Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol . 0 3 | Núm . 0 4 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com ISSN: 3073 - 1356 178 A rtículo Sustratos ecológicos y Trichoderma spp. en la germinación y desarrollo inicial de Theobroma cacao L. Ecological substrates and Trichoderma spp. in the germination and initial development of Theobroma cacao L. Mercedes Susan a Carranza - Patiño 1 , * , Yosselin Ariana Castro - Mena 2 , Joselyn Nohelia García - Conza 3 , Rommel Arturo Ramos - Remache 4 y Robinson J. Herrera - Feijoo 5 1 U niversidad Técnica Estatal de Quevedo , Ecuador , Quevedo ; https://orcid.org/0000 - 0002 - 0917 - 0415 2 U niversidad Técnica Estatal de Quevedo , Ecuador , Quevedo ; https://orcid.org/0009 - 0006 - 5900 - 8279 , yosselin.castro2016@uteq.ed u.ec 3 U niversidad Técnica Estatal de Quevedo , Ecuador , Quevedo ; https://orcid.org/0009 - 0003 - 5664 - 5609 , joselyn.garciac2016@uteq.edu.ec 4 U niversidad Técnica Estatal de Quevedo , Ecuador , Quevedo ; https://orcid.org/0000 - 0002 - 3574 - 9156 , rramos@uteq.edu.ec 5 U niversidad Técnica Estatal de Quevedo , Ecuador , Quevedo https://orcid.org/0000 - 0003 - 3205 - 2350 , rherreraf2@uteq.edu.ec * Correspondencia : mcarranza@uteq.edu.ec https://doi.org/10.70881/mcj/v3/n4/98 Resumen: El uso de sustratos ecológicos constituye una estrategia eficaz para obtener plantas de cacao vigorosas y saludables desde las primeras fases del cultivo. Esta investigación se evaluó la influencia de sustratos ecológicos y Trichoderma spp. en la germinación y desarrollo inicial de Theobroma cacao L. Se aplicó un Diseño Completamente al Azar (DCA). En la fase de germinación se establecieron cuatro tratamient os ( Trichoderma : EDC - E1, EDC - Q1, EDC - S1 y un control) con cinco repeticiones (semillas). Para el crecimiento inicial se empleó un diseño DCA con arreglo factorial 3×4 (tres sustratos × cuatro tratamientos de Trichoderma ) y tres repeticiones. Se evaluaron de germinación: porcentaje, tiempo, longitud, peso fresco y seco de raíz e hipocótilo; y variables de crecimiento: altura, número de hojas, diámetro de tallo, peso fresco y seco foliar, longitud y volumen radicular, así co mo índice de robustez. Se observaron diferencias significativas en peso fresco radicular (0,50 g) y longitud de hipocótilo (12,06 cm) con EDC - E1. En crecimiento, el sustrato turba + tierra de monte con EDC - E1 mostró interacción significativa, obteniendo ma yor diámetro de tallo (2,77 mm), volumen radicular (6,5 cm³) y biomasa foliar. L a cepa EDC - E1 combinada con turba + tierra de monte mejoró significativamente la calidad fisiológica de las plántulas. Palabras clave: perlita, turba, tierra de monte, microor ganismo, sostenibilidad Abstract: The use of ecological substrates is an effective strategy for obtaining vigorous and healthy cocoa plants from the early stages of cultivation. This research evaluated the influence of ecological substrates and Trichoder ma spp. on the germination and initial development of Theobroma cacao L. A completely randomised design (CRD) was applied. In the germination phase, four treatments ( Trichoderma : EDC - E1, EDC - Q1, EDC - S1 and a control) were established with five replicates (seeds). For initial growth, a CRD with a 3×4 factorial arrangement (t hree substrates × four Trichoderma treatments) and three replicates was used. The following germination variables were evaluated: percentage, time, length, fresh and dry weight of root and hypocotyl; and growth variables: height, number of leaves, stem dia meter, fresh and dry leaf weight, root length and volume, as well as robustness index. Cita: Carranza Patiño, M. S., Castro - Mena, Y. A., García - Conza, J. N., Ramos - Remache, R. A., & Herrera - Feijoo, R. J. (2025). Sustratos ecológicos y Trichoderma spp. en la germinación y desarrollo inicial de Theobroma cacao L. Multidisciplinary Collaborative Jour nal , 3 (4), 178 - 204. https://doi.org/10.70881/mcj/v3/ n4/98 Recibido: 03 / 10 /20 25 Revisado: 05 / 12 /20 25 Aceptado: 17 / 12 /20 25 Publicado: 20 / 12 /20 25 Copyright: © 202 5 por los autores . Este artículo es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos y condiciones de la Licencia Creative Commons, Atribución - NoComercial 4.0 Internacional. ( CC BY - NC ) . ( https://creativecommons.org/licen ses/by - nc/4.0/ )
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 179 Significant differences were observed in root fresh weight (0.50 g) and hypocotyl length (12.06 cm) with EDC - E1. In terms of growth, the peat + forest soil substrate wit h EDC - E1 showed significant interaction, obtaining greater stem diameter (2.77 mm), root volume (6.5 cm³) and leaf biomass. The EDC - E1 strain combined with peat + forest soil significantly improved the physiological quality of the seedlings. Keywords: pe rlite, peat, mountain soil, microorganism, sustainability 1. Introducción En los sistemas de producción de cacao, el éxito agronómico no comienza en el campo, sino en la calidad fisiológica de las plántulas establecidas en vivero (Puig et al., 2021). La producción mundial de cacao superó los 5 millones de toneladas anuales. Áfri ca occidental lidera la producción global, siendo Costa de Marfil y Ghana responsables de más del 60% del total mundial (Huda - Shakirah et al., 2022). América Latina mantiene una participación significativa en este mercado, destacando Brasil y Ecuador como productores clave (Chuncho et al., 2021). La industria del chocolate representa el principal destino del cacao; este cultivo encuentra aplicaciones en los sectores cosmético y farmacéutico. La diversificación de usos del cacao incrementa su demanda global y asegura su posición como un cultivo estratégico a nivel internacional (Valarezo et al., 2023). Ecuador se posiciona como uno de los principales productores de cacao en América Latina y ostenta el título de mayor exportador mundial de cacao fino de aroma. La producción nacional alcanza aproximadamente 370,000 toneladas anuales, lo que representa el 7% de la producción mundial (Auhing et al., 2021). Las provincias de Los Ríos, Guayas y Manabí lideran la producción ecuatoriana, aportando conjuntamente más de l 70% del total producido en el país (Anzules et al., 2022). Este cultivo resulta fundamental para la economía ecuatoriana, ya que genera empleo directo e indirecto en el sector agrícola y contribuye significativamente a las exportaciones no petroleras (Ab ad et al., 2020). Los productores enfrentan diversos problemas fitosanitarios y nutricionales durante el establecimiento de plántulas de cacao en condiciones de invernadero. Las enfermedades causadas por patógenos como Phytophthora spp. y Fusarium spp. afe ctan severamente el desarrollo inicial de las plantas (Perrine - Walker, 2020). La nutrición inadecuada derivada del uso de sustratos deficientes en propiedades físico - químicas limita significativamente el crecimiento de las plántulas (Puig et al., 2021). Es tas dificultades generan baja tasa de germinación, plántulas débiles y desarrollo inicial lento. E n regiones tropicales productoras como Ecuador, el establecimiento inicial del cacao continúa limitado por sustratos poco eficientes y prácticas de manejo que no garantizan un sistema radicular funcional ni un crecimiento temprano vigoroso (Kongtragoul et al., 2021). El uso de sustratos ecológicos tales como perlita, turba y tierra de monte mejora el establecimiento de plántulas en condiciones controladas de in vernadero (García - Muñoz et al., 2023). Estos materiales orgánicos e inorgánicos destacan por su capacidad de retención hídrica, lo que asegura la disponibilidad constante de agua
