Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol . 0 4 | Núm . 0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com ISSN: 3073 - 1356 171 Artic ulo Evaluación integrada de cepas de Bacillus spp. para la supresión de Ralstonia solanacearum raza 2 y la promoción del crecimiento vegetal Integrated Evaluation of Bacillus spp. Strains for the Suppression of Ralstonia solanacearum Race 2 and Plant Growth Promotion Kenyi Janina Suárez Romero 1 * , Héctor Damian Toscano Zamora 2 , V i ctor Emilio Zurita Chavarría 3 , Pedro Francisco Piza Zambrano 4 , Vicente David Chavarría Loor 5 1 Agronovalabx, Los Ríos, Quevedo , Ecuador 091307 ; https://orcid.org/0000 - 0003 - 4181 - 8442 , Kenyi.suarez2017@uteq.edu.ec 2 Agronovalabx, Los Ríos, Quevedo , Ecuador 091307 ; https://orcid.org/0000 - 0001 - 7888 - 5679 , hector.toscano2017@uteq.edu.ec 3 Agronovalabx, Los Ríos, Quevedo , Ecuador 091307 ; https://orcid.org/0009 - 0004 - 1704 - 4832,vezuritac@outlook.com 4 ServiAgropette r , Los Ríos, Quevedo , Ecuador 0 84528 ; https://orcid.org/0009 - 0004 - 6035 - 078X , pedropiza_@hotmail.com 5 Agronovalabx, Los Ríos, Quevedo , Ecuador 091307 ; https://orcid.org/0009 - 0003 - 9734 - 532X , davidchavarrial@hotmail.com * Co rrespondenc ia : k enyi.suarez2017@uteq.edu.ec https://doi.org/10.70881/mcj/v4/n3/175 Resumen : Ralstonia solanacearum raza 2 es un patógeno vascular transmitido por suelo que limita la producción de cultivos susceptibles y cuyo manejo requiere estrategias biológicas eficaces. Este estudio evaluó el potencial de cepas de Bacillus sp. para suprimir el patógeno y promover e l crecimiento de vitroplantas de banano. La actividad antagonista se determinó mediante cultivo dual in vitro. Para el ensayo en planta, se emplearon vitroplantas de banano con cuatro semanas de aclimatación, establecidas en macetas con 750 g de suelo este rilizado e inoculado con R. solanacearum raza 2. Veinticuatro horas después, se aplicaron 0,5 mL de suspensiones de Bacillus sp. ajustadas a aproximadamente 1 × 10⁸ UFC mL ¹ . Se evaluaron la inhibici ó n in vitro, la poblaci ó n residual del pat ó geno en suelo, la longitud radicular, la biomasa seca y la incidencia de la enfermedad. Los datos se analizaron mediante ANOVA o Kruskal Wallis, seg ú n el cumplimiento de los supuestos, y se integraron mediante an á lisis de componentes principales. La cepa C2 mostr ó la mayor inhibici ó n in vitro (57,4 ± 11,1 %), redujo la poblaci ó n residual de R. solanacearum a 23,1 UFC g ¹ d e suelo, frente a 186,3 UFC g ¹ e n el testigo, y disminuy ó la incidencia de la enfermedad a 13,9 %, en comparaci ó n con 56,8 % en el testigo. Adem á s, C2 promovi ó el mayor desarrollo radicular (30,4 cm) y la mayor biomasa seca (55,2 g). El an á lisis multivariado explic ó el 84,4 % de la variaci ó n total y separ ó claramente a C2 del testigo. En conclusi ó n, C2 present ó el perfil m á s consistente de supresi ó n de R. solanacearum raza 2 y promoción del crecimiento vegetal, por lo que constituye una cepa candidata para futuras evaluaciones de biocontrol en condiciones de invernadero y campo. Palabras clave : Bacillus sp.; biocontrol; Ralstonia solanacearum raza 2; marchitez bacteriana; promoción del crecimiento vegetal; banano. Cita: Suárez Romero, K. J., Toscano Zamora, H. D., Zurita Chavarría, V. E., Piza Zambrano, P. F., & Chav arría Loor, V. D. (2026). Evaluación integrada de cepas de Bacillus spp. para la supresión de Ralstonia solanacearum raza 2 y la promoción del crecimiento vegetal. Multidisciplinary Collaborative Journal , 4 (3), 171 - 183. https://doi.org/10.70881/mcj/ v4/n3/175 Recibido : 19 / 06 /20 26 Revisado: 02 / 08 /20 26 Aceptado: 05 / 08 /20 26 Publicado: 1 2 / 08 /20 26 Copyright: © 202 6 por los autores . Este artículo es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos y condiciones de la Licencia Creative Commons, Atribución - NoComercial 4.0 Internacional. ( CC BY - NC ) . ( https://creativecommons.org/lice nses/by - nc/4.0/ )
