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0
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Oct
–
Dic
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5
|
https://mcjournal.editorialdoso.com
ISSN:
3073
-
1356
41
Articulo
Bacterias con potencial de biorremediación en suelos
contaminados con sulfato de cobre procedente del cantón
Mocache
Bacteria with bioremediation potential in soils contaminated with copper
sulfate from the Mocache canton
Naomi Kaymara Wong Carriel
1
,
Ketty Vanessa Arellano Ibarra
2
,
*
,
Ander Leonardo Solórzano
Loor
3
, Hevert Aarón Coello Burgos
4
,
Daniela Yamilet Galán Mendoza
5
y
Keily Damaris Cruzatty
Caldas
6
1
Universidad
Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador, Los Ríos;
https://orcid.org/0009
-
0006
-
5393
-
7640
;
naomi.wong2017@uteq.edu.ec
2
Universidad
Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador, Los Ríos;
https://orcid.org/0000
-
0001
-
7168
-
7485
3
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador, Los Ríos;
https://orcid.org/0009
-
0004
-
4254
-
8514
;
andersolorzano217@uteq.edu.ec
4
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador, Los Ríos;
https://orcid.org/0000
-
0002
-
2949
-
7140
;
hcoellob@uteq.edu.ec
5
U
niversidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador, Los Ríos;
https://orcid.org/0009
-
0000
-
2802
-
8177
;
daniela.galan2017@uteq.edu.ec
6
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador, Los Ríos;
https://orcid.org/0009
-
0008
-
8820
-
701X
;
keily.cruzatty2017@uteq.edu.ec
*
Correspondencia
:
ketty.arellano2017@uteq.edu.ec
https://doi.org/10.70881/mcj/v3/n4/90
Resumen:
La contaminación por metales pesados, como el sulfato de cobre,
representa un riesgo ambiental y sanitario creciente. La biorremediación
mediante bacterias resistentes surge
como una alternativa sostenible para
disminuir su impacto. En este estudio se aislaron cepas bacterianas a partir
de suelos recolectados en tres localidades del cantón Mocache, empleando
diluciones seriadas (10
⁶
)
y cultivo en agar nutritivo. Las cepas fue
ron
caracterizadas mediante rasgos morfol
ó
gicos y pruebas bioqu
í
micas
(catalasa, ureasa, fluorescencia y tinción de Gram). Su capacidad
biorremediadora
se evaluó en plántulas de arroz cultivadas en suelo
contaminado con sulfato de cobre (25,28 mg/kg), inoculadas con 3 mL de
suspensión bacteriana (1:10 v/v), bajo un Diseño Completamente al Azar con
tres tratamientos (B1, B2, B3) y un control. Las cepas B2
, B1 y B3 redujeron
la concentración del contaminante en 20,6 %, 14 % y 3,8 %,
respectivamente. Asimismo, se registró un efecto positivo en el crecimiento
vegetal, destacándose B1 como la cepa con mayor promoción. La DL
50
fue
de 68 mg/L para
Pseudomonas
y
43 mg/L para
Bacillus
. Los resultados
confirman el potencial de estas bacterias para disminuir la presencia de
sulfato de cobre en suelos agrícolas y mejorar el desarrollo de las plantas.
Palabras clave:
contaminación; biorremediadora; morfológicos.
Abstract:
Heavy metal contamination, such as copper sulfate, poses
increasing environmental and human health risks. Bioremediation using
Cita
:
Wong Carriel, N. K., Arellano
Ibarra, K. V., Solórzano Loor, A.
L., Coello Burgos, H. A., Galán
Mendoza, D. Y., & Cruzatty
Caldas, K. D. (2025). Bacterias
con potencial de biorremediación
e
n suelos contaminados con
sulfato de cobre procedente del
cantón Mocache.
Multidisciplinary
Collaborative Journal
,
3
(4), 41
-
53.
https://doi.org/10.70881/mcj/v
3/n4/90
Recibido:
23
/
10
/20
25
Revisado:
20
/
11
/20
25
Aceptado:
22
/
11
/20
25
Publicado:
25
/
11
/20
25
Copyright:
© 202
5
por los
autores
.
Este artículo es un
artículo de acceso abierto
distribuido bajo los términos y
condiciones de la
Licencia
Creative Commons, Atribución
-
NoComercial 4.0
Internacional.