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 180 para las raíces. Los sustratos proporcionan adecuada aireación del sistema ra dicular y aportan nutrientes esenciales para el metabolismo vegetal (Pimentel et al., 2023). La turba proporciona materia orgánica de alta calidad que mejora la estructura del sustrato, la perlita optimiza la porosidad y la aireación del medio de cultivo, y la tierra de monte aporta microorganismos benéficos y nutrientes naturales. La combinación de componentes crea un ambiente edáfico favorable para el desarrollo óptimo del sistema radicular (Camacho et al., 2021). El uso de agentes biológicos como Trichod erma spp. ha ganado relevancia creciente en los sistemas de producción agrícola sostenible. Trichoderma constituye un género de hongos que actúan simultáneamente como promotores de crecimiento vegetal y agentes de control biológico contra fitopatógenos (So od et al., 2020). El mecanismo de acción de Trichoderma incluye la competencia por espacio y nutrientes con patógenos del suelo, limitando su establecimiento. Este hongo produce enzimas hidrolíticas que degradan las paredes celulares de hongos fitopatógeno s, ejerciendo antagonismo directo (Poveda et al., 2020). Trichoderma induce resistencia sistémica en las plantas, lo que activa mecanismos de defensa endógenos. Trichoderma es un microorganismo benéfico que estimula la germinación y el desarrollo inicial d e las plántulas al promover la absorción de nutrientes y mejorar las propiedades físicas y biológicas del sustrato (Mukhopadhyay & Kumar, 2020). La aplicación combinada de sustratos ecológicos y promotores biológicos de crecimiento como Trichoderma representa una estrategia biotecnológica prometedora para superar los problemas de establecimiento en el cultivo de cacao bajo condiciones de invernader o (Adetunji et al., 2022). La estrategia integrada asegura una producción inicial más eficiente y plantas de mayor vigor, lo que contribuye al desarrollo de sistemas agrícolas más sostenibles y ambientalmente responsables. Se hipotetiz ó que la aplicación c ombinada de sustratos ecológicos y cepas específicas de Trichoderma spp. incrementaría significativamente tanto el porcentaje de germinación como el desarrollo morfofisiológico inicial de plántulas de T. cacao L. La presente investigación tuvo como objetiv o evaluar la germinación y crecimiento de plantas de T. cacao mediante la aplicación de cepas seleccionadas de Trichoderma spp. en diferentes combinaciones de sustratos ecológicos. 2. Materiales y Métodos 2.1. Localización Los experimentos se llevaron a ca bo en el laboratorio de Biotecnología y en el ecoinvernadero del Campus La María, perteneciente a la Universidad Técnica Estatal de Quevedo, ubicado en el kilómetro 7½ de la vía Quevedo El Empalme, cantón Mocache, provincia de Los Ríos. Su posición geográf ica está determinada de la siguiente manera: Latitud 1° 5' 1,81” S; Longitud 79° 29' 53,77'' O. Eco - invernadero UTEQ: Coordenadas UTM: Zona 17N; 666603.32 m E; 9880503.61 m S. Coordenadas geográficas: Latitud 1° 5' 1,81” S; Longitud 79° 29' 53,77'' O; alti tud: 66 m s. n. m.
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 181 2.2. Diseño experimental 2.2.1. Fase de germinación En este estudio se implementó un Diseño Completamente al Azar (DCA) que incluyó cuatro tratamientos, cada uno con cinco observaciones. Cada observación estuvo formada por cinco plantas, lo que fue un total de veinte observaciones por tratamiento. En la Tab la 1 se detalla la descripción de los tratamientos que se utilizaron en la investigación. La dosis empleada se basó a los reportado por Gándara & Gutiérrez (2023) . Tabla 1 . Tratamientos empleados en la germinación de semillas de cacao CCN - 51 Tratamiento Descripción (1X108 UFC) T1 Trichoderma cepa EDC - E1 (200 μ l) T2 Trichoderma cepa EDC - Q1 200 μ l) T3 Trichoderma cepa EDC - S1 200 μ l) T4 Control H2O destilada Nota. Las cepas fueron proporcionadas por el banco de cepas del Laboratorio de biotecnología las cuales han sido caracterizadas morfológicamente. Las siglas corresponden al sitio de recolección de las muestras. E (El Empalme), Q (Quevedo) y S (Santo Domingo). 2.2.2. Fase de crecimiento inicial de plantas Se empleó un Diseño Completamente al Azar (DCA) con un arreglo factorial de 3 X 4, con tres repeticiones por cada tratamiento. El Factor A estuvo constituido por tres niveles de sustratos ecológico: perlita + tierra de monte, turba + tierra de monte y tierra de monte s ola. El Factor B correspondió a las cepas de Trichoderma spp., aplicadas a una concentración de 1X10 8 UFC. El control fue inoculado con agua destilada . Los tratamientos resultantes del arreglo factorial se presentan en la Tabla 2 . La dosis de Trichoderma empleada se basó a los reportado por Gándara & Gutiérrez (2023) , para la dosis de sustrato se tomó lo propuesto por Česonienė et al. (2023); Lu et al . (2024) y Moreira et al. (2021) . Tabla 2 Tratamientos para la aplicación de Trichoderma spp. en plantas de cacao T Factor A y B Descripción T1 A1 B1 Perlita 40% + Tierra de monte 60% + Trichoderma EDC - E1(2 mL) T2 A1 B2 Perlita 40% + Tierra de monte 60%+ Trichoderma EDC - Q1(2 mL) T3 A1 B3 Perlita 40% + Tierra de monte 60% + Trichoderma EDC - S1(2 mL) T4 A1 B4 Perlita 40% + Tierra de monte 60% + Control H2O destilada T5 A2 B1 Turba 40% + Tierra de monte 60% + Trichoderma EDC - E1(2 mL) T6 A2 B2 Turba 40% + Tierra de monte 60% + Trichoderma EDC - Q1(2 mL)
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 182 T7 A2 B3 Turba 40% + Tierra de monte 60% + Trichoderma EDC - S1(2 mL) T8 A2 B4 Turba 40% + Tierra de monte 60% + H2O destilada T9 A3 B1 Tierra de monte 100% + Trichoderma EDC - E1(2 mL) T10 A3 B2 Tierra de monte 100% + Trichoderma EDC - Q1(2 mL) T11 A3 B3 Tierra de monte 100% + Trichoderma EDC - S1(2 mL) T12 A3 B4 Tierra de monte 100% + Control H 2 O destilada 2.3. Manejo del experimento Este estudio se realizó en el laboratorio de Biotecnología y en el ecoinvernadero ubicado en el Campus La María, donde se mantuvo condiciones controladas para el cultivo. Se analizó la germinación de semillas durante 15 días y el desarrollo inicial de las pl ántulas de cacao en 45 días. 2.3.1. Aplicación de Trichoderma spp. en la germinación de semillas de cacao Colecta de materiales de cacao Se obtuvo semillas de mazorcas de cacao del clon CCN - 51 producto de polinización libre de la Finca La Ponderosa, del Recinto L a Ercilia, Cantón Ventanas, provincia de Los Ríos, en las coordenadas 1° 13′ 46.02″ S, 79° 25′ 22.00″ W. Obtención de las Trichoderma spp Las cepas de Trichoderma utilizadas en este estudio fueron proporcionadas por el Laboratorio de Biotecnología de la Un iversidad Técnica Estatal de Quevedo. Se preparó un medio de cultivo a base de Agar Dextrosa de Patata (PDA) disolviendo 19,5 g del medio en 500 ml de agua destilada estéril. Esta formulación se esterilizó mediante autoclave a 120 °C durante 40 minutos con el objetivo de eliminar posibles contaminantes microbiológicos y garantizar condiciones óptimas para el crecimiento de hongos u otros microorganismos de interés. Luego se colocó 100 μ L en el medio de cultivo y se dejó en un agitador magnético por 72 horas . Lavado y desinfección de semillas de cacao Se realizó el lavado de las mazorcas luego el retiro de la testa de las semillas (Randy et al., 2024) posteriormente fueron desinfectadas con hipoclorito de sodio al 1% durante 3 minutos. Se realizó dos enjuag ues con agua destilada estéril (Gui et al., 2023) . Inoculación de Trichoderma spp. en semillas durante la fase de germinación Se colocaron en unas bandejas germinadoras durante quince días con una solución de Trichoderma (Gui et al., 2023) , con una concentración celular de 1×10⁸ UFC. A cada semilla se le aplicó una dosis de 200 μ L del inóculo con la micropipeta garantizando una distribución homogénea del microorganismo en los diferentes tratamientos (Bošnjak et al. 2024) . El riego se llevó a cabo tres veces por semana con un atomizador con 10 ml de agua destilada por tratamiento .