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 172 Abstract : Ralstonia solanacearum race 2 is a soil - borne vascular pathogen that constrains the production of susceptible crops and requires effective biological management strategies. This study evaluated the potential of Bacillus sp. strains to suppress the pathogen and promote the growt h of banana vitroplants. Antagonistic activity was determined through dual culture assays in vitro. For the plant assay, banana vitroplants acclimatized for four weeks were individually established in pots containing 750 g of sterilized soil inoculated wit h R. solanacearum race 2. After 24 h, 0.5 mL of Bacillus sp. suspensions adjusted to approximately 1 × 10+` CFU mL ¹ wer e applied. In vitro inhibition, residual pathogen population in soil, root length, dry biomass, and disease incidence were evaluated. Dat a were analyzed using ANOVA or Kruskal Wallis tests, according to assumption compliance, and integrated through principal component analysis. Strain C2 showed the highest in vitro inhibition (57.4 ± 11.1%), reduced the residual population of R. solanacearu m to 23.1 CFU g ¹ of soil, compared with 186.3 CFU g ¹ i n the control, and decreased disease incidence to 13.9%, compared with 56.8% in the control. In addition, C2 promoted the greatest root development (30.4 cm) and dry biomass accumulation (55.2 g). The multivariate analysis explained 84.4% of the total variation and clearly separated C2 from the control. In conclusion, C2 showed the most consistent profile for suppressing R. solanacearum race 2 and promoting plant growth, making it a promising candidate for further biocontrol evaluations under greenhouse and field conditions. Keywords: Bacillus sp.; biocontrol; Ralstonia solanacearum race 2; bacterial wilt; plant growth promotion; banana. 1. Introduc ción El marchitamiento bacteriano causado por Ralstonia solanacearum constituye una de las enfermedades vasculares más destructivas de los sistemas agrícolas tropicales y subtropicales ( Ghorai et al., 2022) . Este patógeno habita en el suelo, ingresa principalme nte a través de heridas o aberturas naturales de la raíz y coloniza rápidamente el xilema, donde forma biopelículas y produce exopolisacáridos, enzimas degradadoras de la pared celular y efectores del sistema de secreción tipo III (Ababa, 2024). Como conse cuencia, se altera el transporte de agua y nutrientes, se desarrollan síntomas de marchitez y, en infecciones severas, ocurre la muerte de las plantas ( Chachar et al., 2022) . La amplia gama de hospedantes, su variabilidad genética y su capacidad de persist ir en suelo, agua y material vegetal infectado dificultan su manejo sostenible (Ireri, 2020). La raza 2 de R. solanacearum representa una amenaza fitosanitaria relevante por su capacidad de establecerse en sistemas productivos susceptibles y generar focos persistentes de inóculo ( Dickstein et al., 2024) . Las medidas convencionales, como la eliminación de plantas enfermas, la desinfección, el uso de material de siembra sano y las prácticas culturales, son fundamentales para limitar la dispersión del patógeno ; sin embargo, su eficacia puede ser insuficiente una vez que la bacteria se ha establecido en el suelo o en el sistema vascular de las plantas (Karim et al., 2018). Por ello, el desarrollo de herramientas biológicas capaces de reducir simultáneamente la p oblación del patógeno en el suelo, limitar la incidencia de la enfermedad y mejorar la respuesta fisiológica de la planta constituye una prioridad para el manejo integrado de esta enfermedad (Vailleau et al., 2023). Las bacterias del género Bacillus han re cibido creciente atención como agentes de biocontrol debido a su capacidad de formar endosporas, sobrevivir en condiciones
