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Oct
–
Dic
| 202
6
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https://mcjournal.editorialdoso.com
Articulo
A
ntagonismo
in vitro
de
Trichoderma
spp. nativ
o
sobre
Fusarium oxysporum
In vitro antagonism of native Trichoderma spp. against Fusarium oxysporum
Jhonny Julián
Ayala
-
Alvarado
1
*
,
Lady Melania
Ruiz
-
Carriel
2
,
Gladys Alexandra
Jeres
-
Caguana
3
,
Doris
Jannela
Moncayo
-
Vera
4
y
Brayan
Enrique
Llumiluisa
-
Tapuy
5
1
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
,
Quevedo,
Ecuador,
120550
,
https://orcid.org/0009
-
0002
-
1696
-
259X
2
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
,
Quevedo, Ecuador,
120550
,
https://orcid.org/0009
-
0006
-
3739
-
4607
,
ladymelaniaruiz442@gmail.com
3
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Quevedo, Ecuador 120550,
https://orcid.org/0000
-
0001
-
5332
-
3725
,
gladys.jeres2015@uteq.edu.ec
4
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Quevedo, Ecuador, 120550,
https://orcid.org/0000
-
0002
-
5341
-
3947
d
oris.moncayo2015@uteq.edu.ec
5
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Quevedo
, Ecuador,
120550,
https://orcid.org/0000
-
0002
-
7132
-
2942
,
bra
-
201157@hotmail.com
*
Correspondencia
:
jhonny.ayala040899@gmail.com
https://doi.org/10.70881/mcj/v4/n4/184
Resumen:
La evaluación de nuevas cepas de
Trichoderma
frente a hongos
fitopatógenos permitirá desarrollar biocontroles sostenibles, con reducción del uso de
agroquímicos. Por tanto,
el objetivo de la presente investigación busca identificar
una
cepa local con capacidad biocontroladora con potencial antagónico
in vitro
frente a
Fusarium oxysporum
. En el laboratorio de la UTEQ, se aislaron y purificaron cultivos
puros de
Trichoderma
spp. (suelo de banano) y
F
.
oxysporum
(raíces de banano) en
m
edio PDA. Ambos se caracterizaron morfológicamente microscópica y
macroscópicamente. Finalmente, mediante la técnica de enfrentamiento dual a 27 °C,
se evaluó el crecimiento del micelio y la capacidad antagónica según el porcentaje de
invasión.
El estudio
evaluó la actividad antagónica de
Trichoderma
spp. frente a
F.
oxysporum
durante 192 horas.
Trichoderma
spp. demostró una mayor tasa de
crecimiento micelial, pasando de 10 mm a 75 mm, frente a
F. oxysporum
, que creció
de 10 mm a 40 mm. Esta velocidad le pe
rmitió colonizar rápidamente el medio de
cultivo y competir por espacio y nutrientes. En la prueba de cultivo dual, a las 120
horas se produjo contacto directo y detención del fitopatógeno. A las 192 horas,
Trichoderma
spp. sobrecreció e invadió la colonia
de
F. oxysporum
, reduciendo su
micelio visible a 20 mm mediante micoparasitismo e inhibición directa.
Se puede
observar que el
Trichoderma
spp. nativo tiene un efecto antagónico ALTO, logrando
invadir hasta las tres cuartas partes (3/4) de la colonia del
hongo fitopatógeno
F.
oxysporum
, con presencia de hifas densas, pudiendo ser considerado como un
potencial biocontrol
.
Palabras clave:
Biocontrol; competencia; fitopatógeno, micoparasitismo; planta
.
Abstract:
The evaluation of new
Trichoderma
strains against plant
-
pathogenic fungi
will enable the development of sustainable biocontrols, thereby reducing the use of
agrochemicals. Therefore, the objective of this research is to identify a local strain with
biocont
rol capabilities and in vitro antagonistic potential against
Fusarium oxysporum
.
At the UTEQ laboratory, pure cultures of
Trichoderma
spp. (from banana soil) and
F.
oxysporum
(from banana roots) were isolated and purified on PDA medium. Both were
character
ized morphologically, both microscopically and macroscopically. Finally,
using the dual
-
challenge technique at 27 °C, mycelial growth and antagonistic activity
Cita:
Ayala
-
Alvarado, J. J., Ruiz
-
Carriel, L. M., Jeres
-
Caguana, G.