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 183 2.3.2. Desarrollo inicial del cultivo de cacao en respuesta a diferentes sustratos ecológicos y Trichoderma spp Formulación de los sustratos Se realizó la recolección de la tierra de monte de la Finca La Ponderosa con alta densidad de vegetación entre árboles de guaba y frutales. Se separó los restos de vegetales de mayor tamaño, incluyendo ramas, raíces entre otros. La formulación de sustratos constó en 60 % de tierra de monte y 40% de los sustratos a evaluar . Se esterilizó la tierra de monte en autoclave 120°C d urante 40 minutos (Manea et al., 2024) . Germinación y siembra de semillas de cacao Se llevó a cabo la germinación de las semillas en bandejas germinadoras. Después de dos días, se sembraron en vasos de plásticos de 32 onzas de 946 g con sustrato, en perl ita y turba se utilizaron 378 g y en tierra de monte 568 g . Los contenedores fueron cubiertos con película plástica durante tres días posteriores al trasplante para mantener condiciones de humedad y temperatura favorables para el establecimiento de las pl ántulas (Gamboa et al., 2020) . Condiciones de crecimiento Las plantas se conservaron en un invernadero con temperaturas variables entre 24 y 27 °C. El riego se llevó a cabo de manera manual en vasos de 7 onzas que equivale a 200 ml de agua corriente cada 48 horas. Aplicación de Trichoderma spp La trichoderma s e aplicó en dos ocasiones: a los 15 días después de la siembra y 30 días nuevamente. Se atomizaron 2 mL de la suspensión directamente en el suelo por cada planta en cada ocasión (Vera - C ruz et al., 2023) . 2.4. Variables evaluadas 2.4.1. Fase de Germinación (15 días) El porcentaje de germinación se determinó mediante observación diaria de las semillas dispuestas en bandejas con papel toalla humedecido, registrando el número de semillas germinadas hasta el día 15 posterior a la siembra. El cálculo se realizó mediante la fórmula: % germinación = (semillas germinadas/número total de semillas) × 100 (Hollman - Aragón et al., 2023). El tiempo de germinación se registró como el período desde la siembra hasta la emergencia radicular de cada semilla. En las plántulas germinadas se evaluó la longitud de raíz e hipocótilo (cm) mediante regla milimétrica, midiendo desde el cuello radicular hasta el ápice y desde la base hasta la zona de trans ición aérea, respectivamente (Tamayo - Ramirez et al., 2022; Sarti et al., 2023). El peso fresco radicular e hipocotiledonar (g) se determinó inmediatamente tras la extracción mediante balanza analítica de precisión 0,01 g (Kaboli et al., 2021; Santos - Díaz e t al., 2022). El peso seco (g) se obtuvo tras
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 184 deshidratación en estufa a 65°C durante 24 h hasta peso constante, utilizando balanza de precisión (Pachajoa et al., 2023; Ceccarelli et al., 2024). 2.4.2. Variables del crecimiento inicial Las variables morfom étricas incluyeron: altura de planta (cm), medida desde la base del tallo hasta el ápice foliar con regla milimétrica (Vargas et al., 2024); diámetro de tallo (mm), determinado con calibrador digital a 2 cm de la base (Reyes - Pérez et al., 2021); y número d e hojas, mediante conteo directo (Reyes - Pérez et al., 2020). El índice de robustez se calculó como el cociente altura/diámetro de tallo (Paulo et al., 2024). Las variables de biomasa aérea comprendieron peso fresco foliar (g), cuantificado inmediatamente t ras el corte, y peso seco foliar (g), obtenido tras secado en estufa a 65°C hasta peso constante (de Sousa et al., 2021). A nivel radicular se evaluaron: peso fresco y seco de raíz (g), siguiendo la metodología descrita previamente (Chavez - Jalk et al., 202 2); longitud radicular (cm), medida desde la base del tallo hasta el extremo de la raíz principal con regla graduada (Saleh et al., 2022); y volumen radicular (cm³), mediante el método de desplazamiento de agua en probeta graduada con 500 ml de agua destil ada (Saleh et al., 2022). 2.5. Análisis estadístico La variable porcentaje y tiempo de germinación fue ron analizadas de manera descriptiva. Para las demás variables se efectuó un análisis de varianza (ANOVA), complementado con la prueba de Tukey para compa raciones múltiples al nivel de significancia del 5 %. El procesamiento de los datos se llevó a cabo empleando el software estadístico InfoStat, versión 2020. 3. Resultados 3.1. Viabilidad de la aplicación de Trichoderma spp en la germinación de semillas de cacao 3.1.1. Porcentaje de germinación (%) En la etapa de germinación de las semillas de cacao (var. CCN - 51) se alcanzó un 100 % de germinación en todas las observaciones evaluadas. Esto incluye tanto a las semillas tratadas con las diferentes cepas de Trichoderma (EDC - E1, EDC - Q1 y EDC - S1) como a las semillas del tratamiento control sin inoculación (agua destilada). En consecuencia, la presencia de Trichoderma spp. no alteró el porcentaje final de germinación de las semillas, ya que todas germinaron por completo en condiciones controladas . 3.1.2. Tiempo de germinación (TG) De modo similar al porcentaje, el tiempo de germinación (TG) fue equivalente para todas las observaciones. Todas las semillas germinaron en el mismo intervalo de ti empo de dos días independientemente de la cepa de Trichoderma aplicada o de la