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 173 ambientales adversas y colonizar la rizosfera ( Ali et al., 2024) . Diversas cepas de Bacillus spp. pueden limitar el crecimiento de fi topatógenos mediante antibiosis, competencia por nutrientes y nichos ecológicos, producción de compuestos volátiles y lipopeptídicos, formación de biopelículas benéficas e inducción de resistencia sistémica en la planta (Karačić et al., 2024). Adicionalmen te, estas bacterias pueden favorecer el crecimiento vegetal mediante la producción de fitohormonas, la solubilización de nutrientes y la mejora de la arquitectura radicular ( Sagar et al., 2022) . Esta doble funcionalidad convierte a Bacillus spp. en una alt ernativa particularmente atractiva para el manejo de patógenos vasculares transmitidos por suelo, como R. solanacearum (Khan et al., 2022). No obstante, la selección de una cepa con potencial de uso agrícola no debe basarse exclusivamente en su actividad a ntagonista in vitro ( Cáceres et al., 2024) . Un agente de biocontrol efectivo debe mantener su capacidad supresora en suelo, reducir la incidencia de la enfermedad en planta y, de forma ideal, promover variables asociadas con el vigor vegetal, como el desarrollo radicular y la acumulación de biomasa (Ali et al., 2025; Zhang et al., 2023). Por tanto, la integración de indicadores microbiológicos, fitopatológicos y agronómicos permite identificar cepas con una respuesta funcional más robusta y con mayor p osibilidad de éxito bajo condiciones de producción (Hernández et al., 2026). En este contexto, el objetivo del presente estudio fue evaluar el potencial de cepas de Bacillus sp. para suprimir Ralstonia solanacearum raza 2 y promover el crecimiento vegetal. Para ello, se determinaron la inhibición in vitro del patógeno, la población bacteriana residual en suelo, la incidencia de la enfermedad, el desarrollo radicular y la biomasa seca de las plantas. Además, se utilizó un análisis multivariado para integrar las respuestas evaluadas e identificar las cepas con el perfil más prometedor para su aplicación como agentes de biocontrol. 2. Metodología 2.1. Análisis estadístico Los datos de inhibición in vitro de Ralstonia solanacearum raza 2, carga bacteriana resi dual en suelo, desarrollo radicular, biomasa seca e incidencia de la enfermedad se analizaron mediante un diseño de un solo factor, en el que el tratamiento correspondió a las cepas de Bacillus sp. y al testigo no inoculado. El análisis inferencial se realizó con los tratamientos que contaron con al menos tres repeticiones independientes (C1, C2, C3 y testigo); los tratamientos con una sola observación se presentaron únicamente de forma descript iva y no se incluyeron en las comparaciones estadísticas. La variable de carga bacteriana en suelo fue transformada mediante log10(UFC g ¹ + 1) para estabilizar la varianza. Para cada variable, la normalidad de los residuos y la homogeneidad de varianzas se evaluaron mediante las pruebas de Shapiro Wilk y Levene, respectivamente. Cuando se cumplieron los supuestos param é tricos, las medias se compararon mediante un an á lisis de varianza de una v í a (ANOVA), seguido de la prueba de Tukey; en caso contrario, se aplic ó la prueba no param é trica de Kruskal Wallis, seguida de comparaciones múltiples de Dunn con ajuste de Benjamini Hochberg. Adicionalmente, se realizó un análisis de componentes principales (ACP) a partir de las variables estandarizadas para explorar el patrón multivariado de respuesta de las cepas