A., Moncayo
-
Vera, D. J., &
Llumiluisa
-
Tapuy, B. E. (2026).
Antagonismo in vitro de
Trichoderma spp. nativo sobre
Fusarium oxysporum.
Multidisciplinary Collaborative
Journal
,
4
(4), 61
-
70.
https://doi.org/10.70881/mcj/v4/n
4/184
Recibido:
22
/
08
/20
26
Revisado:
07
/
10
/20
26
Aceptado:
12
/
10
/20
26
Publicado:
15
/
10
/20
26
Copyright:
© 202
6
por los
autores
.
Este artículo es un
artículo de acceso abierto
distribuido bajo los términos y
condiciones de la
Licencia
Creative Commons, Atribución
-
NoComercial 4.0
Internacional.
(
CC
BY
-
NC
)
.
(
https://creativecommons.org/lice
nses/by
-
nc/4.0/
)
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were
evaluated based on the percentage of invasion. The study assessed the
antagonistic activity
of
Trichoderma
spp. against
F. oxysporum
over a period of 192
hours. Trichoderma spp. demonstrated a higher rate of mycelial growth, increasing
from 10 mm to 75 mm, compared to
F. oxysporum
, which grew from 10 mm to 40 mm.
This growth rate allowed it to r
apidly colonize the culture medium and compete for
space and nutrients. In the dual culture assay, direct contact and suppression of the
plant pathogen occurred at 120 hours. At 192 hours,
Trichoderma
spp. outcompeted
and invaded the
F. oxysporum
colony, r
educing its visible mycelium to 20 mm through
mycoparasitism and direct inhibition. It can be observed that the native
Trichoderma
spp. has a HIGH antagonistic effect, managing to invade up to three
-
quarters (3/4) of
the colony of the plant pathogen
F. oxy
sporum
, with the presence of dense hyphae,
and can therefore be considered a potential biocontrol agent.
Keywords:
Biocontrol; competition; plant pathogen; mycoparasitism; plant
.
1. Introducción
El marchitamiento vascular
ocasionado
por
Fusarium oxysporum
representa una de las
fitopatologías
de mayor preocupación
y extendidas en los
cultivos
agrícolas a nivel
mundial
(
Jackson
et al., 2024
)
. Este hongo fitopatógeno de
l
suelo
tiene
la capacidad de
colonizar el sistema
radicular y llevar hasta la cavidad
vascular de las plantas,
provocando limitación en
el flujo de
agua
y nutrientes,
manifestándose con
clorosis,
marchitez y, en casos
extremos
, la muerte de
l
a
planta
(
Srivastava
et al.
, 2024
)
.
Este
microorganismo es muy
persisten
te debido a
sus estructuras de resistencia, como las
clamidosporas,
la cual
le permite sobrevivir en el suelo durante períodos prolongados,
e incluso bajo condiciones extremas,
lo que lo
convi
e
rt
e
en un patógeno
sumamente
difícil de erradicar mediante prácticas culturales convencionales
(
Boulahouat
et al.,
2023
)
.
Históricamente, el manejo de
F
.
oxysporum
se
f
undamenta
con el tratamiento
intensiv
o
de fungicidas químicos sintéticos
(
Michel
-
Aceves
, 2014
)
.
Lo que ha
generado
graves
consecuencias ambientales,
donde se destaca
la degradación de la micro
biota
del
suelo, la contaminación de
acuíferos
y el desarrollo de
resistenci
a
de
agentes
patógeno
s
(
Vera
et al., 2025
)
.
A consecuencia
, las exigencias internaci
onales
con
respecto a los
residuos
de
pesticidas en alimentos impulsa
n
la búsqueda de
nuevas
alternativas
sostenibles y
amigables
con el ambiente
(
Jeres
-
Caguana
et al., 2025
)
.
Bajo este
contexto, el control biológico
es una alternativa
estratégica
y ecológicamente
viable
para
el
control
integrado de
agente fitopatógenos
(Vera Rodríguez
et al., 2026
a
)
.