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 185 ausencia de ésta. Esto confirma que la incorporación de agentes de biocontrol como Trichoderma spp. no afectó la rapidez ni la eficiencia del proceso germinativo, manteniéndose uniforme en todas las condiciones evaluadas. 3.1.3. Longitud de la raíz, peso fresco radicular y peso seco radicular En las plántulas recién germinadas, el peso fresco radicular ( PFR) fue la única variable de raíz que mostró diferencias significativas con un coeficiente de variación de 13,94% entre tratamientos con Trichoderma . La inoculación del T1 con la cepa EDC - E1 dio el mayor PFR promedio (0,50 g), seguida por el T2 cepa EDC - Q 1 y el control, con valores intermedios (~0,46 0,40 g). En contraste, la aplicación del T3 cepa EDC - S1 resultó en el menor PFR (0,36 g), este valor fue significativamente inferior al obtenido con el tratamiento 1 EDC - E1. Por otro lado, la longitud de la r aíz (LR) y el peso seco radicular (PSR) no presentaron diferencias estadísticas entre los tratamientos. Todos los tratamientos mostraron longitudes de raíz similares (≈5,5 6,3 cm) y acumulación comparable de biomasa seca radical (~0,07 0,09 g) durante la g erminación, lo que indica que la aplicación de distintas cepas de Trichoderma spp. no alteró de forma notable estos parámetros iniciales (Tabla 3 ). Tabla 3 Efecto de los tratamientos sobre la longitud de la raíz, peso fresco radicular y peso seco radicular Tratamientos LR PFR PSR T1 Trichoderma spp. (EDC - E1) 6,35 ± 1,00 a 0,50 ± 0,09 a 0,09 ± 0,01 a T2 Trichoderma spp. (EDC - Q1) 5,78 ± 0,66 a 0,46 ± 0,05 ab 0,08 ± 0,02 a T 3 Trichoderma spp. (EDC - S 1) 5,24 ± 1,29 a 0,36 ± 0,06 b 0,07 ± 0,02 a T4 Control H2O 5,89 ± 1,55 a 0,40 ± 0,04 ab 0,07 ± 0,01 a CV% 22,6 13,94 18,02 Nota: LR (longitud de raíz), PFR (Peso fresco radicular), PSR (Peso seco radicular), CV% (Porcentaje de coeficiente de variación). Resultados presentados en medias aritmética ± desviación estándar. Letras diferentes denotan diferencias significativas entre tra tamientos según Tukey (p<0,05). 3.1.4. Longitud del hipocótilo, peso fresco de hipocótilo y peso seco hipocótilo Tanto la longitud del hipocótilo (LH) como el peso fresco del hipocótilo (PFH) mostraron diferencias significativas con un coeficiente de variación d e 9,09% y 5,56% entre tratamientos. La cepa del T1(EDC - E1) generó plántulas con el hipocótilo más largo, registrando en promedio 12,06 cm, seguida de cerca por las plántulas tratadas con la cepa del T2 (EDC - Q1) con 11,80 cm. Estos valores fueron superiores al observado en el control sin Trichoderma (10,28 cm). Por su parte, el T3 con la cepa de Trichoderma spp. EDC - S1 presentó una LH intermedia (10,64 cm, similar al control). En cuanto a la masa fresca del hipocótilo, las plántulas inoculadas de T1 con EDC - E1 alcanzaron el mayor PFH (4,29 g), seguidas por el T2 tratadas con EDC - Q1 (3,78 g); ambos tratamientos presentaron pesos superiores al T4 control (3,51 g). En
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 186 cambio, el T3 con cepa EDC - S1 no mejoró este atributo, mostrando un PFH (3,55 g) prácticamente igual que el T4 control. Finalmente, el peso seco del hipocótilo (PSH) no evidenció diferencias significativas debidas al tratamiento. La acumulación de materia seca en el hipocótilo permaneció uniforme en todas las plántulas (≈1,1 1,2 g), independientemen te de la cepa de Trichoderma aplicada (Tabla 4). Tabla 4 Efecto de los tratamientos sobre la longitud del hipocótilo, peso fresco de hipocótilo y peso seco hipocótilo Tratamientos LH PFH PSH T1 Trichoderma spp. (EDC - E1) 12,06 ± 1,04 a 4,29 ± 0,40 a 1,20 ± 0,12 a T2 Trichoderma spp. (EDC - Q1) 11,80 ± 0,59 ab 3,78 ± 0,27 ab 1,08 ± 0,13 a T3 Trichoderma spp. (EDC - S 1) 10,64 ± 0,48 ab 3,55 ± 0,17 b 1,07 ± 0,13 a T4 Control H2O 10,28 ± 1,36 b 3,51± 0,31 b 1,07± 0,09 a CV% 9,09 5,56 10,32 Nota: LH (longitud del hipocótilo), PFH (Peso fresco del hipocótilo), PSH (Peso seco del hipocótilo), CV% (Porcentaje de coeficiente de variación). Resultados presentados en medias aritmética ± desviación estándar. Letras diferentes denotan diferencias signific ativas entre tratamientos según Tukey (p<0.05). 3.2. Desarrollo inicial del cultivo de cacao en respuesta a diferentes sustratos ecológicos y Trichoderma spp. 3.2.1. Efecto simple de la altura de planta, diámetro de tallo, número de hojas, índice de robustez, peso fresco y seco foliar de las plantas En la Tabla 5 se presentan los resultados del efecto simple de los factores sobre variables morfológicas de las plantas de cacao, luego de comprobar que no existieron diferencias estadísticas significativas en la interac ción entre los factores A y B. Se procedió al análisis del efecto simple para las variables altura de las plantas (AP), diámetro de tallo (DT), índice de robustez, Los resultados indican que no se observaron diferencias estadísticas significativas entre lo s tratamientos evaluados para ninguna de las variables analizadas (p>0,05), tanto en el factor A (sustratos) como en el factor B (cepas de Trichoderma y control). La altura promedio de las plantas osciló entre 21,07 cm y 22,17 cm; el diámetro de tallo se m antuvo constante alrededor de 0,39 a 0,40 cm; el índice de robustez presento valores entre 5,48 y 5,71. Tabla 5 Efecto simple de los factores sobre las variables altura y diámetro de tallo, índice de robustez de las plantas . Factor A AP DT IR P40%+TM60% 21,62 ± 1,93 a 0,39 ± 0,50 a 5,65 ± 0,49 a