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 174 de Bacillus sp. frente al patógeno. Los resultados se expresaron como medias e intervalos de confianza del 95 %, y se consideraron significativos valores de p < 0,05. Todos los análisis se realizaron en R v ersión 4.6.1. 2.2. Inhibición in vitro de Ralstonia solanacearum raza 2 La actividad antagonista de las cepas de Bacillus sp. contra R. solanacearum raza 2 se evaluó mediante cultivo dual. Se inoculó una suspensión estandarizada del patógeno sobre la super ficie de placas con medio agar nutritivo y, posteriormente, se aplicó cada cepa de Bacillus sp. en [puntos/discos/estrías] equidistantes. Las placas se incubaron a 30 °C durante 48 h. La inhibición se determinó a partir del crecimiento del patógeno en pres encia de cada cepa y se expresó como porcentaje de inhibición respecto al testigo, mediante la ecuación: Inhibici o n ( %) donde r epresenta el crecimiento de R. solanacearum en el testigo y el crecimiento registrado en presencia de la cepa antagonista. 2.3. Supresión de Ralstonia solanacearum raza 2 en suelo Para evaluar la reducción de la población de R. solanacearum raza 2 en suelo, se utilizaron macetas con 750 g de suelo previamente esterilizado. El suelo fue inoculado con una suspe nsión estandarizada del patógeno y, después de 24 horas, se aplicaron las suspensiones de las cepas de Bacillus sp. a una concentración aproximada de 1 × 10+` UFC mL ¹ , usando un volumen de 0,5 mL por unidad experimental. Al finalizar el per í odo de evaluaci ó n, se tomaron 10 g de suelo por unidad experimental, los cuales se homogenizaron en 90 mL de agua peptonada est é ril al 0,1 %. Se realizaron diluciones seriadas y se sembraron en un medio semiselectivo para Ralstonia , SMSA y TZC. Las placas se incubaron a 30 °C durante 72 h, y las colonias presuntivas se expresaron como UFC g ¹ de suelo. 2.4. Material vegetal y establecimiento del ensayo en planta Se utilizaron vitroplantas de banano ( Musa spp.) con cuatro semanas de aclimatación, seleccionadas por presentar tamaño uniforme y ausencia de síntomas visibles de daño o enfermedad. Las plantas se trasplantaron individualmente en macetas que contenían 750 g de suelo esterilizado e inoculado con Ralstonia solanacearum raza 2, de acuerdo con el procedimi ento descrito. Veinticuatro horas después de la inoculación del suelo, se aplicaron las suspensiones de las cepas de Bacillus sp. en la zona radicular de cada planta. Las macetas se mantuvieron bajo condiciones controladas de 30°C, humedad relativa 80% y f otoperiodo 12/12, con riego según las necesidades hídricas del cultivo, durante todo el período experimental. 2.5. Desarrollo radicular Al finalizar el ensayo en planta, las raíces se extrajeron cuidadosamente del suelo y se lavaron con agua corriente para retirar el sustrato adherido. El desarrollo radicular se evaluó mediante la medición de la longitud de la raíz principal, desde el cuello de la
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 175 planta hasta el ápice radical, utilizando una regla milimetrada o calibrador. Los resultados se expresaron en c entímetros por planta. 2.6. Biomasa seca Después de la evaluación del sistema radicular, las plantas se separaron en sus componentes [aéreo/radicular o planta completa], según el objetivo del ensayo. Las muestras se colocaron en bolsas de papel y se secaro n en una estufa de ventilación forzada a 65 °C hasta alcanzar peso constante. Posteriormente, la biomasa seca se determinó con una balanza analítica y se expresó en gramos por planta. 2.7. Incidencia de la enfermedad La incidencia de la enfermedad se deter minó mediante evaluaciones periódicas de síntomas característicos de moko, incluyendo marchitez, clorosis foliar, flacidez, necrosis vascular y muerte de plantas. Al final del experimento, se calculó el porcentaje de incidencia mediante la siguiente ecuaci ón: Incidencia (%) N u m ero de plantas con s ı ntom as N u m ero total de plantas evaluadas La s plantas tratadas con cepas de Bacillus sp. se compararon con el testigo inoculado únicamente con R. solanacearum raza 2. 