(
CC
BY
-
NC
)
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(
https://creativecommons.org/lice
nses/by
-
nc/4.0/
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resistant bacteria offers a sustainable strategy to mitigate these impacts. In
this study, bacterial strains were isola
ted from soils collected in three localities
of the Mocache canton using serial dilutions (10
⁶
)
and nutrient agar
cultivation. Strains were characterized based on morphological traits and
biochemical tests (catalase, urease, fluorescence, and Gram
staining). Their
bioremediation capacity was evaluated in rice seedlings grown in soil
contaminated with copper sulfate (25.28 mg/kg), inoculated with 3 mL of
bacterial suspension (1:10 v/v) under a Completely Randomized Design with
three treatments (B1, B
2, B3) and a control. Strains B2, B1, and B3 reduced
contaminant concentrations by 20.6%, 14%, and 3.8%, respectively. A
positive effect on plant growth was also observed, with B1 showing the
greatest growth promotion. The LD
v
alues were 68 mg/L for
Pseu
domonas
and 43 mg/L for
Bacillus
. Overall, the results demonstrate the potential of
these bacterial strains to reduce copper sulfate levels in agricultural soils and
enhance plant development.
Keywords:
contamination; bioremediation; morphological
1. In
troducción
El suelo es un recurso esencial para la seguridad alimentaria, sustentando más del 95%
de la producción mundial (FAO, 2015; Naciones Unidas, 2024). Sin embargo, su
degradación constituye una amenaza creciente debido a que se trata de un
recurso no
renovable que requiere estrategias efectivas de conservación y recuperación. Entre los
principales factores de deterioro destacan los metales pesados, presentes de forma
natural por la composición de la roca madre (Wuana & Okieimen, 2011), pero
cuya
concentración se incrementa por actividades antropogénicas como la minería, el uso de
combustibles fósiles y la aplicación intensiva de fertilizantes (Haghighizadeh et al., 2024;
Wan et al., 2024). Estas acumulaciones pueden alcanzar niveles críticos
en suelos
agrícolas.
Las plantas absorben únicamente la fracción biodisponible de los metales presentes en
la fase acuosa del suelo, acumulándolos en raíces, tallos, hojas y frutos (Xu et al., 2022;
Yan et al., 2020). La ingestión de alimentos con altos co
ntenidos de metales pesados
representa un riesgo para la salud humana (Tchounwou et al., 2012; OMS, 2024), motivo
por el cual entidades regulatorias como la Unión Europea y el Codex Alimentarius han
establecido límites máximos permisibles en productos agrí
colas.
En Ecuador, se han reportado concentraciones elevadas de Cd, Ni, Cu y Pb en diversos
suelos agrícolas (Carrillo, 2003), superando los límites establecidos por la normativa
nacional (MAE, 2015). Si bien la investigación local se ha centrado principal
mente en la
mitigación de cadmio mediante enmiendas orgánicas y minerales, existe escasa
información sobre focos de contaminación por cobre (Cu) y alternativas de remediación
adaptadas a distintos tipos de suelos.
El cobre es un micronutriente esencial, pe
ro en exceso provoca fitotoxicidad. Niveles
elevados de Cu generan estrés oxidativo, peroxidación lipídica, daño en membranas y
desorganización del aparato fotosintético, reduciendo el crecimiento y rendimiento
vegetal (Rao et al., 2025; Abbasirad & Ghotbi
-
Ravandi, 2025). En suelos contaminados
con sulfato de cobre (CuSO
)
, la remediaci
ó
n se ha orientado a disminuir la
biodisponibilidad de Cu
²
m
ediante encalado, aportes de materia org
á
nica, biochar y
microorganismos beneficiosos, como hongos micorrícicos (
Tan et al., 2023; Zhao et al.,
2024). Aunque estas estrategias reducen parcialmente la movilidad del metal, su
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eficacia depende en gran medida de la heterogeneidad física y química de cada suelo,
lo que limita su aplicación generalizada.
La biorremediación
basada en microorganismos autóctonos surge como una alternativa
promisoria, especialmente en regiones donde la diversidad microbiana local no ha sido
caracterizada. Para su implementación es indispensable identificar bacterias capaces
de tolerar y reducir
el sulfato de cobre, así como evaluar su potencial para disminuir la
biodisponibilidad del metal y favorecer el crecimiento vegetal (Cedeño & Canchignia,
2022).