Entre l
a
divers
idad de
microorganismos antagonistas
más
estudiados,
se encuentra el
género
Trichoderma
. destaca
do
por su elevada plasticidad ecológica,
velocidad de
crecimiento y ef
ectividad
en el control de
agentes fito
patógenos
(
Yépez Anchundia
et
al., 2026
)
.
El
Trichoderma
puede actuar
mediante
diversos
mecanismos de acción, entre
el
los
c
ompetencia por espacio
,
nu
trientes, micoparasitismo
,
secreción de enzimas
hidrolíticas como glucanasas y quitinasas y antibiosis
por
la síntesis de metabolitos
secundarios
(Vera Rodríguez
et al., 2026
b
)
.
A pesar
de la evidencia del potencial de
las cepas comerciales de
Trichoderma
,
la
efectividad en campo suele
s
e
r
comprometida
debido a su origen, el simple hecho de
pertenecer
a
condiciones edafoclimáticas distintas a las de su lugar de origen
, muchas
de las especies no logran adaptarse
(
Soto
-
Val
enzuela
et al., 2026
)
. Por esta razón, el
aislamiento y
la
evaluación de cepas nativas de
Trichoderma
spp. representa una
ventaja decisiva
(
Sánchez Sandoval
et al., 2026
)
.
Esta relevancia en vista que las
especies
autócton
a
s están adaptad
a
s a las condiciones locales
con respecto a
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t
emperatura, pH, humedad y competencia microbiana, lo que
le da ventaja
sustancial
por
su capacidad de establecimiento, supervivencia y efectividad contra patógenos
locales
(
Carpio
et al., 2025
)
.
Previo a l
a aplic
ación de estos
bio
controladores a condiciones de campo, resulta
fundamental realizar evaluaciones
in vitro
que permitan seleccionar los aislamientos
más prometedores. Los ensayos
in vitro
constituyen una herramienta metodológica
rápida y
de carácter
cuanti
tativa para determinar
su capacidad de
inhibición del
crecimiento micelial y acción antagónic
a
sobre
F
.
oxysporum
.
En consecuencia,
el
objetivo de
la presente investigación
busca identificar
una
cepa local con capacidad
biocontroladora
con el
potencial antagónico
in vitro
frente a
Fusarium oxysporum
.
Estas
bases científicas
podrían ayudar a
solid
ificar
el desarrollo
de
futuro
s
bioinsumos
agrícolas que contribuyan a la transición hacia una agricultura sostenible, reduciendo la
dependencia de ins
umos químicos en el manejo de enfermedades en los cultivos.
2. Materiales y Métodos
2.1.
Ubicación del estudio
El presente trabajo se llevó a cabo en el Laboratorio de
Microbiología de la Universidad
Técnica Estatal de Quevedo
,
ubicado en el
Campus La
María
en la v
ía Quevedo
-
Mocache, Cantón Mocache, Provincia de Los Ríos, Ecuador.
2.2.
Material
biológico
El
Trichoderma
spp.
se a
isló
de
l
suelo
de una finca productora de
banano
del cantón
Simón Bolívar. Se peso 1 gramos de la muestra de suelo y se dispe
rsó en una caja Petri
en medio
P
apa
D
extrosa
A
gar (PDA).
La caja se
incubo a 2
8
°C
durante 72 horas
,
después se
mantuvo a
2
5
°C
durante 7 días con
luz blanca para inducir esporulación,
luego se repite el proceso a partir de una muestra micelial
transferi
da a una nueva caj
a
con
medio de cultivo PDA hasta obtener
un
crecimiento puro
, libres de
impurezas
.
El hongo
patógeno
F
.
oxysporum
se
aisló
de raíces de
banano
Cavendish
(
Musa
acuminata
)
, las
muestras de
raíces se lavaron
hasta eliminar impurezas con abundante
agua
;
luego se tomaron fragmentos
de
l
tejido
radicular de unos 4 centímetros para
sumergirlos
en
una
solución de hipoclorito de sodio
al 2
%
durante 2 minutos
y se
enjuagó con agua destilada estéril
.
Con la ayuda de una cámara de flujo laminar
se
sembraron
pequeños
fragmentos de
5 m
m en medio PDA para el aislamiento y
purificación
a 25
°C
.