2.8. Integración multivariada de las variables Finalmente, los valores de inhibición in vitro , población residual de R. solanacearum en suelo, desarrollo radicular, biomasa seca e incidencia de la enfermedad se integraron mediante un análisis de componentes principales. An tes del análisis, las variables se estandarizaron para evitar que las diferencias de escala influyeran en la ordenación. El ACP permitió identificar la separación entre cepas de Bacillus sp., el testigo y los patrones conjuntos de supresión del patógeno y promoción del crecimiento vegetal. 3. Resultados y Discusión 3.1. Inhibición in vitro La inhibición in vitro de Ralstonia solanacearum raza 2 difirió entre los tratamientos (p < 0,001). El tratamiento C2 correspondiente a Bacillus sp. cepa 2 presentó la mayor actividad antagónica, con una inhibición media de 57,4 ± 11,1 %, superando a C1 (26,9 ± 8,3 %), C3 (26,6 ± 5,4 %) y al testigo (1, 4 ± 2,1 %). Los tratamientos C1 y C3 mostraron niveles de inhibición intermedios y similares entre sí, aunque ambos fueron superiores al testigo (Figura 1) . En conjunto, estos resultados evidencian que C2 posee el mayor potencial para inhibir el crecimient o de R. solanacearum raza 2 bajo condiciones in vitro . La inhibición in vitro ocurre cuando una bacteria antagonista limita el crecimiento de otra bacteria en un medio de cultivo compartido. Este efecto puede producirse por la liberación de sustancias anti microbianas, por la reducción de nutrientes esenciales disponibles para el patógeno, por cambios locales en el pH o por interferencias en procesos celulares necesarios para la multiplicación bacteriana (De Gioia et al., 2022). En el caso de Bacillus sp., s u actividad antagonista se asocia con frecuencia a la producción de metabolitos secundarios y moléculas que afectan la viabilidad, la
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 176 membrana celular o la formación de biopelículas de bacterias fitopatógenas (Barbé et al., 2022). Figura 1. Inhibición in vitro de Ralstonia solanacearum raza 2 por los tratamientos evaluados. Los puntos representan las repeticiones individuales; los violines muestran la distribución de los datos; las cajas corresponden al rango intercuartílico y la lí nea interna indica la mediana. El rombo naranja representa la media y las barras verticales su intervalo de confianza del 95 %. 3.2. Inhibición de Ralstonia en suelo Las cepas de Bacillus sp. evaluadas ejercieron un efecto supresor significativo sobre la p oblación de Ralstonia solanacearum raza 2 en suelo (p < 0,001). Entre ellas, la cepa C2 mostró la mayor eficacia, al reducir la carga bacteriana residual hasta 23,1 UFC/g, lo que representa una disminución del 87,6 % con respecto al testigo (186,3 UFC/g). Las cepas C1 y C3 también redujeron la población del patógeno, registrando 45,2 y 56,3 UFC/g, respectivamente; sin embargo, su capacidad supresora fue inferior a la observada para C2. Estos hallazgos posicionan a C2 como la cepa de Bacillus sp. con mayor p otencial de biocontrol frente a R. solanacearum raza 2 en condiciones de suelo, probablemente mediante mecanismos combinados de antibiosis, competencia por recursos y/o inducción de respuestas defensivas en la planta (Figura 2) . En el suelo, la población d e un patógeno puede disminuir cuando se enfrenta a microorganismos capaces de establecerse y utilizar los mismos recursos y espacios ecológicos. Las cepas de Bacillus sp. pueden colonizar la zona cercana a las raíces y modificar las interacciones microbianas del suelo, limitando las condiciones necesarias para que Ralstonia solanacearum sobreviva y se multiplique (Morris y Blackwood, 2024).