Los objetivos fueron aislar y caracterizar bacterias nativas tolerantes al sulfato de cobre,
evaluar su capacidad para reducir la biodisponibilidad de Cu²
en
suelos contaminados
y determinar su efecto sobre el crecimiento vegetal bajo estr
é
s por cobre, con el fin de
identificar microorganismos con potencial biorremediador para su aplicaci
ó
n en la
provincia de Los R
í
os.
2. Materiales y Métodos
2.1. Área de estudio
La investigación se realizó en el laboratorio de Biología y Microbiología, ubicado en el
Campus Experimental “La María” propiedad de la Universidad Técnica Estatal de
Quevedo
(UTEQ), Localizada en el km 7,5 de la vía Quevedo
-
Mocache, provincia de
Los Ríos
–
Ecuador. Ubicada a 01º 04’ 48.6” de latitud sur y 79º 30’04.2” de longitud
oeste y, a una altitud de 85 msnm.
2.2. Aislamiento de cepas bacterianas
Para este estudio se reco
lectaron muestras de suelo de tres puntos distintos de la finca
Holguín, en el cantón Mocache, para el aislamiento de bacterias. Cada muestra (1 g)
fue suspendida en 100 mL de agua destilada en matraces Erlenmeyer, obteniendo
mezclas homogéneas utilizadas
como muestras madre. A partir de estas, se realizaron
diluciones seriadas hasta 1×10
⁶
en
tubos Eppendorf con agitación en vortex. Se
sembraron 200 µL de cada dilución en placas con agar nutritivo (7 g en 250 mL de agua
destilada, esterilizado en autoclave
), y se incubaron durante 48 h. Tras la incubación,
se identificaron colonias bacterianas con morfologías distintas, seleccionándose tres
cepas para su caracterización y evaluación en la investigación.
2.3. Caracterización las poblaciones bacterianas.
Se a
plicó el estudio de la morfología colonial de la cepa (homogeneidad, tamaño, forma,
color, opacidad y textura de las colonias) y su observación al microscopio (forma y
tamaño celular, movilidad, etc.). En la CECT se incluye además la determinación del
Gram
, la catalasa y la oxidasa para células procariotas (Elzeini
et al.,
2017).
2.4. Pruebas bioquímicas.
Las pruebas bioquímicas aplicadas incluyeron ureasa, catalasa y tinción de Gram. La
actividad ureásica se evaluó en un medio con NaCl, agar y fenol rojo,
donde la hidrólisis
de urea elevó el pH, produciendo un cambio de color de amarillo a rojo (Zuluaga y
Martínez, 2018). La prueba de catalasa se realizó con H
O
,
evidenciando liberación de
burbujas como indicativo positivo. La tinción de Gram, tras cultivo
en agar King B,
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permitió diferenciar bacterias Gram positivas y negativas mediante la retención
diferencial de colorantes (Rodríguez y Arenas, 2018).
2.5. Establecimiento de la Dosis Letal media (DL
50
) de sulfato de cobre en cepas
bacterianas
Los
datos de mortalidad se utilizaron para construir una curva de concentración
respuesta para el cobre, representando la mortalidad en función de la concentración del
metal pesado. La DL
50
se calculó utilizando el método aritmético, que implica la
interpolaci
ón lineal entre las concentraciones que producen respuestas de mortalidad
del 50% de la población (Arroyo, 2022).
2.6. Interacción de planta / bacteria / metal.
Se utilizó un enfoque indirecto para medir la disminución de los niveles de metales
pesados, a
través de la interacción entre plantas, bacterias y metales, analizando las
propiedades agronómicas del cultivo de arroz. Llevando a cabo pruebas que hacen uso
de cultivos bacterianos crecidos en King B líquido (1% v/v), con peptona (20.0 g/L),
glicerol (1
5 mL), K2HPO4 (1.5 g), MgSO4 x 7H2O (1,5 g) y agua destilada (pH 7,2),
durante 24 horas a 28 °C en un agitador orbital para favorecer el crecimiento de células
vivas. Además, se utilizó suelo franco arcilloso esterilizado y se colocaron en vasos de
plástic
o en cantidades de 50 gramos por unidad, luego se llevó el suelo a su capacidad
de retención de agua rápidamente (King
et al.,
1954). Se sembraron semillas de arroz
comercial y se dejaron crecer durante tres semanas. Posteriormente, se añadieron 3 mL
de cu
ltivos bacterianos (1 mL de la solución bacteriana en 10 mL de agua destilada) con
una concentración de 1×10
-
⁶ UFC, con el objetivo de evaluar la reducción del sulfato de
cobre en el suelo.
