgo la seguridad alimentaria (Hossain et al., 2022) . Bajo este contexto, se busc a alternativas sostenibles como control biológico , y u so de microorganismos benéficos es una buena opción ya que permite regular las poblaciones de agentes (Ediagbonya et al., 2025) . Entre l a gran biodiversidad de agentes de bio control, el Trichoderma se destaca como el género de los hongos antagonistas más estudiados y utilizados a nivel mundial (Carpio et al., 2025) . Este logro es consecuencia de sus diversos mecanismos de acción, como lo es el micoparásitismo, competencia por espacio y nutrientes, la producción de metabolitos y la inducción de resistencia sistémica en las plantas (Rodríguez et al., 2026) . Además de su capacidad para controlar en fermedades, el Trichoderma es ampliamente reconocido por tener un efecto bioestimulante con la capacidad de prom over el crecimiento radicular vegetal (Soto - Valenzuela et al., 2026) . Dentro de este género, el Trichoderma harzianum es la especie con má s r elevancia comercial debido a su alta eficacia contra hongos fitopatógenos del suelo (Xiao et al., 2023) . Sin embargo , el éxito de este agente biocontrolador dependerá de la cepa selecciona da, ya que existen variaciones genotí picas significativas entre las líneas comerciales (Rahman et al., 2023) . Sus diferencias comprueban no solo su agresividad contra los patógenos, sino tamb ién su adaptación a condiciones ambientales (Hossain et al., 2022) . Para que un producto a base de T. harzianum pueda se r viable en el mercado, es primordial establece r métodos de multiplicación masiva eficientes y económicamente rentables (Encina et al., 2022) . La producción de hongos filamentosos en sustrato sólido permite u tiliza r subproductos agrícolas ha demostrado ser una estrategia ideal para hongos (Hamrouni et al., 2023) . Se destaca al sustrato d e arroz como un a fuente energétic a más efica z , ya que contiene una excelente fuente de carbono y sus granos permiten una poros id a d facilita ndo la aireación, p er mitiendo la obtención de rendimientos óptimos de conidios por gramo de matriz sólida (Chatterjee & Tiwari, 2025) .
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 113 No obstante , la producción de biomasa fúngica no dep ende únicamente de la composición n utricional del medio, sino también de la s condiciones físicas y ambientales (de Lima et al., 2022) . Entre estos parámetros , la luz actúa como un modulador epigenético y fisiológico crucial en los hongos (Yu et al., 2023) . En el género Trichoderma , la exposición a intensidades lumínicas desencadena una cascada de conidiogenesis , incrementando la tasa de esporulación, que es el principal indicador de rendimiento comercial (Chávez - García et al., 2008) . A pesar de que se re conoce la influencia de la luz en la morfología fúngica, la respuesta específica ante el estímulo lumínico podría variar entre diferentes cepas comerciales de una misma especie (Osorio - Concepción et al., 2013) . Algunas especies celulares requ ie r en fotoperiodos estrictos para act ivar la reproducción asexual, mientras que otras podrían inhibi rse o presentar indiferencia (Contreras - Cornejo et al., 2022) . Por tanto, c omprender cómo interactúa el factor lumínico con el potencial genético de cada cepa de Trichoderma en un sustrato es un paso clave para optimizar los procesos de producción industrial de bioinsumos agrícolas . Por tales motivos, la presente investigación tiene como objetivo evaluar la producción de diferentes cepas comerciales de Trichoderma harzianum cultivadas en sustrato de arroz, analizando de forma particular su comportamiento y rendimiento bajo condiciones de exposición a la luz. 2. Materiales y Métodos 2.1. Material biológico La s cepa s comerciales de Trichoderma harzianu m ( A, B, C ), fue ron adquiridas en laboratorios biotecnológicos de Ecuador. Estas muestras procedían de multiplicación en sustratos de arroz molido, partido e integro como se observa en la figura 1. F igura 1. Presentación original de las cepas comerciales de T . harzianum . 2.2. Proceso de activación y multiplicación de T . harzianum . La activación se dio en placas Petri contenidas con medio de cultivo agar papa dextrosa (PDA) e incubada a 2 6 °C por 12 días , ver figura 2 . Figura 2. Activación de las cepas comerciales de T . harzianum en medio PDA.