2.3.
Caracterización morfológica
Para realizar una aproximación del géne
ro del
Trichoderma
y de la especie del
F
.
oxysporum
se estudiaron sus características
morfológicas
a partir d
e
los
cultivo
s
en
medio PDA
.
Las características macro y microscópicas
consideradas
fueron
la
textura
,
colo
r
,
forma, tamaño de conidios
(
Vera
et al., 2025
)
. Las
observa
ciones microscópicas
se dieron con la ayuda de
un microscopio óptico
a 40x y tinción con azul de lactofenol.
Para
la identificación de la especie se realizó
una comparación con
claves
taxonómicas.
2
.4.
C
recimiento
de los microorganismos
.
Para
determina
r el
crecimiento de micelio en
el
antagonista y patógeno, crecidos en
medio de cultivo
PDA, se realizaron mediciones
a las 0, 72,120 y 192 horas
.
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2.5.
Actividad antagónica de
Trichoderma
spp.
sobre
F
.
oxysporum
.
Para esta actividad se utilizó l
a técnica de cultivos duales
de
Trichoderma
spp.,
contrapuestos con
el
fitopatógeno
F
.
oxysporum
.
La técnica consistió en
deposit
ar
en
un extremo un disco de 5 mm de diámetro con micelio activo del
hongo
fitopatógeno
y
en el extremo equidistante se colocó un disco de micelio con
el hongo benéfico
, las cajas
se incubaron a 2
7
ºC y se observó
su crecimiento a lo largo del tiempo para re
gistrar su
medida en
(cm
)
(
Astorga
-
Quirós
et al., 2014
)
.
Los resultados serán interpretados
siguiendo la recomendación de
(
Urgelles Cardoza
et al
.
,
2020)
, ver tabla 1
.
Tabla 1.
Escala de evaluación de la interacción micelial y capacidad
antagónica
in
vitro
de
Trichoderma
spp.
y
F
.
oxysporum
.
GRADO
PORCENTAJE
DE
INVASIÓN
DESCRIPCIÓN DE LA
INTERACCIÓN MICELIAL
Y ESPORULACIÓN
CAPACIDAD
ANTAGÓNICA
0
0%
Sin invasión ni crecimiento de
Trichoderma
sobre la colonia
del patógeno. Detención o
inhibición en la zona de
contacto.
Nula
1
1%
-
25%
Trichoderma
invade hasta una
cuarta parte (1/4) de la
superficie de la colonia del
fitopatógeno.
Baja
2
26%
-
50%
Trichoderma
invade hasta la
mitad (1/2) de la
colonia del
fitopatógeno con
sobrecrecimiento micelial
incipiente.
Moderada
3
51%
-
75%
Trichoderma
invade hasta tres
cuartas partes (3/4) de la
colonia del patógeno, con
presencia de hifas densas.
Alta
4
76%
-
100%
Overgrowth total (100%) sobre
la colonia del fitopatógeno,
acompañado de
esporulación
activa
(formación de conidios)
sobre el micelio hosp
edante.
Muy Alta
3
.
Resultados
y
Discusión
3.1.
Crecimiento de los microorganismos
.
En la Tabla 2,
se puede observar
la evaluación del crecimiento micelial
independientemente de los hongos
Trichoderma
spp. y
F
.
oxysporum
medido en
milímetros
(
mm
)
,
en cuatro intervalos de tiempo (0
,
72,
1
20 y 192 h
oras
)
.
Tabla
2
. Crecimiento de microorganismo
s
evaluado
s
Trichoderma
spp.
y
F
.
oxysporum
.
Microorganismo
Crecimiento mm
0 h
72 h
120 h
192 h
F
.
oxysporum
10
30
35
4
0
Trichoderma spp.
10
50
60
75
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E
n el c
recimiento de
Trichoderma
spp.
se
m
uestra una tasa de crecimiento sostenida y
rápida a lo largo de todo el periodo
, alcanzando a l
as 72 h los 50
mm, y finalizando con
un crecimiento máximo de 75 mm a las
1
92 h.