2.7. Evaluación del efecto de las cepas bacterianas
Para determin
ar la eficacia de las cepas bacterianas en la biorremediación del sulfato
de cobre, se realizó un análisis químico del suelo antes y después de la aplicación de
los tratamientos, con el objetivo de cuantificar el porcentaje de reducción del
contaminante. P
aralelamente, se utilizaron plántulas de arroz (
Oryza sativa
L.) como
bioindicadores, evaluando su respuesta fisiológica y morfológica frente a la presencia
del contaminante y a la inoculación bacteriana. Las variables morfológicas medidas
fueron: altura d
e la planta (cm), peso foliar fresco (g), longitud radicular (cm) y peso
radicular fresco y seco (g). Estas mediciones permitieron correlacionar el nivel de
remediación con el desarrollo vegetal, evidenciando el impacto de las cepas bacterianas
tanto en la
descontaminación del suelo como en la promoción del crecimiento de las
plántulas.
2.8. Diseño experimental y análisis de datos
Los tratamientos en estudio fueron B1 (
Pseudomona
sp 1), B2 (
Pseudomona
sp 2), B3
(
Bacillus
) y un testigo absoluto, distribuidos
en diseño completamente al Azar con cinco
repeticiones. Los datos obtenidos fueron analizados mediante ANOVA y se aplicó la
prueba de rangos múltiples de Tukey para la comparación de medias con un nivel de
significancia de p ≤ 0,05, empleando el programa
estadístico InfoStat.
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3.
Resultados
3.1. Caracterización morfoquímica.
La caracterización morfo
quimica
permitió distinguir claramente a las tres cepas
bacterianas aisladas, evidenciando variabilidad en forma, elevación y reacción a la
tinción de Gram. Destaca la diversidad estructural entre las cepas, así como la diferencia
en la composición de la pared cel
ular, al identificarse tanto bacterias Gram positivas
como negativas. Adicionalmente, todas las cepas presentaron actividad ureásica y
catalásica, lo que sugiere un potencial metabólico relevante para la degradación de
compuestos minerales en suelos contam
inados
(Tabla1)
.
Tabla 1
Caracterización morfoquímica
Características
Cepas
B1
B2
B3
Forma
Circular
+
-
-
F
usiforme
-
+
-
F
ilamentosa
-
-
+
Elevación
P
lana
+
-
+
E
levada
-
+
-
C
onvexa
-
-
-
Forma
d
el
b
orde
E
ntera
-
-
-
O
ndulada
+
+
-
F
ilamentosa
-
-
+
Pruebas
bioquímicas
Tinción
de
Gram
-
-
+
Catalasa
+
+
+
Ureasa
+
+
+
Fluores
cencia
-
+
-
3.2. Análisis de suelo
En la Figura 1 se presentan los resultados del análisis de suelo, que muestran
diferencias
significativas en la concentración de sulfato de cobre entre los tratamientos.
El tratamiento B2 generó una reducción del 20
,
6
%, el tratamiento B1 una disminución
del 14
%, y el tratamiento B3 una reducción del 3
,
8
%, en comparación con la
concentración i
nicial de 25
,
28 mg/kg
.
Figura 1
Reducción de la concentración de cobre en el suelo tras la aplicación de cepas
bacterianas.
d
b
a
c
0
5
10
15
20
25
30
Control
B1
B2
B3
% Reducci
ó
n del Cu
(mg kg
-
1
)
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3.3. Dosis Letal media (DL
50
) de bacterias tolerantes al sulfato de cobre.