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 177 Además, algunas cepas de est e género pueden liberar sustancias con actividad antibacteriana o modificar el entorno inmediato de la raíz, lo que reduce la viabilidad del patógeno. No obstante, estos procesos describen mecanismos biológicamente posibles; identificar cuál opera en una c epa determinada requiere evaluaciones específicas adicionales (Alqahtani, 2025). Figura 2. Efecto de cepas de Bacillus sp. sobre la población de Ralstonia solanacearum raza 2 en suelo. La carga bacteriana se expresa como log10(UFC/g + 1). Los puntos repr esentan las repeticiones individuales; los violines indican la distribución de los datos; las cajas muestran el rango intercuartílico y la línea central representa la mediana. El rombo naranja corresponde a la media y las barras verticales a su intervalo d e confianza del 95 %. 3.3. Análisis de componentes principales El análisis de componentes principales (ACP) evidenció una diferenciación marcada entre las cepas de Bacillus sp. evaluadas y el testigo. Las dos primeras componentes explicaron el 84,4 % de la variación total (CP1 = 70,3 %; CP2 = 14,1 %), confirmando una representación robusta de la respuesta multivariada. La cepa C2 se separó claramente hacia valores positivos de la CP1, mientras que el testigo se concentró en el extremo negativo, demostrando que C2 generó un perfil integral de respuesta sustancialmente diferente y asociado con una mayor supresión de Ralstonia solanacearum raza 2 (Figura 3) . En contraste, C1 y C3 presentaron una superposición parcial, lo que sugiere respuestas funcionales más p róximas entre ambas cepas. En conjunto, el ACP respalda a C2 como la cepa de Bacillus sp. con el desempeño multivariado más diferenciado y mayor potencial para el biocontrol de R. solanacearum raza 2.
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 178 Figura 3. Análisis de componentes principales (ACP) de la respuesta multivariada inducida por cepas de Bacillus sp. frente a Ralstonia solanacearum raza 2. La CP1 y la CP2 explicaron el 70,3 % y el 14,1 % de la variación total, respectivamente. Cada punto representa una repetición individual y las elipses s ombreadas representan la dispersión multivariada de cada tratamiento (intervalo de confianza del 95 %). 3.4. Desarrollo radicular El desarrollo radicular fue fuertemente modulado por las cepas de Bacillus sp. (p < 0,001). La cepa C2 promovió el mayor creci miento de raíces, alcanzando una longitud media de 30,4 cm, valor 78,8 % superior al registrado en el testigo (17,0 cm) y aproximadamente 45 % mayor que el observado con C1 (20,9 cm) y C3 (20,7 cm). Esta respuesta confirma que C2 no solo ejerce una elevada actividad antagonista frente a Ralstonia solanacearum raza 2, sino que también presenta una capacidad superior para estimular el crecimiento radicular de la planta (Figura 4) . Por tanto, C2 se posiciona como la cepa de Bacillus sp. más promisoria, al comb inar un efecto de biocontrol con una marcada promoción del desarrollo vegetal. Figura 4. Efecto de cepas de Bacillus sp. sobre el desarrollo radicular de las plantas. Los puntos representan las repeticiones individuales; los violines muestran la distribu ción de los datos; las cajas corresponden al rango intercuartílico y la línea central representa la mediana. El rombo naranja indica la media y las barras verticales su