Mientras que el
c
recimiento de
F
.
oxysporum
m
uestra un desarrollo inicial más lento en comparación con
Trichoderma
spp., alcanzando 30 mm a las 72 h y un pico de
4
0 mm
a las 192 h
.
La superioridad en la velocidad de crecimiento de
Trichoderma
spp. frente
a
F
.
oxysporum
es un mecanismo clave de biocontrol basado en la competencia por espacio
y nutrientes (
Larrea
et al., 2023
).
Trichoderma
spp. se caracteriza por ser un hongo
antagonista de rápido desarrollo micelial, lo que le permite colonizar el sustrato
antes
que los hongos fitopatógenos y restringir su desarrollo (
Beltran
-
Carguacundo
et al.,
2026
).
El
Trichoderma
puede tener la capacidad de
invad
ir
, degrada o sobrecrece
r
sobre
colonias fitopatógenas mediante
micoparasitismo y la liberación de enzimas hid
rolíticas
(quitinasas y glucanasas), provocando la lisis celular de la pared de
Fusarium
(
Morejón
et al., 2024
).
La alta velocidad de crecimiento característica de
Trichoderma
spp. en comparación con
diversos hongos fitopatógenos, se atribuye fundamentalme
nte a su extraordinaria
plasticidad metabólica y a su capacidad para utilizar de forma altamente eficiente una
amplia gama de fuentes de carbono y nitrógeno presentes en
el suelo
(
Vera Rodríguez
et al., 2024
)
.
3.2.
Actividad antagónica de
Trichoderma
spp.
sobre
F
.
oxysporum
.
En
esta
sección
se presenta
n
las
f
iguras 1 a 5
donde se
muestra
el
avance cronológico
de la a
ctividad antagónica de
Trichoderma
spp. sobre
F
.
oxysporum
,
mediante
prueba
de cultivo dual (
in
vitro
) en placas de Petri, desde la inoculación inicial hasta el día 8
(192 horas)
.
Figura
1
.
Confrontación entre
Trichoderma
spp. y
F
.
oxysporum
. Dia 0
(
0 horas
)
Día 0
la figura 1 presenta el i
nicio de la confrontación dual
,
s
e coloca
ron
los discos
miceliales de
Trichoderma
spp. y
F
.
oxysporum
a distancias equidistantes sobre la placa
de Petri.
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Figura
2
. Confrontación entre
Trichoderma
spp. y
F
.
oxysporum
. Dia 3
(
72 horas
)
.
Día 3
la f
igura 2
muestra
una marcada diferencia en la velocidad de crecimiento radiante.
Trichoderma
spp. despliega una mayor tasa de expansión micelial
50 mm
ocupando
rápidamente el espacio libre disponible en la caja, mientras que
F. oxysporum
muestra
un crecimiento más restring
ido
30 mm.
Figura
3
. Confrontación entre
Trichoderma
spp. y
F
.
oxysporum
. Dia 5
(
120 horas
)
.
Día 5
es muy notorio en la f
igura 3
como o
curre el contacto frontal directo entre ambas
colonias.
Trichoderma
spp. alcanza los 60 mm, frenando la progresión de
F
. oxysporum
35 mm al establecer un halo de inhibición, impidiendo que el fitopatógeno avance sobre
el plato de cultivo.
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Figura
4
. Confrontación entre
Trichoderma
spp. y
F
.
oxysporum
. Dia 8
(
192 horas
)
.
Día 8
la f
igura 4
indica que se ha
consolida
do
la invasión y sobrecrecimiento de
Trichoderma
spp. sobre la colonia de
F. oxysporum
, evidenciando una reducción o
degradación del micelio visible de este último (disminución registrada a
20 mm
).
Trichoderma
spp. logra colonizar casi la totalida
d del medio de cultivo
75 mm
, mostrando
signos de esporulación
.
Figura 5. Control de crecimiento de
Trichoderma
spp. y
F
.
oxysporum
. Dia 8
(
192
horas
)
.
Día 8 (Control de crecimiento)
, la f
igura 5
p
ermite comparar las tasas de crecimiento
individual (mo
nocultivo) de ambos microorganismos en condiciones no competitivas,
confirmando que la detención y contracción del micelio de
F. oxysporum
en las cajas de
confrontación se debe a la acción antagónica directa de
Trichoderma
spp.