En esta investigación, el CuSO
4
a una concentración de 68 mg/L provocó una mayor
mortalidad en las cepas bacterianas de
Pseudomonas
, específicamente 40 y 50 % para
cepa B1 y B2, respectivamente. mientras que, en el caso de
Bacillus
(B3)
, la
concentración que causó la mortalidad fue de 43
mg/L. Estos resultados indican que, en
un lapso de 20 horas, esa cantidad de cobre es capaz de eliminar el 50
% de las cepas
bacterianas evaluadas
(Figura 2)
.
Figura 2
Determinación de la d
osis letal
media (DL
50
) del sulfato de cobre en las cepas
bacterianas B
1
, B
2
y
B3.
3.4. Efecto de cepas bacterianas en el crecimiento de
Oryza sativa
La inoculación con cepas bacterianas tuvo un efecto significativo sobre el desarrollo
morfológico de
Oryza sativa
(Figura 3). En todas las variables analizadas altura de
planta (A), peso foliar (B), longitud de raíz (C) y peso radicular (D) se observaron
d
iferencias estadísticas frente al control, con incrementos notables en los tratamientos
y = 0,68x + 4
R² = 0,9844
0
10
20
30
40
50
60
70
80
0
20
40
60
80
100
120
Mortalidad (%)
Concentración (mg/L)
B1
DL
50
= 68
mg/L
y = 0,5486x + 11
R² = 0,844
0
10
20
30
40
50
60
70
0
20
40
60
80
100
120
Mortalidad (%)
Concentración (mg/L)
B2
DL
50
= 68mg/L
y = 0,8229x + 14
R² = 0,8524
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0
20
40
60
80
100
120
Mortalidad (%)
Concentración (mg/L)
B3
DL
50
= 43mg/L
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bacterianos. La cepa B1 destacó consistentemente como la más efectiva, registrando
los promedios
más
altos de altura de planta (45,1 cm), peso foliar seco (1,2 g), long
itud
(11
,
1 cm) y biomasa seca de raíz (0
,
4 g).
Figura 2
Altura de
plán
tulas
(A), peso foliar (B), longitud de raíz (C) y
peso radicular
(D) de plantas
de arroz con la presencia de cobre.
3.5. Efectos del sulfato de cobre y cepas bacterianas sobre el desarrollo y
comportamiento de
Oryza sativa
en condiciones experimentales
En la Figura 4
se muestran plántulas de arroz inoculadas con las cepas bacterianas B1,
B2 y B3, junto con el
control sin tratamiento bacteriano, todas expuestas al cobre. A
pesar de que todas las plantas presentaron síntomas de clorosis debido a la presencia
de cobre, las plantas tratadas con las cepas bacterianas (B1, B2 y B3) mostraron mayor
crecimiento en comp
aración con el control, que tuvo un menor desarrollo.
c
a
b
b
0
20
40
60
Altura de Plántulas (cm)
CONTROL
B1
B2
B3
c
a
b
b
c
a
b
b
0,0
0,5
1,0
1,5
CONTROL
B1
B2
B3
Peso Foliar (g)
PESO HÚMEDO
PESO SECO
c
a
b
b
c
a
b
b
0
2
4
6
8
10
12
14
CONTROL
B1
B2
B3
Longitud de Raíz (cm)
LARGO
ANCHO
c
a
b
b
c
a
b
b
0,1
0,3
0,5
0,7
0,9
1,1
1,3
1,5
CONTROL
B1
B2
B3
Peso Radicular (g)
PESO HÚMEDO
PESO SECO
A
B
C
D
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Figura 4
Efectos en la morfología de Oryza sativa ante la inoculación de bacterias
con
potencial
de biorremediación de sulfato de cobre.
4.
Discusión
Caracterizar las poblaciones bacterianas tolerantes al sulfato de cobre del cantón
Mocache perteneciente a la zona baja de la provincia de Los Ríos.
Las cepas aisladas mostraron características morfológicas y bioquímicas consistentes
con microorganismos a
daptados a ambientes contaminados con metales pesados. Su
capacidad para crecer en presencia de concentraciones elevadas de cobre concuerda
con lo reportado por Karnwal et al. (2025), quienes indican que la exposición prolongada
favorece la adquisición de
mecanismos de detoxificación, tales como modificación de la
pared celular, formación de biopelículas y producción de compuestos quelantes.