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 179 intervalo de confianza del 95 %. 3.5. Biomasa seca La biomasa seca fue significativamen te influenciada por las cepas de Bacillus sp. (p < 0,001). La cepa C2 produjo la mayor acumulación de biomasa, con una media de 55,2 g, superando en 63,8 % al testigo (33,7 g), en 35,3 % a C1 (40,8 g) y en 62,4 % a C3 (34,0 g). Este resultado confirma que C2 posee una capacidad sobresaliente para promover el crecimiento vegetal, expresada no solo en un mayor desarrollo radicular, sino también en una mayor producción de materia seca. En conjunto, la respuesta observada posiciona a C2 como la cepa de Bacillus sp. más eficiente para integrar la supre sión de Ralstonia solanacearum raza 2 con la promoción del vigor y la productividad vegetal (Figura 5) . Algunas cepas de Bacillus sp. actúan como bacterias promotoras del crecimiento vegetal y favorecen procesos que mejoran la adquisición y el aprovechamie nto de recursos por la planta. Biológicamente, esto puede ocurrir mediante la estimulación del desarrollo radicular, el aumento de la disponibilidad de nutrientes en la rizosfera y la disminución del estrés ocasionado por la presencia del patógeno (Vasques et al., 2024). Como resultado, la planta puede destinar una mayor proporción de sus recursos a la formación de tejidos y a la acumulación de materia seca. Sin embargo, estos mecanismos son posibilidades biológicas; su confirmación requeriría evaluar varia bles específicas, como la producción de fitohormonas, la solubilización de nutrientes o la colonización radicular por las cepas (Tsotetsi et al., 2022). Figura 5. Efecto de cepas de Bacillus sp. sobre la biomasa seca de las plantas. Los puntos represent an las repeticiones individuales; los violines muestran la distribución de los datos; las cajas indican el rango intercuartílico y la línea central representa la mediana. El rombo naranja corresponde a la media y las barras verticales a su intervalo de con fianza del 95 %. 3.6. Incidencia de la enfermedad La incidencia de la enfermedad fue significativamente afectada por las cepas de Bacillus
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 180 sp. (p < 0,001). La cepa C2 proporcionó el mayor nivel de protección, reduciendo la incidencia a 13,9 %, en comparación con 56,8 % en el testigo. Esta disminución equivale a una reducción relativa del 75,5 % de la incidencia, y fue superior a la alcanzada por C1 (37,0 %) y C3 (24,9 %). Aunque C3 mostró un efecto parcial de supresión, C2 mantuvo consistentemente la menor incidencia entre los tratamientos evaluados (Figura 6) . En conjunto, estos resultados confirman que C2 es la cepa de Bacillus sp. con mayor eficacia para limitar el establecimiento de Ralstonia solanacearum raza 2 en planta, consolidando su potenc ial como agente de biocontrol y promotor de una respuesta fitosanitaria más favorable. La reducción de la incidencia puede ocurrir cuando una cepa de Bacillus sp. limita la capacidad de Ralstonia solanacearum raza 2 para establecerse, multiplicarse y avanz ar dentro de la planta. Desde el punto de vista biológico, este efecto puede estar relacionado con una menor población del patógeno en la rizosfera, una interferencia en la colonización de la raíz o una mayor capacidad de la planta para responder frente a la infección (Wang et al., 2023). Al disminuir la colonización bacteriana del sistema radical y vascular, se reduce la probabilidad de que las plantas desarrollen síntomas visibles de la enfermedad. Sin embargo, determinar si el efecto se debe a antagonism o directo, competencia microbiana o activación de defensas vegetales requiere evaluaciones complementarias específicas (Abu Bakar et al., 2025). Figura 6. Efecto de cepas de Bacillus sp. sobre la incidencia de la enfermedad causada por Ralstonia solanace arum raza 2. Los puntos representan las repeticiones individuales; los violines muestran la distribución de los datos; las cajas indican el rango intercuartílico y la línea central representa la mediana. El rombo naranja corresponde a la media y las barras verticales a su intervalo de confianza del 95 %. 4 . Conclusiones Bajo las condiciones evaluadas, la cepa C2 de Bacillus sp. mostró una respuesta multifuncional superior, al combinar la supresión de Ralstonia solanacearum raza 2 en ensayos in vitro y en suelo con una reducción consistente de la incidencia de la enfermedad en vitroplantas de banano. Estos resultados respalda n su selección como