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 187 TU40%+TM60% 21,07 ± 1,56 a 0,40 ± 0.00 a 5,55 ± 0,32 a TM 100% 22,17 ± 1,12 a 0,40 ± 0.00 a 5,51 ± 0,37 a Factor B AP DT IR Trichoderma spp. (EDC - E1) 21,56 ± 1,65 a 0,41 ± 0,03 a 5,71 ± 0,21 a Trichoderma spp. (EDC - Q1) 21,94 ± 1,80 a 0,39 ± 0,03 a 5,61 ± 0,45 a Trichoderma spp. (EDC - S1) 21,56 ± 1,56 a 0,39 ± 0,03 a 5,48 ± 0,42 a Control H 2 O 21,41 ± 1,55 a 0,40 ± 0,00 a 5,48 ± 0,48 a CV% 7,74 7,27 6,81 Nota: Factor A Sustratos (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B Cepas ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichoderma EDC - S1 y Control H 2 O), AP (altura de las plantas), DT (diámetro de tallo), IR (índice de robustez), Resultados presentados en medias aritmética. Letras iguales denotan igualdad significativa entre tratamientos según Tukey (p>0.05). En la Tabla 6 se muestran los resultados del efecto individual de los factores sobre las variables morfológic as de las plantas de cacao no hubo diferencias estadísticamente significativas entre los factores A y B. Se realizó el análisis del efecto individual para las variables número de hojas (NH), peso fresco foliar (PFF) y peso seco foliar (PSF). Los resultados muestran que no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos evaluados en ninguna de las variables analizadas (p>0,05), tanto en el factor A (sustratos) como en el factor B (cepas de Trichoderma y control). el número d e hojas varió levemente entre 8,43 y 9,11 unidades, sin diferencias estadísticas. Asimismo, el peso fresco foliar presentó valores entre 7,86 y 8,39 g, mientras que el peso seco foliar osciló entre 5,11 y 5,46 g, sin evidenciar superioridad de algún tratam iento específico. Tabla 6 . Efecto simple de los factores sobre las variables número de hojas, peso fresco y seco foliar de las plantas Factor A NH PFF PSF P40%+TM60% 8,63 ± 0,80 a 7,86 ± 0,68 a 5,11 ± 0,45 a TU40%+TM60% 8,53 ± 1,15 a 8,36 ± 0,87 a 5,43 ± 0,55 a TM 100% 8,78 ± 1,10 a 8,32 ± 1,19 a 5,42 ± 0,77 a Factor B NH PFF PSF Trichoderma spp. (EDC - E1) 8,43 ± 0,82 a 8,09 ± 1,23 a 5,27 ± 0,78 a Trichoderma spp. (EDC - Q1) 8,48 ± 0,77 a 8,39 ± 1,08 a 5,46 ± 0,70 a Trichoderma s pp. (EDC - S1) 9,11 ± 1,41 a 8,02 ± 0,74 a 5,22 ± 0,49 a Control H2O 8,56 ± 0,89 a 8,21 ± 0,73 a 5,33 ± 0,48 a CV% 11,72 11,98 11,95
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 188 Nota : Factor A sustratos (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B Cepas ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichoderma EDC - S1 y Control H 2 O), NH (número de hojas), PFF (peso fresco foliar), PSF (Peso seco foliar), CV% (Porcentaje de coeficiente de variación). Resultados presentados en medias aritmética. Letras iguales denotan igualdad significativa entre tratamientos según Tukey (p>0.05). 3.2.2. Efecto de los tratamientos sobre el crecimien to de las plantas de cacao altura de planta, diámetro de tallo, número de hojas, índice de robustez, peso fresco y seco foliar de las plantas Los resultados obtenidos en la Tabla 7 evidenciaron que no existieron diferencias estadísticas significativas entr e los tratamientos para las variables de altura de planta, diámetro de tallo y número de hojas (p>0.05). Sin embargo, en la altura de planta, el mayor valor se registró en el tratamiento A3B2 ( Trichoderma EDC - Q1 en TM 100%) con 23,30 cm. Para el diámetro d e tallo, todos los tratamientos oscilaron alrededor de 0,40 cm, sin una diferencia marcada. Respecto al número de hojas, el tratamiento A3B3 ( Trichoderma EDC - S1 en TM 100%) presentó el mayor promedio con 9,90 hojas. Tabla 7 Efecto de los tratamientos de la altura de planta, diámetro de tallo, número de hojas Tratamientos Promedios Sustratos Trichoderma spp. AP DT NH A1 (P 40% + TM 60%) B1 (Trichoderma EDC - E1) 21,73 ± 2,60 a 0,43 ± 0,65 a 8,63 ± 0,58 a A1 (P 40% + TM 60%) B2 (Trichoderma EDC - Q1) 21.17 ± 2,02 a 0,37 ± 0,03 a 8,90 ± 0,38 a A1 (P 40% + TM 60% B3 Trichoderma EDC - S1 21,13 ± 1,65 a 0,37 ± 0,02 a 8,23 ± 0,96 a A1 (P 40% + TM 60%) B4 (Control H 2 O destilada) 22,43 ± 2,25 a 0,40 ± 0,01 a 8,77 ± 1,35 a A2 (TU 40% + TM60%) B1 ( Trichoderma EDC - E1) 20,53 ± 0,77 a 0,40 ± 0,01 a 7,77 ± 0,51 a A2 (TU 40% + TM 60%) B2( Trichoderma EDC - Q1) 21,37 ± 1,98 a 0,40 ± 0,01 a 8,43 ± 1,02 a A2 (TU 40% + TM 60%) B3 ( Trichoderma EDC - S1) 21,87 ± 2,41 a 0,40 ± 0,01 a 9,20 ± 1,83 a A2 (TU 40% + TM 60%) B4 (Control H 2 O destilada) 20,50±1,02 a 0,40 ± 0,02 a 8,70 ± 1,00 a A3 (TM 100%) B1 ( Trichoderma EDC - E1) 22,40± 1,14 a 0,40 ± 0,02 a 8,90 ± 1,02 a A3 (TM 100%) B2 ( Trichoderma EDC - Q1) 23,30± 0,90 a 0,40 ± 0,02 a 8,10 ± 0,84 a A3 (TM 100%) B3 ( Trichoderma EDC - S1) 21,67± 0,80 a 0,40 ± 0,00 a 9,90 ± 1,34 a A3 (TM 100%) B4 (Control H 2 O destilada) 21,30± 0,81 a 0,40 ± 0,04 a 8,20 ± 0,19 a CV% 7,74 7,27 11,72 Nota : Factor A Sustratos (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B Cepas ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichoderma EDC - S1 y Control H 2 O), AP (altura de las plantas), DT (diámetro de tallo), IR (índice de robustez), Resultados presentados en medias aritmética. Letras iguales denotan igualdad significativa entre tratamientos según Tukey (p>0.05).
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 189 En la Tabla 8 se indica que no hubo diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos para las variables de índice de robustez (IR), peso fresco foliar (PFF) y peso seco foliar (PSF) (p>0.05). A pesar de ello, se observaron diferencias numéricas. El mayor valor de IR se obtuvo en el tratamiento A1B3 ( Trichoderma EDC - S1 en P 40% + TM 60%) co n 6,10. En cuanto al peso fresco foliar, el tratamiento A3B2 ( Trichoderma EDC - Q1 en TM 100%) alcanzó el mayor promedio con 9,07 g. Para el peso seco foliar, el tratamiento A3B2 destacó con 5,90 g, sugiriendo que el uso de tierra de monte al 100% en combina ción con Trichoderma EDC - Q1 podría tener un efecto positivo en la acumulación de biomasa foliar. Tabla 8 Efecto de los tratamientos de índice de robustez , peso fresco y seco foliar de las plantas Tratamientos Promedios Sustratos Trichoderma spp. IR PFF PSF A1 (P 40% + TM 60%) B1 (Trichoderma EDC - E1) 5,36 ± 0,48 a 8,23 ± 0,91 a 5,37 ±0,59 a A1 (P 40% + TM 60%) B2 (Trichoderma EDC - Q1) 5,12 ± 0,10 a 7,37 ±0,61 a 4,80 ± 0,40 a A1 (P 40% + TM 60% B3 Trichoderma EDC - S1 6,10 ± 0,29 a 7,67 ± 0,69 a 4,97 ± 0,44 a A1 (P 40% + TM 60%) B4 (Control H 2 O destilada) 6,03 ± 0,09 a 8,17 ± 0,33 a 5,30 ± 0,22 a A2 (TU 40% + TM60%) B1 ( Trichoderma EDC - E1) 5,36 ± 0,55 a 8,47 ± 1,19 a 5,50 ± 0,77 a A2 (TU 40% + TM 60%) B2( Trichoderma EDC - Q1) 5,73 ± 0,29 a 8,73 ± 0,50 a 5,67 ± 0,32 a A2 (TU 40% + TM 60%) B3 ( Trichoderma EDC - S1) 5,81 ± 0,24 a 7,97 ± 0,53 a 5,20 ± 0,35 a A2 (TU 40% + TM 60%) B4 (Control H 2 O destilada) 5,14 ± 0,58 a 8,27 ± 1,27 a 5,37 ± 0,82 a A3 (TM 100%) B1 ( Trichoderma EDC - E1) 5,72 ± 0,25 a 7,57 ± 1,73 a 4,93 ± 1,12 a A3 (TM 100%) B2 ( Trichoderma EDC - Q1) 5,99 ± 0,54 a 9,07 ± 1,30 a 5,90 ± 0,84 a A3 (TM 100%) B3 ( Trichoderma EDC - S1) 5,22 ± 0,42 a 8,43 ± 0,93 a 5,50 ± 0,61 a A3 (TM 100%) B4 (Control H 2 O destilada) 5,28 ± 0,29 a 8,20 ± 0,65 a 5,33 ± 0,42 a CV% 6,81 11,98 11,95 Nota : Factor A sustratos (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B Cepas ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichoderma EDC - S1 y Control H 2 O), NH (número de hojas), PFF (peso fresco foliar), PSF (Peso seco foliar), CV% (Porcentaje de coeficiente de variación). Resultados presentados en medias aritmética. Letras iguales denotan igualdad significativa entre tratamientos según Tukey (p>0.05). 3.3. Influencia de diferentes sustratos ecológicas y Trichoderma spp. en el crecimiento radicular de las plántulas de cacao CCN - 51. 3.3.1. Efecto simple del volumen, longitud, peso fresco y seco radicular de las plántulas (g) En la Tabla 9 se presentan los efectos del factor A (combinaciones de sustratos) y el f actor B (cepas de Trichoderma y control) sobre la longitud radicular (LR) y variables asociadas al desarrollo de plántulas de cacao. Respecto al factor A, se observó que las combinaciones P40%+TM60% y TU40%+TM60% favorecieron el desarrollo de
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 190 raíces, con l ongitudes radiculares promedio de 22,84 ± 3,73 cm y 24,98 ± 2,52 cm respectivamente, sin diferencias significativas entre ellas (p>0,05). No obstante, estas combinaciones superaron al tratamiento con solo tierra de monte (TM), el cual registró una menor lo ngitud radicular (22,16 ± 2,71 cm), aunque estadísticamente similar. En cuanto al volumen radicular (VR), el tratamiento P40%+TM60% presentó el mayor valor (2,78 ± 0,55 cm³), siendo estadísticamente superior al TM (1,96 ± 0,63 cm³). En el análisis del fact or B, la aplicación de Trichoderma EDC - E1 generó los mejores resultados en la longitud radicular (22,1 ± 2,83 cm), volumen radicular (2,91 ± 0,62 cm³), peso fresco radicular (2,16 ± 0,51 g) y peso seco radicular (1,41 ± 0,34 g), con diferencias significati vas frente a las cepas EDC - S1 y el control. Tabla 9 Efecto del efecto simple de los tratamientos sobre la longitud radicular de las plántulas de cacao Factor A VR LR PFR PSR P40%+TM60% 2,78 ± 0,55 a 22,84 ± 3,73 a 1,90 ± 0,54 a 1,24 ± 0,37 a TU40%+TM60% 2,48 ± 0,63 a 24,98 ± 2,52 a 1,83 ± 0,32 a 1,18 ± 0,22 a TM 1,96 ± 0,63 b 22,16 ± 2,71 a 1,48 ± 0,35 b 0,96 ± 0,23 b Factor B VR LR PFR PSR T (EDC - E1) 2,91 ± 0,62 a 22,1 ± 2,83 a 2,16 ± 0,51 a 1,41 ± 0,34 a T (EDC - Q1) 2,62 ± 0,33 ab 24,9 ± 4,06 a 1,89 ± 0,14 a 1,23 ± 0,10 a T (EDC - S1) 2,01 ± 0,77 c 23,40 ± 3,22 a 1,44 ± 0,27 b 0,94 ± 0,17 b Control H2O 2,09 ± 0,58 bc 22,91 ± 2,22 a 1,44 ± 0,32 b 0,92 ± 0,22 b CV% 17,81 12,80 14,00 14,63 Nota : Factor A (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichoderma EDC - S1 y Control H 2 O), CV% (Porcentaje de coeficiente de variación). Resultados presentado s en medias aritmética ± desviación estándar. Letras iguales denotan igualdad significativa entre tratamientos según Tukey (p<0,05). 3.3.2. Efecto de los tratamientos sobre el peso fresco de raíz de las plantas de cacao S e detectó una respuesta significativa entre los factores A (tipo de sustrato) y B (cepa de Trichoderma ) en relación con el peso fresco radicular con coeficiente de variación de 14,00 %, lo que evidencia que la respuesta del sistema radicular varió de acuer do con la combinación específica de sustrato e inoculante. El tratamiento A1B1 (Perlita + Tierra de monte con Trichoderma EDC - E1) presentó el mayor peso (2,67 g). En cambio, las demás combinaciones del mismo sustrato (Perlita + Tierra de monte con Trichode rma EDC - Q1, Perlita + Tierra de monte con Trichoderma EDC - S1 y Perlita + Tierra de monte con Control H 2 O destilada ) mostraron pesos considerablemente menores, entre 1,40 y 1,93 g. En el sustrato A2 (Turba + Tierra de monte), el tratamiento con EDC - E1 (A2B1 ) generó un mayor peso (2,13 g), estadísticamente similar a A1B1, lo que confirma la efectividad de esta cepa en diferentes condiciones
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 191 edáficas. Sin embargo, los otros tratamientos del mismo sustrato mantuvieron pesos entre 1,57 y 1,90 g, sin diferencias significativas entre ellos. Por otro lado, en el sustrato A3 (solo Tierra de monte), fueron inferiores, fluctuando entre 1,17 y 1,83 g, con el tratamiento A3B4 (control H 2 O destilada ) registrando el menor peso (Figura 2). Figura 2 Efecto de la interacción de los tratamientos sobre el peso fresco de raíz de las plántulas de cacao. Nota : Factor A (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichode rma EDC - S1 y Control H 2 O). Letras diferentes denotan diferencias significativas entre tratamientos según Tukey (p<0.05). 3.3.3. Efecto de los tratamientos sobre el peso seco de raíz de las plantas de cacao. Se observó una respuesta significativa con un coeficiente de variación de 14,63% entre el tipo de sustrato (Factor A) y la cepa de Trichoderma o control (Factor B) en cuanto al peso seco de raíz. El mayor peso se registró en el tratamiento A1B1 (Perlita + Tierra de monte con Trichoderma EDC - E1), con 1,77 g. Seguido de la combinación A2B1 (Turba + Tierra de monte con EDC - E1), con 1,37 g. En contraste, los tratamientos A3B3 (tierra de monte con Trichoderma EDC - S1) y A3B4 (Tierra de monte con control H 2 O desti lada ) mostraron peso seco radicular inferiores, con 0,83 y 0,73 g. Las demás combinaciones presentaron pesos que oscilaron entre 0,9 y 1,27 g (Figura 3).