De manera general, l
a dinámi
ca visualizada en las figuras confirma la elevada capacidad
antagónica de
Trichoderma
spp. frente al hongo patógeno
F
.
oxysporum
, mediante la
combinación de competencia por espacio y nutrientes, micoparasitismo y potencial
antibiosis (
Brizuela
et al., 2023
).
L
a rápida colonización de
Trichoderma
spp. sobre el
sustrato se atribuye a su eficiente metabolismo energético y rápida tasa
de germinación
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y
extensión hifal. Esta ventaja morfogenética le permite adueñarse de los recursos del
medio antes de que
F. oxysporum
pueda establecerse, un mecanismo ampliamente
documentado como la primera línea de defensa biocontroladora (
Lian
et al., 20
23
).
A partir del contacto hifal (Día 5 al Día 8), la inhibición del avance de
F. oxysporum
y la
posterior reducción de su masa micelial responden al fenómeno de micoparasitismo
activo. Durante este proceso,
Trichoderma
reconoce a su huésped, se enrosca
al
rededor de sus hifas y secreta enzimas líticas extracelulares como
-
1,3
-
gl
ucanasas,
quitinasas y proteasas que degradan la pared celular de
Fusarium
, provocando la lisis
celular, pérdida de turgencia y fragmentación micelial (
Morejón
et al., 2024
).
La ca
pacidad de
Trichoderma
para superar ampliamente al fitopatógeno en velocidad
de expansión, establecer halos de inhibición desde el quinto día y consolidar el
sobrecrecimiento y degradación del micelio competidor hacia el octavo día demuestra
mecanismos efi
cientes de competencia por espacio, nutrientes y micoparasitismo
(Astorga
-
Quirós et al., 2014)
. Desde una perspectiva biotecnológica, estos atributos
respaldan su uso como un agente de control biológico altamente eficaz, ofreciendo una
alternativa ecológic
a para mitigar enfermedades radiculares en cultivos de interés
agronómico y reduciendo la dependencia de plaguicidas sintéticos en la agricultura
moderna.
Asimismo, la invasión total sobre la colonia del patógeno observada
a nivel
in vitro
podría
refleja
r
la capacidad metabólica del antagonista para utilizar las hifas lisadas del
patógeno como fuente secundaria de nutrientes, consolidándose como un
interesante
agente de biocontrol eficaz contra la fusariosis en cultivos agrícolas.
4
.
Conclusiones
Se puede observar que el
Trichoderma
spp. nativo tiene un efecto
antagónico
ALTO,
logrando invadir hasta las tres cuartas partes
(
3
/
4
)
de la colonia del hongo fitopatógeno
F. oxysporum
, con presencia de hifas densas
, pudiendo ser considerado c
omo un
potencial biocontrol
. Este
hallazgo
resalta
el potencial de este agente de control
biológico nativo como una alternativa sostenible y ecológica frente a los fungicidas
químicos tradicionales, especialmente frente al impacto devastador que representa
el
hongo fitopatógeno
F
.
oxysporum
en los cultivos agrícolas
.
Contribución de los autores:
Conceptualización,
J
J
A
-
A
.; metodología,
LMR
-
C
.;
software,
CAJ
-
C
.; validación,
DJM
-
V
.; análisis formal,
BELl
-
T
.; investigación,
JJA
-
A
.;
recursos,
LMR
-
C
.; redacción del borrador original,
CAJ
-
C
.; redacción, revisión y edición,
DJM
-
V
.; visualización,
BELl
-
T
.; supervisión,
LMR
-
C
. Todos los autores han leído y
aceptado la versión publicada del manuscrito.
Financiamiento:
Esta investigación
no tuvo financiaci
ón externa
.
A
gradecimientos
:
Se expresa agradecimiento a la Facultad de Posgrados de la
Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ), en especial a la Maestría en
Biotecnología Agropecuaria, así como el financiamiento otorgado por el programa de
becas de
la Secretaría de Educación Superior, Ciencia, Tecnología e Innovación
(SENESCYT)
.
Conflicto
d
e Intereses
:
Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.
Multidisciplinary Collaborative Journal
| Vol.0
4
| Núm.04 | Oct
–
Dic | 202
6
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