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com A l crecimiento de estas placas se les realizo un estudio morfológico con azul de lactofenol para confirmar el genero de las especies y ver que no exista contaminación alguna, como se muestra en la figura 3. Figura 3. Caracterización morfológica de los aislados fúngicos de T. harzianum . E l inóculo empleado para e l proceso de fermentación solida se preparó, a partir de los cultivo s en PDA con abundante crecimiento de T . harzianum ., se adicionó una solución de cloruro de sodio al 0,9 % (p/v) para la hidratación y el desprendimiento de los conidios. Con l a suspensión resultante se realiz ó el recuento de conidios en una cámara de Neubauer , alcanzando las concentraciones que se detallan en la tabla 1: Tabla 1. Concentración de los inóculos de cada cepa comercial de T . harzianum. MUESTRA CONCENTRACION UNIDAD DE MEDIDA A 9 x 10 8 conidios/mL B 7 x 10 8 conidios/mL C 5 x 10 8 conidios/mL 2.3. Producción de T . harzianum en sustrato sólid o . El proceso se llevó a cabo en bandejas plásticas , depositando 3 00 g de arroz precocido y esterilizado haciendo uso de una autoclave a 121°C durante 15 minutos . El arroz una vez frio, fue inoculad o con 2 5 mL de l a solución de T . harzianun y homogeneizado . Las bandejas fueron selladas con stretch film e incubadas a 27 °C durante 72 horas en oscuridad . Transcurrido este periodo se descubren las bandejas y se mantienen por 48 horas continuas con luz incandescente visible con bombillos de 8 0 watts . La base de arroz fue mezclada para homogeneizada nuevamente sus conidios y controlada la humedad ambiental a 45 % durante 72 horas . 2.4. Evaluación de la producción de T . harzianum en sustratos de arroz Pasado este t iempo se hizo un recuento de conidios en cámara de Neubauer para evaluar la densidad pobla cional (concentración de conidios) y cada procedimiento se realizó con cuatro repeticiones. También se evaluó el p orcentaje de germinación (posterior a la exposición de luz) , y el p orcentaje de p ureza al séptimo día . 2.5. Análisis estadístico La evaluación de l as variables bajo la s condiciones de exposición de luz se realizó a través de un análisis de varianza ANOVA y bajo la prueba de media según Tukey P 0.05 .
Mo]]o]v˙ C}oo} J}vo Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 115 3. Resultados y d iscusión La figura 4 muestra el resultado de la producción de T. harzianum al octavo día posterior a la inoculación del sustrato de arroz y bajo la influencia de la exposición a luz . Figura 4. Resultado de la producción de T. harzianum en sustrato de arroz. Es no torio observar que las bandejas inoculadas con el trichoderma del laboratorio A tuvo un crecimiento veloz y homogéneo en todas sus repeticiones; sin embargo, las bandejas inoculadas del laboratorio B a pesar de tener un crecimiento veloz y homogéneo tuvo u na menor intensidad en la coloración característica del T. harzianum . Por otra parte, las bandejas inoculadas con el trichoderma del laboratorio C a pesar de observarse crecimiento de hifas en el sustrato de arroz, no tuvieron una coloración relacionada con l a especie debido a que no alcanzaron su madurez reproductiva . En es te sentido, muy posiblemente existió una inhibición celular dada por la exposición a la luz como lo sostiene Contreras - Cornejo et al., (2022) . Así mismo, estos resultados concuerdan con Cortés - Hernández et al., (2023) , quienes indican que cada cepa fúngica dentro de una misma especie varía en su velocidad de crecimiento, podría sobrevivir a diferentes rango de temperaturas óptimas e incluso tendrían afinidad por dete rminados tipos de sustratos . Así mismo, a cada bandeja se realizó el conteo de conidios resultando los siguientes promedios, que se indican la tabla 2.