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 192 Figura 3 Efecto de la interacción de los tratamientos sobre el peso seco de raíz de las plántulas de cacao Nota : Factor A (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichoderma EDC - S1 y Control H 2 O). Letras diferentes denotan diferencias sig nificativas entre tratamientos según Tukey (p<0,05). 3.3.4. Efecto de los tratamientos del volumen radicular (cm 3 ) S e observó una diferencia significativa en el volumen del sistema radicular (p < 0,05), con un coeficiente de variación de 17,81%. El mayor volumen se registró en el tratamiento con perlita + tierra de monte y Trichoderma EDC - E1 (3,33 cm³), seguido por las combinaciones de perlita + tierra de monte con Trichoderma EDC - Q1 y EDC - S1, que lograron volúmenes cercanos a 2,90 cm³. El sustrato de turba con tierra de monte + EDC - E1 también presentó un volumen destacado de 3,10 cm³, mientras que la combinación turba + tierra de monte con EDC - Q1 alcanzó 2,53 cm³. En contraste, los tratamientos con tierra de monte 100% sin Trichoderma (H O destilada) y con la cepa EDC - S1 mostraron los volúmenes más bajos con 1,90 y 1,20 cm³, respectivamente, evidenciando una reducción co nsiderable en el volumen radicular en la ausencia de Trichoderma (Figura 4).
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 193 Figura 4 Efecto de la interacción de los tratamientos sobre el volumen radicular de las plántulas de cacao Nota : Factor A (Perlita 40 % + Tierra de monte 60%, Turba 40% + Tierra de monte 60% y Tierra de monte 100%) Factor B ( Trichoderma EDC - E1, Trichoderma EDC - Q1, Trichoderma EDC - S1 y Control H 2 O). Letras diferentes denotan diferencias significativas entre tratamien tos según Tukey (p<0,05). 4. Discusión 4.1. Viabilidad de la aplicación de Trichoderma spp en la germinación de semillas de cacao La aplicación de Trichoderma spp. durante la etapa de germinación de semillas de cacao mostró un efecto positivo en diversas variables asociadas al desarrollo inicial de las plántulas. Se observó una mejora en la viabilidad y vigor de las semillas tratadas, lo que sugiere que la inco rporación de cepas específicas de este hongo benéfico puede ser una herramienta eficaz para optimizar el proceso de establecimiento del cultivo en vivero. Este resultado es coherente con la capacidad reconocida de Trichoderma spp. para estimular procesos f isiológicos relacionados con la germinación (González - León et al., 2023) . Desde el punto de vista fisiológico, Trichoderma spp. actúa estimulando la producción de fitohormonas como auxinas, giberelinas y citoquininas, las cuales regulan el crecimiento y la diferenciación celular (Abdulla et al., 2023) . En el contexto de la germinación, estas hormonas juegan un papel fundamental en la activación del metabolismo de la semilla, promoviendo la elongación del hipocótilo y el crecimiento
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 194 radicular (Lee et al. , 2023) . Este efecto se traduce en una emergencia más rápida y vigorosa de las plántulas, como se evidenció en el experimento. Además de su acción hormonal, Trichoderma spp. mejora la disponibilidad de nutrientes esenciales en la rizosfera mediante la so lubilización de fósforo y la movilización de micronutrientes como hierro y zinc (de Sousa et al., 2021) . Estos elementos son clave en el proceso de germinación, ya que están involucrados en la síntesis de enzimas y proteínas necesarias para el desarrollo inicial (Lee et al., 2023) . La mayor absorción de nutrientes facilita un crecimiento equilibrado de la raíz y la parte aérea, lo cual se reflejó en el mayor desarrollo observado en las plántulas tratadas (Asrofi et al., 2020) . Otro mecanismo important e es la acción antagonista de Trichoderma spp. frente a patógenos del suelo (Sui et al., 2022) . Durante la germinación, las semillas son especialmente vulnerables a infecciones fúngicas, y la presencia de Trichoderma en la rizosfera actúa como una barrer a biológica al competir por espacio y nutrientes, además de producir compuestos antimicrobianos que inhiben el desarrollo de microorganismos fitopatógenos (de Lima et al. 2022) . Este efecto indirecto contribuye a mejorar la sanidad del sistema radicular y aumenta la probabilidad de una germinación exitosa (Arsyadmunir et al., 2023) . El presente hallazgo concuerda con lo reportado por de Sousa et al. (2021) , quienes observaron un mayor vigor en plántulas de cacao CCN - 51 tratadas con cepas de Trichoderma , destacándose mejoras en el crecimiento foliar y la colonización de pelos radiculares. De forma similar, Chavez - Jalk et al. (2022) , indicaron que cepas com o T. breve incrementaron el número de hojas y el contenido de clorofila en ecotipos de cacao nativo, lo que respalda el efecto bioestimulante observado también en esta investigación. Asimismo, Chóez - Guaranda et al. (2023) demostraron que la aplicación de T. harzianum no solo ayudó a controlar enfermedades como la moniliasis, sino que también mejoró la nutrición y fisiología de los clones de cacao, incrementando su rendimiento. Estos resultados coinciden con la presente investigación, donde se evidenció qu e las cepas de Trichoderma utilizadas influyeron positivamente desde la fase de germinación, estableciendo una base sólida para el desarrollo posterior de las plántulas. 4.2. Desarrollo inicial del cultivo de cacao en respuesta a diferentes sustratos ecoló gicos y Trichoderma spp. El desarrollo inicial del cultivo de cacao no estuvo influenciado por la interacción entre los diferentes sustratos ecológicos y las cepas de Trichoderma spp. aplicadas. Se observó que ciertos tratamientos favorecieron un mayor crecimiento en variables como el diámetro del tallo, volumen radicular y biomasa aérea, lo que indica que los microorganismos benéficos pueden ser determinante para mejorar la calida d fisiológica de las plantas bajo condiciones de invernadero (López et al., 2022) .