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 4 | Núm.0 3 | Jul Sep | 202 6 | https://mcjournal.editorialdoso.com 181 candidata prioritaria para el desarrollo de estrategias de biocontrol dirigidas al manejo de la marchitez bacteriana. La asociación entre la reducción de la presión del patógeno y el incremento del desarrollo radicular y de la biomasa seca indica que C2 puede contribuir simultáneamente a la sanidad y al vigor de las plantas. La validación de su eficacia en suelos no esterilizados, bajo condiciones de invernadero y campo, junto con la caracterización taxonómica y funcional de la cepa, se rá necesaria para determinar su viabilidad como bioinsumo agrícola. Contribución de los autores: Conceptualización, KJS - R. y HDT - Z.; metodología, KJS - R., HDT - Z. y VEZ - C.; software, VEZ - C.; validación, PFP - Z.; análisis formal, KJS - R. y VEZ - C.; investigación , KJS - R., HDT - Z., VEZ - C. y PFP - Z.; recursos, HDT - Z. y PFP - Z.; curación de datos, VEZ - C.; redacción del borrador original, KJS - R.; revisión y edición del manuscrito, HDT - Z., VEZ - C. y PFP - Z.; visualización, VEZ - C.; supervisión, PFP - Z. Todos los autores han l eído y aprobado la versión final publicada del manuscrito. Financiamiento: La presente investigación no recibió financiamiento externo. Agradecimientos: Los autores expresan su agradecimiento a la Secretaría de Educación Superior, Ciencia, Tecnología e Innovación (SENESCYT) del Ecuador, por el apoyo otorgado mediante su programa de becas, y a la Unidad de Posgrado de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ), por el respaldo académico e institucional brindado durante el desarrollo de esta investigación. Conflicto de intereses: Los autores declaran que no existe ningún conflicto de intereses de carácter personal, profesional, institucional, académico o financiero que pudiera haber influido de manera inapropiada en el diseño, desarrollo, análisis, interpretación de los resultados o preparación del presente manuscrito. Asimismo, manifiestan que la investigación fue realizada con independencia y transparencia, y que no mantienen relaciones o compromisos que puedan afectar la objetividad, in tegridad o imparcialidad del trabajo presentado. Referencias bibliograficas Ababa, G. (2024). Pathogenic diversity, ecology, epidemiology, and management practices of the potato bacterial wilt ( Ralstonia solanacearum ) disease. Cogent Food & Agriculture , 1 0 (1). https://doi.org/10.1080/23311932.2024.2407953 Abu Bakar, F., Ramaiya, S. D., & Min, K. Y. (2025). Molecular insight, pathogenesis and resistance management of bacterial wilt ( Ralstonia solanacearum ) disease. Cogent Food & Agriculture , 11 (1). https://doi.org/10.1080/23311932.2025.2579885 Ali, I. I. (2025). Bacillus spp. As bioagents - applications and effective strat egies in plant bacterial disease management: A review. Agricultural Reviews , Of . https://doi.org/10.18805/ag.rf - 371 Ali, MA, Ahmed, T., Ibrahim, E., Rizwan, M., Chong, KP, & Yong, JWH (2024). Una revisión sobre los mecanismos y perspectivas de las bacterias endófitas en el biocontrol de hongos fitopatógenos y sus actividades promotoras del crecimiento vegetal. Heliyon , 10 (11), e31573. https:// doi.org/10.1016/j.heliyon.2024.e31573 Alqahtani, F. S. (2025). The utilization of microorganisms for biological control of soil - borne plant pathogens: a sustainable strategy for managing plant diseases - a
Multidisciplinary Collaborative Journal Microorganisms 12 Fu ndamental and Applied Agriculture 3 B iology 11 S oil Microbiology, Ecology and Biochemistry B acilli in Climate Resilient Agriculture and Bioprospecting P lants 11 A nnual Review of Phytopathology 61 A gronomy (Basel, Switzerland) 14 F rontiers in Plant Science 14 M icrobial Biotechnology 16