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com Tabla 2. C oncentración de conidios por grupo de bandejas inoculadas con T. harzianum en sustrato de arroz. UNIDA DE MEDIDA LABORATORIO P A B C C onidios/mL ( octavo d í a ) 2 x 10 8 1 x 10 9 5 x 10 4 <0,0001 Porcentaje de germinaci ó n ( posterior a la exposici ó n de luz, quinto d í a ) 99 94 65 <0,05 Porcentaje de Pureza ( octavo d í a ) 98 92 38 <0,05 Datos correspondientes a cuatro repeticiones por cada muestra de laboratorio . Estos resultados demuestran que l a producción masiva de l hongo T. harzianum en sustrato s ólid o como el arroz se ve fuertemente influenciad o por las condiciones de asepsia durante su procesamiento, así como también de la calidad y nivel de virulencia del inóculo inicial y l a s condiciones ambientales ( temperatura, humedad, luminosidad, etc. ) . Se enco ntraron d iferencias estadísticas altamente significativas P < 0,0001 para la variable concentración de conidios y P < 0,05 para el porcentaje de germinación y grado de pureza , indicando que , a pesar de utilizar el mismo sustrato (arroz) base para todos los casos , posiblemente existieron fallas críticas de contaminación durante el inóculo en el grupo de bandejas de la Muestra C. La alta concentración de conidios observada en la Muestra A (2 x 10 8 conidios/mL) y la Muestra B (1 x 10 9 conidios/mL) concuerda con lo descrito por Chatterjee & Tiwari, (2025) , quienes señalan que el grano de arroz es un soporte de car bono ideal que promueve una alta densidad de esporulación en cepas de Trichoderma . Estos a ltos porcentajes de germinación a seguran que las esporas producidas tengan la capacidad metabólic a necesari a para colonizar la rizósfera una vez aplicadas . La notable conidogénesis alcanzada con las muestras del laboratorio A y B a través del estímulo lumínico ap licado durante 48 horas (iniciado a las 72 horas post - inoculación) actuó como un potente inductor de la diferenciación celular del micelio hacia estructuras re productivas . De acuerdo con Chávez - García et al., (2008) , la exposición a intensidades lumínicas desencadena una cascada de conidiogenesis, incrementando la tasa de esporulación . Esto demuestra que la luz continua es un catalizador óptimo para la esporulación sobre el sustrato de arroz . 4 . Conclusiones El proces o de producción sólida de T. harzianum en s ustrato arroz, resultó ser un método apropiado para incrementar la producción de conidios bajo el efecto de la exposición de luz justo al momento de la conidiogenesis . Estadísticamente se presentaron diferencias significativas entre las muestras de los laboratorios siendo las muestras A y B las que alcanzaron una mayor producción de conidios, p orcentaje de germinación y nivel de pureza, potenciado por el estímulo lumínico como inductor de la esporulación, lo que garantiza la capacidad del hongo para colonizar eficazmente el suelo en aplicaciones de bioproductos agrícola s. A pesar de esto la mues tra de T. harzianum del laboratorio C fue la que presente los peores resultados, posiblemente la cepa sufrió una inhibición por la exposición a la luz sumado al grado de contaminación de este sustrato.
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 117 Para tener éxito en la producción masiva de T. harzian um en sustrato de arroz hay que considerar la calidad y el tipo de cepa inicial, así como el control aséptico durante el procesamiento , ya que de esto dependerá l a calidad de los bioproductos. Contribución de los autores: Conceptualización, APL - O.; metodo logía, APL - O.; software, HAM - R.; validación, ASP - M.; análisis formal, GAJ - C.; investigación, APL - O.; recursos, APL - O.; redacción del borrador original, DJM - V.; redacción, revisión y edición, HAM - R. y ASP - M.; visualización, GAJ - C.; supervisión, DJM - V. Todos los autores han leído y aceptado la versión publicada del manuscrito. Financiamiento: Esta investigación no ha recibido financiación externa Declaración de disponibilidad de datos: Los datos están disponibles previa solic itud a los autores de correspondencia: alopezo3@unemi.edu.ec Conflicto de interés: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses Referencias Bibliográficas Carpio, M., Vera, J., Yugsan, F., Gavin, C., & Barzallo, D. (2025). Biofertilizer enriched with Paenibacillus polymyxa and Trichoderma sp. for radish cultivation. Revista Caatinga, 38, e13759 e13759. http://dx.doi.org/10.1590/1983 - 21252025v3813759rc Chatte rjee, R., & Tiwari, A. K. (2025). Rice Polishing as a Substrate for Fungal Biomass and Protein Production by Trichoderma Harzianum and Candida utilis. Fungal Waste Biomass Management for Energy, Environment