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 195 Este efecto puede atribuirse al papel sinérgico entre los componentes del sustrato ecológico y los metabolitos secundarios producidos por Trichoderma spp (Patiño et al., 2 022) . La turba y la tierra de monte, por su parte, ofrecieron un entorno rico en materia orgánica, aireación y retención de humedad, condiciones que favorecen la actividad microbiana beneficiosa y el desarrollo de un sistema radicular robusto, esencial d urante las primeras fases de crecimiento (Botello et al., 2022) . Trichoderma spp. actuó como bioestimulante en las plantas al inducir cambios en la arquitectura radicular y favorecer la absorción de nutrientes (Guo et al., 2022) . Este hongo es capaz de producir fitohormonas como auxinas, ácido abscísico y ácido indolacético, que regulan la elongación celular y la formación de raíces laterales, contribuyendo así a una mayor exploración del suelo y eficiencia en la toma de agua y minerales (Poveda, 2021) . Este efecto se ve potenciado cuando el hongo coloniza adecuadamente un sustrato ecológico compatible (Vera - Cruz et al., 2023) . Además del efecto hormonal, Trichoderma spp. participa en la solubilización de fosfatos insolubles y en la movilización de m icronutrientes esenciales, lo que incrementa la disponibilidad de nutrientes para las plantas (Campos et al., 2020) . En consecuencia, se favorece el desarrollo de la biomasa foliar, un indicador directo del estado nutricional de la planta (Chaghouri et a l., 2024) . La interacción entre la turba, rica en materia orgánica, y las cepas más activas del hongo permitió una nutrición más equilibrada y un crecimiento sostenido (Yao et al., 2023) . Investigaciones previas en cacao, como las realizadas por Vargas et al. (2024) , mostraron que combinaciones de turba y tierra de monte promovieron un crecimiento radicular significativamente superior al control, lo que coincide con los hallazgos de este estudio. Por otro lado, Ortega et al. (2020) observaron que , l a aplicación de Trichoderma harzianum en clones de cacao no solo ayudó en el control de enfermedades, sino que también mejoró variables de rendimiento y vigor vegetal, incluyendo el grosor del tallo y el índice de robustez. Estos resultados discrepan de lo observado en el presente estudio, do nde ciertos tratamientos con cepas seleccionadas y sustratos ecológicos mejoraron la morfología estructural de las plantas. 4.3. Influencia de diferentes sustratos ecológicas y Trichoderma spp. en el crecimiento radicular de las plantas de cacao CCN - 51. Lo s resultados obtenidos en la presente investigación demostraron que el crecimiento radicular del cacao CCN - 51 estuvo influenciado por la interacción entre los diferentes sustratos ecológicos y las cepas de Trichoderma spp. El efecto simple el desarrollo vi goroso del sistema radicular puede atribuirse a la mejora de las condiciones físicas y biológicas del sustrato, así como a los efectos bioestimulantes inducidos por Trichoderma spp (López - Valenzuela et al., 2022) . Trichoderma spp. ha sido ampliamente re conocido por su capacidad para estimular el crecimiento radicular a través de la producción de fitohormonas como auxinas y ácido indolacético (AIA), que promueven el alargamiento celular y la formación de raíces
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 196 laterales (Guzmán - Guzmán et al., 2023) . Es ta estimulación directa sobre los tejidos radiculares mejora la capacidad exploratoria del sistema de raíces, permitiendo un mayor acceso a nutrientes y agua, fundamentales en las primeras etapas del desarrollo de las plantas 3 Adicionalmente, este hongo a ctúa como solubilizador de compuestos minerales, liberando nutrientes que normalmente se encuentran en formas no disponibles para las plantas (Cano, 2011) . A través de la producción de enzimas como fosfatasas y sideróforos, Trichoderma spp. mejora la disponibilidad de fósforo y micronutrientes como hierro y zinc (Rodríguez y Vargas 2022) , esenciales para la formación de tejidos radiculares funcionales y v igorosos (Harni et al., 2020) . Esto se traduce en una mayor biomasa radicular y una mejor relación entre raíz y parte aérea (Cuenca et al. 2022) . En cambio, Malca - Cerna et al. (2025) demostraron que , el uso de Trichoderma spp. en combinación con bioc har en plantas de cacao promovió un desarrollo radicular significativamente mayor, fortaleciendo la arquitectura de la raíz y aumentando su longitud y peso. De manera similar, Rojas et al. (2025) reportaron que , distintos aislados de Trichoderma incremen taron la longitud y grosor de raíces en cultivos tratados, evidenciando su potencial como bioestimulante radicular. Así mismo, Carranza et al. (2025) , en un estudio con cacao, señalaron que la inoculación con Trichoderma spp., en combinación con sustratos adecuados, fortalece el crecimiento inicial de las plantas de cacao, lo que aumenta su vigor y potencial productivo en sistemas agroecológicos sostenibles. Estos resultados confirman que el uso de cepas seleccionadas de Trichoderma spp. no solo t iene efectos positivos sobre el crecimiento aéreo, sino que también potencia significativamente el desarrollo subterráneo del cultivo de cacao. 5. Conclusiones La aplicación de Trichoderma spp. (cepa EDC - E1) en plántulas de T . cacao L. alcanzó una tasa de germinación del 100% y promovió significativamente la longitud del hipocótilo y del sistema radicular. El sustrato compuesto por turba más tierra de monte inoculado con la cepa EDC - E1 incr ementó el diámetro del tallo, el índice de robustez y la biomasa aérea de las plántulas. La combinación de Trichoderma spp. (EDC - E1) con sustrato de perlita más tierra de monte favoreció el volumen radicular y la acumulación de biomasa subterránea fresca y seca. Los resultados confirman que la aplicación combinada de sustratos ecológicos específicos y la cepa EDC - E1 de Trichoderma spp. mejora significativamente el establecimiento inicial de plántulas de cacao en invernadero. Esta estrategia biotecnológica r epresenta una alternativa viable y sostenible para optimizar la producción de material vegetal de calidad en sistemas de propagación de T. cacao L. Se recomienda evaluar el desempeño de esta cepa en condiciones de campo y su efecto sobre el rendimiento pro ductivo a largo plazo. Contribución de los autores: M.S.C.P. y Y.A.C.M. planificaron la investigación y redactaron el manuscrito; R.A.R.R. y J.N.G.C. analizaron los datos; Y.A.C.M. y R.J.H.F. llevaron a cabo la investigación en campo; redacción del borrado r original,
Multidisciplinary Collaborative Journal Multidisciplinary Collaborative Journal | Vol.0 3 | Núm.04 | Oct Dic | 202 5 | https://mcjournal.editorialdoso.com 197 Y.A.C.M. y R.J.H.F.; redacción, revisión y edición, M.S.C.P., R.J.H.F., R.A.R.R. y J.N.G.C. Todos los autores contribuyeron a la discusión, comentaron los borradores y evaluaron la versión final . Financiamiento: Esta investigación no ha recibi do financiación externa Agradecimientos: Ing. Marycruz Espinoza Torres; Evelin Carbo Castro y Antonio Mendoza León. Declaración de disponibilidad de datos: Los datos están disponibles previa solicitud a los autores de correspondencia: mcarranza@uteq.edu.ec Conflicto de interés: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses Referencias Abad, A., Acuña, C., y Naranjo, E. (2020). El cacao en la Costa ecuatoriana: estudio de su dimensión cultural y económica. Estudios de la Gestión: revista internacional de administración , 7 , 59 - 83. Abdulla, G. A., Saleh, H. M., y Al - Hakeem, A. M. (2023). Effects of Trichoderma Harzianum and Trichoderma Asperellum Against Egg of Meloidogyne Incognita under Laboratory Condition. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 1213 (1). https://doi.org/10.1088/1755 - 1315/1213/1/012011 Adetunji, C. O., Oloke, J. K., Osemwegie , O. O., y Ehis - Eriakha, C. B. (2022). Use of agro - wastes for Lasiodiplodia pseudotheobromae (C1136) production with sustainable bioefficacy. Environment, Development and Sustainability , 24 (6), 7794 - 7809. https://doi.org/10.1007/s10668 - 021 - 01758 - 6 Anzules Toala, V., Pazmiño Bonilla, E., Alvarado - Huamán, L., Borjas - Ventura, R., Julca - Vera, N., Castro - Cepero, V., y Julca - Otiniano, A. (2022). Incidencia de" cherelle wilt" y enfermedades fungosas en mazorcas de cacao’CCN - 51’en Santo Domingo de los Tsáchilas, Ec uador. Idesia (Arica) , 40 (1), 31 - 37. Arsyadmunir, A., Pawana, G., Badami, K., Sholikhah, N., y Wuryandari, Y. (2023). Effect of biopolymer composition on the viability of Trichoderma sp. as maize - seed coating. Agrovigor: Jurnal Agroekoteknologi , 16 (1). https://doi.org/10.21107/agrovigor.v16i1.16950 Asrofi, M., Sapuan, S. M., Ilyas, R. A., y Ramesh, M. (2020). Characteristic of composite bioplastics from tapioca starch and sugarcane bagasse fiber: Effect of time duration of ultras onication (Bath - Type). Materials Today: Proceedings , 46 . https://doi.org/10.1016/j.matpr.2020.07.254 Auhing Arcos, J. A., Cedeño Moreira, Á. V., Saucedo Aguiar, S., Vera Benites, L. F., Macías Holguín, C. J., y Martínez, H. F. C. (2021). Biodiversidad de e cotipos y rangos de agresividad de Moniliophthora perniciosa , en Theobroma cacao L. nacional del Litoral Ecuatoriano. Scientia Agropecuaria , 12 (4), 599 - 609.
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