Adicionalmente, las habilidades metabólicas observadas en las cepas, incluyendo la
posible solubilización de nutrient
es, coinciden con funciones ampliamente descritas para
rizobacterias que habitan suelos degradados (Lai et al., 2022). Estos resultados
confirman el potencial de las bacterias autóctonas como agentes microbianos aptos para
aplicaciones de biorremediación.
Establecer la Dosis Letal media (DL
50
) de bacterias tolerantes al sulfato de cobre.
Las cepas B2, B1 y B3 lograron reducir la concentración de cobre en 20,6 %, 14,0 % y
3,8 %, respectivamente, evidenciando su capacidad de mitigar este contaminante. Estos
valores respaldan la hipótesis inicial y son coherentes con los mecanismos descritos por
Aslam et al. (2025), quienes destacan el rol de grupos funcionales microbianos
(carboxilo, fosfato y amina) en la biosorción e inmovilización de iones metálicos. Aunqu
e
las eficiencias obtenidas son inferiores a remociones superiores al 90 % reportadas en
Pseudomonas
y
Bacillus
(Hu et al., 2025; Rocco et al., 2024), estas diferencias podrían
atribuirse a las condiciones experimentales, al uso de cepas individuales y al
tiempo
limitado de exposición. Estudios previos señalan que los consorcios microbianos
B1
B
2
B
3
CONTROL
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presentan un desempeño superior por su sinergia metabólica (Santana et al., 2020), lo
cual sugiere un espacio significativo para la optimización de la remediación.
Deter
minar la reducción de sulfato de cobre mediante la interacción de bacterias
biorremediadoras /planta
Además de reducir el contaminante, las cepas evaluadas demostraron efectos positivos
en el crecimiento vegetal. Este comportamiento ha sido ampliamente re
portado para
bacterias tolerantes a metales pesados, que contribuyen a mitigar el estrés oxidativo,
favorecer la absorción de nutrientes y estimular la fisiología vegetal (Thin et al., 2022).
Los resultados refuerzan la importancia de las rizobacterias con
doble funcionalidad:
biorremediación y promoción del crecimiento, elementos esenciales para la restauración
sostenible de suelos contaminados.
El empleo de bacterias provenientes de suelos agrícolas del cantón Mocache ofrece
ventajas relevantes, ya que es
tas cepas se encuentran adaptadas a las condiciones
edafoclimáticas locales y a los históricos de uso intensivo de agroquímicos. Esta
adaptación puede traducirse en una mayor resiliencia y eficacia en condiciones reales
de campo, como ha sido demostrado en
otros contextos de remediación microbiana
(Abasolo & Morante, 2020).
5.
Conclusiones
La caracterización morfoquímica fue exitosa al confirmar la diversidad fenotípica y
genérica de las tres cepas aisladas, al distinguirse claramente por su forma, elevació
n,
y reacción Gram. Además, la presencia universal de las actividades ureásica y
catalásica en todas las cepas respalda su potencial metabólico para intervenir en ciclos
de nutrientes y la degradación de compuestos minerales en suelos, lo que es crucial
pa
ra la fitorremediación de contaminantes.
La evaluación de la dosis letal media (DL
50
) para las cepas bacterianas confirmó su
diferencial de tolerancia al sulfato de cobre. Las cepas de
Pseudomonas
(B1 y B2)
mostraron una mayor sensibilidad al contaminante, alcanzando una concentración de
CuSO
4
de 68 mg/L. En contraste, la cepa de
Bacillus
(B3) exhibió una mayor resistencia,
con 43 mg/L.
La aplicación de las cepas bacterianas (B1, B2 y B3) mostró un efecto significativo en la
reducción de la concentración de sulfato de cobre en el suelo, lo que
evidencia su
capacidad de biorremediación. Específicamente, el tratamiento B2 demostró la mayor
eficiencia, logrando una disminución del 20,6 % en la concentración inicial de 25,28
mg/kg de CuSO
4.
Contribución de los autores:
Todos los autores
contribuyeron por igual a la
preparación
del documento.
Ademas, todos
han leído y aceptado la versión
publicada del manuscrito.
Financiamiento:
Esta investigación no ha recibido financiación externa
Declaración de disponibilidad de datos:
Los
datos están disponibles previa
solicitud a los autores de correspondencia:
ketty.arellano2017@uteq.edu.ec
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Conflicto de interés:
Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses
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