and Value - Added Products, 241 261. https://doi.or g/10.1007/978 - 3 - 031 - 82599 - 6_10 Chávez - García, M., Quevedo - Hidalgo, B., Martínez - Salgado, M. M., Mercado - Reyes, M., Rodríguez - Bocanegra, M. X., & Montaña - Lara, J. S. (2008). Efecto del sustrato y la exposición a la luz en la producción de una cepa de Tricho derma sp. Universitas Scientiarum, 13(3), 245 251. https://revistas.javeriana.edu.co/index.php/scientarium/article/view/1434/ Contreras - Cornejo, H. A., Orozco - Granados, O., Ramírez - Ordorica, A., García - Juárez, P., López - Bucio, J., & Macías - Rodríguez, L. (2 022). Light and mycelial injury influences the volatile and non - volatile metabolites and the biocontrol properties of Trichoderma atroviride. Rhizosphere, 22, 100511. https://doi.org/10.1016/j.rhisph.2022.100511 Cortés - Hernández, F. del C., Alvarado - Castil lo, G., & Sánchez - Viveros, G. (2023). Trichoderma spp., una alternativa para la agricultura sostenible: una revisión. Revista Colombiana de Biotecnología, 25(2), 73 87. https://doi.org/10.15446/rev.colomb.biote.v25n2.111384 de Lima, E. A., Mandelli, F., Ko lling, D., Souza, J. M., de Oliveira Filho, C. A., da Silva, M. R., de Mesquita Sampaio, I. L., Junqueira, T. L., Chagas, M. F., & Teodoro, J. C. (2022). Development of an economically competitive Trichoderma - based platform for enzyme production: bioproces s optimization, pilot plant scale - up, techno - economic analysis and life cycle assessment. Bioresource Technology, 364, 128019. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2022.128019
Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 118 Ediagbonya, T. F., Areo, I. O., Mupenzi, C., Mind’je, R., Kamuhanda, J. K., & Kaba no, S. (2025). Reduced pesticide dependency through crop management. Discover Applied Sciences, 7(7), 776. https://doi.org/10.1007/s42452 - 025 - 07248 - y Encina, A. B. A., Encina, M. L. A., Morinigo, K. B., Montes, N. J. Z., Rebruk, R., & Paniagua, N. G. (2022 ). Producción artesanal de Trichoderma spp. para posible uso en el control biológico sostenible en huertas. Revista Sobre Estudios e Investigaciones Del Saber Académico, 17, e2023006 e2023006. https://doi.org/10.70833/rseisa17item255 Hamrouni, R., Regus, F ., Claeys - Bruno, M., Farnet Da Silva, A. - M., Orsière, T., Laffont - Schwob, I., Boudenne, J. - L., & Dupuy, N. (2023). Statistical experimental design as a new approach to optimize a solid - state fermentation substrate for the production of spores and bioactive compounds from Trichoderma asperellum. Journal of Fungi, 9(11), 1123. https://doi.org/10.3390/jof9111123 Hossain, M. E., Shahrukh, S., & Hossain, S. A. (2022). Chemical fertilizers and pesticides: impacts on soil degradation, groundwater, and human health in Bangladesh. In Environmental degradation: challenges and strategies for mitigation (pp. 63 92). Springer. https://doi.org/10.1007/978 - 3 - 030 - 95542 - 7_4 Osorio - Concepción, M., Casas - Flores, S., & Cortés - Penagos, C. (2013). Efecto de la limitación de fosfa to sobre la conidiación de Trichoderma atroviride y mutantes ciegas a la luz. Scientia Fungorum, 37, 41 50. https://doi.org/10.33885/sf.2013.3.1111 Rahman, M., Borah, S. M., Borah, P. K., Bora, P., Sarmah, B. K., Lal, M. K., Tiwari, R. K., & Kumar, R. (202 3). Deciphering the antimicrobial activity of multifaceted rhizospheric biocontrol agents of solanaceous crops viz., Trichoderma harzianum MC2, and Trichoderma harzianum NBG. Frontiers in Plant Science, 14, 1141506. https://doi.org/10.3389/fpls.2023.114150 6 Rodríguez, J. H. V., Saltos, J. R. L., Ullauri, W. J. A., & Velasquez, A. A. I. (2026). Efecto antagónico in vitro de Trichoderma asperellum frente a Moniliophthora perniciosa. Cultivos Tropicales, 47(1), cu - id. https://ediciones.inca.edu.cu/index.php/ed iciones/article/view/1901 Soto - Valenzuela, J. O., Andrade - Yucailla, V. C., Solís - Lucas, L. A., Vera - Rodríguez, J. H., Muyudumbay, A., & Perero - Perero, A. D. (2026). Rhizospheric plant growth - promoting bacteria (PGPR) in corn plants. Revista de La Facultad de Agronomía de La Universidad Del Zulia, 43(1), 1 6. https://doi.org/10.47280/RevFacAgron(LUZ).v43.n1.IX Xiao, Z., Zhao, Q., Li, W., Gao, L., & Liu, G. (2023). Strain improvement of Trichoderma harzianum for enhanced biocontrol capacity: Strategies and pr ospects. Frontiers in Microbiology, 14, 1146210. https://www.frontiersin.org/journals/microbiology/articles/10.3389/fmicb.2023.11 46210/full#cite Yu, W., Pei, R., Zhang, Y., Tu, Y., & He, B. (2023). Light regulation of secondary metabolism in fungi. Journal of Biological Engineering, 17(1), 57. https://doi.org/10.1186/s13036 - 023 - 00374 - 4